本文關(guān)鍵詞：OVA免疫耐受因子制備及其免疫活性研究　出處：《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： OVA免疫耐受因子 CD4~+CD25~+T細胞 外周免疫耐受 卵清蛋白

【摘要】： 免疫耐受現(xiàn)象普遍存在,有生理性和病理性兩種表現(xiàn)形式。病理性免疫耐受的發(fā)生與外周免疫耐受的形成、維持及打破密切相關(guān)。1995年,CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞的發(fā)現(xiàn)使外周免疫耐受的研究取得了突破性的進展,大量證據(jù)證實CD4+CD25+ T細胞在外周免疫耐受形成和維持中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。CD4+CD25+ T細胞主要是通過細胞接觸以及分泌抑制性細胞因子如TGF-β、IL-10來介導(dǎo)外周免疫耐受的形成與維持。CD4+CD25+ T細胞表面的眾多分子被證實參與CD4+CD25+ T細胞抑制功能的調(diào)節(jié),但這些分子并不能單獨介導(dǎo)外周耐受的形成。是否存在一些分子能夠不依賴于細胞、獨立地傳遞免疫耐受信息,從而使受體建立并維持抗原特異性的外周免疫耐受,至今未見報道。深入探討這類分子的存在、來源等,不僅對闡明其形成的分子機理,豐富免疫耐受理論有著重要的學(xué)術(shù)意義,研究的結(jié)果也對臨床免疫耐受相關(guān)疾病的治療有著重要的應(yīng)用價值。 本研究以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和4周齡BALB/c小鼠為材料,采用尾靜脈注射、淋巴細胞分離技術(shù)、分子篩離心分離方法、淋巴細胞增殖試驗、流式細胞術(shù)、ELISA、遲發(fā)型超敏反應(yīng)(delayed type hypersensitivity,DTH)等技術(shù),首先建立OVA外周免疫耐受小鼠模型,對其進行鑒定;分離此模型小鼠脾淋巴細胞,裂解獲得不同組分,并鑒定出能夠使4周齡正常BALB/c建立OVA外周免疫耐受的組分,命名為OVA免疫耐受因子(OVA immune tolerant factor,OVA ITF);分離OVA外周免疫耐受小鼠的脾淋巴細胞中的各T細胞亞群,按照OVA ITF制備方法制備各亞群的組分,對其轉(zhuǎn)移OVA免疫耐受特性進行研究。獲得如下研究結(jié)果: 1.成功建立了OVA外周免疫耐受BALB/c小鼠模型,該小鼠OVA特異性T細胞增殖明顯受到抑制,CD4+CD25+ T細胞在CD4亞群中的比例顯著升高。 2.體外試驗顯示,免疫耐受小鼠脾淋巴細胞裂解物中小于3ku的組分(OVA ITF)能顯著抑制靜息態(tài)OVA特異性T細胞克隆的增殖,抑制率達到60%;同時,該因子對活化態(tài)淋巴細胞增殖的抑制率高達70%。而添加分子量大于5ku和3-5ku間的組分,對淋巴細胞增殖的抑制表現(xiàn)為抗原非特異性。 3.轉(zhuǎn)移OVA免疫耐受小鼠脾淋巴細胞裂解物各組分,只有分子量小于3ku的組分(OVA ITF)能夠抗原特異性地抑制受體鼠OVA淋巴細胞克隆的活化;而分子量大于5ku和3-5ku間的組分并無此效應(yīng)。 4.轉(zhuǎn)移試驗中,只有CD4+CD25+T細胞的ITFCD4+CD25+能夠顯著性抑制OVA特異性DTH反應(yīng)、抑制OVA特異性T細胞的增殖,而ITFCD4-和ITFCD4+CD25-無此效應(yīng)。 5.在ITFCD4+CD25+建立的OVA免疫耐受小鼠上,脾淋巴細胞中CD4+CD25+ T細胞在CD4亞群的比例顯著升高,同時脾淋巴細胞分泌高水平的TGF-β1。 6.轉(zhuǎn)移ITFCD4+CD25+和CD4+CD25+ T細胞后,受體小鼠脾淋巴細胞中CD4+CD25+ T細胞的比例以及抑制性細胞因子的分泌水平存在差異。 研究結(jié)果表明,從OVA耐受鼠脾淋巴細胞的CD4+CD25+ T細胞亞群中發(fā)現(xiàn)了一種新型的低分子量(3ku)的活性成分,即OVA ITF。它能夠在分子水平介導(dǎo)正常BALB/c小鼠建立OVA外周免疫耐受,這種分子只能由OVA外周免疫耐受小鼠的CD4+CD25+T細胞產(chǎn)生。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R392.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 郝春秋,馮志華,周永興,聶青和,賈戰(zhàn)生,謝玉梅,康文臻,陳偉紅,張巖;T細胞疫苗對HCV的清除作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2004年24期

2 謝蜀生,何球藻,龔非力,王昌恩;1999年國家自然科學(xué)基金器官移植基礎(chǔ)研究申請項目評述[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊);2000年01期

3 金莉萍,李大金,王明雁,朱曉勇,朱影,袁敏敏,孟毅;過繼轉(zhuǎn)輸胚胎抗原耐受T細胞誘導(dǎo)自然流產(chǎn)孕鼠母胎免疫耐受[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2004年06期

4 沈二霞;;流式細胞儀的原理和臨床應(yīng)用[J];現(xiàn)代醫(yī)學(xué)儀器與應(yīng)用;2008年01期

，

本文編號：1355474