本文關(guān)鍵詞：成都地區(qū)獻(xiàn)血人群RhD陰性個(gè)體遺傳學(xué)背景研究　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的： 研究成都地區(qū)RhD初篩陰性獻(xiàn)血者中D變異體的存在情況,重點(diǎn)探索Del型 這類極弱D的分子遺傳學(xué)背景,以及各種變異D獻(xiàn)血者可能的篩查策略。 方法： 2009年6月—2009年11月之間采集74,947份全血中獲得318份鹽水法初篩陰性標(biāo)本,采用間接抗球蛋白試驗(yàn)(IAT)篩選部分D和弱D,對IAT陰性的標(biāo)本采用吸收放散試驗(yàn),篩查Del型,采用序列特異性引物PCR (sequence-speicific primer-polymerase chain reactions, PCR-SSP)檢測各種變異D基因型。吸收放散試驗(yàn)陽性標(biāo)本采用Del DNA分型試劑盒檢測Del等位基因,該試劑盒檢測的Del等位基因包括RHD(M285)、RHD(IVS3+1)、RHD(IVS1+1)、RHD (1227A)、RHD(DEL EX9)、RHD(M1I)、RHD(R10W), RHD(L84P)。對無法確定為上述已知Del型的樣本進(jìn)行RHD基因1-7和9-10外顯子測定,以便了解其外顯子的存在情況。對檢測到的弱D15型、RHD (1227A)和RHD (M11)變異D類型進(jìn)行測序確認(rèn),以及疑難標(biāo)本進(jìn)行測序分析。 結(jié)果： 318例鹽水法初篩陰性標(biāo)本中檢出3例IAT陽性樣本,其中2例是弱D15,1例是部分D(RhDVI III).成都地區(qū)獻(xiàn)血人群中RhDIAT陰性的比例為0.42%。315例IAT陰性標(biāo)本中ccee表型(56.19%)和Ccee表型(32.06%)比例高。303例IAT陰性標(biāo)本吸收放散試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)71例陽性。通過Del DNA分型試劑盒檢測,檢出57例(?)RHD(1227A)型、1例RHD(M1I)型、13例無法確定為已知Del型。13例無法確定為已知Del型的樣本檢測RHD基因1-7和9-10外顯子,發(fā)現(xiàn)11例樣本大部分或全部缺失上述外顯子、2例含有全部上述外顯子。34例吸收放散實(shí)驗(yàn)陰性且含有C或E抗原的標(biāo)本,經(jīng)檢測RHD基因1-7和9-10外顯子及1227A,發(fā)現(xiàn)9例RHD(1227A)型、25例部分或全部缺失型。測序確認(rèn)了弱D15型、RHD (M1I)和RHD (1227A)突變位點(diǎn),對2例含有所有外顯子的標(biāo)本進(jìn)行1-10外顯子測序未發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)。通過血清學(xué)試驗(yàn)和分子生物學(xué)試驗(yàn),我們確定了Del型69例,占IAT篩查RhD陰性的22.77%(69/303)。 結(jié)論： 成都地區(qū)常規(guī)血清學(xué)篩查RhD陰性獻(xiàn)血人群中存在多種D變異體。其中Del型最多。檢測到的Del型中,DelRHD(1227GA)等位基因是Del型的主要等位基因類型,并再次證實(shí)成都地區(qū)Del型與C表型密切相關(guān)。目前我們采用的吸收放散試驗(yàn),Del型的檢測準(zhǔn)確率偏低,Del型的確認(rèn)需要血清學(xué)方法和多種分子生物學(xué)方法相結(jié)合。
[Abstract]:Objective:
To study the existence of D variants in the RhD primary screening negative donors in Chengdu, and to focus on the exploration of Del type
The molecular genetic background of these extremely weak D and the possible screening strategies for various variant D donors.
Method錛，

本文編號：1366032