本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)染cxcr4基因?qū)撬栝g充質(zhì)干細胞向SDF-1趨化能力的影響　出處：《福建醫(yī)科大學》2009年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 骨髓間充質(zhì)干細胞 腺病毒載體 定向趨化 cxcr4 SDF-1

【摘要】： 目的:(1)構(gòu)建攜帶cxcr4基因的重組腺病毒載體;(2)將重組腺病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并驗證轉(zhuǎn)染后BMSCs表達CXCR4增加;(3)檢測轉(zhuǎn)染cxcr4基因后的BMSCs向基質(zhì)細胞衍生因子1(stromal cell-derivedfactor-1,SDF-1)的定向趨化能力。 方法:(1)分離培養(yǎng)C57BL/6小鼠BMSCs,并通過利用流式細胞儀檢測其細胞表面標志物CD44和CD34的表達進行鑒定;(2)通過RT-PCR獲取cxcr4基因,亞克隆入pAdTrack-CMV穿梭質(zhì)粒,線性化后與骨架質(zhì)粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重組,篩選并提取重組正確的腺病毒質(zhì)粒,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染293細胞包裝出成熟的具有感染活力的腺病毒顆粒,利用穿梭質(zhì)粒中所帶綠色熒光蛋白(Green fluorescence protein,GFP)報告基因進行病毒滴度和感染活力測定;(3)將攜帶cxcr4基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染BMSCs,分別從熒光表達、蛋白表達來驗證轉(zhuǎn)染成功;(4)并通過Transwell趨化實驗來驗證經(jīng)cxcr4基因轉(zhuǎn)染的BMSCs向SDF-1趨化能力強于未轉(zhuǎn)染的BMSCs,并觀察抗CXCR4中和抗體的干預(yù)作用。 結(jié)果:(1)成功分離培養(yǎng)及鑒定C57BL/6小鼠BMSCs;(2)成功構(gòu)建重組腺病毒載體pAdEasy-1-cxcr4,測序結(jié)果正確,病毒滴度5.3×10~(10)U/ml;(3)轉(zhuǎn)染cxcr4基因前,BMSCs表達CXCR4水平較低,轉(zhuǎn)染后表達CXCR4水平明顯升高;(4)Transwell趨化實驗表明轉(zhuǎn)染cxcr4基因后的BMSCs針對SDF-1的趨化能力比未轉(zhuǎn)染的BMSCs明顯升高(p＜0.05)。 結(jié)論:通過腺病毒載體轉(zhuǎn)染cxcr4基因能夠使BMSCs表達CXCR4增加,并能明顯提高基因轉(zhuǎn)染后的BMSCs向SDF-1定向趨化的能力。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R346

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王滎;王延洲;徐惠成;;deltex-1腺病毒載體的構(gòu)建及其在大鼠bMSCs中的表達[J];第三軍醫(yī)大學學報;2011年15期

2 ;本期專題:骨髓間充質(zhì)干細胞與肝細胞修復(fù)及組織重構(gòu)(本刊中文部)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年23期

3 ;骨髓間充質(zhì)干細胞與肝細胞修復(fù)及組織重構(gòu)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年23期

4 曾文;張偉;王君;鄧若f[;周琦;魏立;齊進;鄧廉夫;;低氧通路對骨髓間充質(zhì)干細胞多向分化能力的影響[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2011年07期

5 林治平;曾榮;胡資兵;林顥;;Wnt信號通路與骨髓間充質(zhì)干細胞神經(jīng)分化[J];廣東醫(yī)學;2011年08期

6 王長軍;殷國勇;李翔;沈國強;;骨髓間充質(zhì)干細胞與成骨細胞復(fù)合培養(yǎng)對成骨細胞增殖的影響[J];江蘇醫(yī)藥;2011年11期

7 張英博;楊大平;;干細胞用于創(chuàng)傷修復(fù)的新進展[J];中國美容醫(yī)學;2011年08期

8 魏林;邱飛;刁勇;;病毒載體的高分子修飾研究進展[J];病毒學報;2011年04期

9 石洋;袁偉;;中藥誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化為成骨細胞的研究進展[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2010年05期

10 羅俊;顧文娟;徐禮;李江;;骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療對心肌梗死后心功能的影響[J];醫(yī)學與哲學(臨床決策論壇版);2011年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 胡曉彥;王季石;方琴;;細胞色素氧化酶P450 2E1基因大鼠骨髓問充質(zhì)干細胞體外抗腫瘤作用的研究[A];貴州省2008年血液學年會論文匯編[C];2008年

2 胡曉彥;王季石;方琴;;重組腺病毒載體介導細胞色素氧化酶P450 2E1轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的表達及其影響[A];貴州省2008年血液學年會論文匯編[C];2008年

3 王季石;胡曉彥;方琴;;組腺病毒載體介導細胞色素氧化酶P450 2E1轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞抗腫瘤效應(yīng)的研究[A];貴州省2008年血液學年會論文匯編[C];2008年

4 王晉慧;姚明忠;顧錦法;孫蘭英;郎明非;劉菁;劉新垣;;腫瘤靶向性腺病毒載體的構(gòu)建[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

5 劉旭;田長富;;癌基因治療中的腺病毒載體的開發(fā)和應(yīng)用(綜述Ⅱ)[A];慶祝黑龍江省免疫學會成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

6 凌昌全;李紹祥;張晨;張亞妮;;攜蜂毒素基因腺病毒載體的構(gòu)建及體外抑瘤實驗研究[A];第九屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學術(shù)研討會論文集[C];2002年

7 馬立新;馬琪;徐松;;新型、簡捷、有效的方法構(gòu)建基于腺病毒載體系統(tǒng)的cDNA表達文庫[A];中國蛋白質(zhì)組學首屆學術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

8 王桂蘭;魯繼榮;成煥吉;馬青山;張云峰;;高滴度含有目的基因IL-4RA的逆轉(zhuǎn)錄病毒的包裝和濃縮[A];中華醫(yī)學會第十四次全國兒科學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

9 吳運譜;張曉華;喬傳玲;;腺病毒載體流感疫苗研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學分會第三次學術(shù)研討會論文集[C];2012年

10 劉金娟;馬翔;;小鼠HSP27基因腺病毒表達載體的構(gòu)建與鑒定[A];第四屆長三角婦產(chǎn)科學術(shù)論壇暨浙江省2009年婦產(chǎn)科學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 李天舒　通訊員 朱丹萍;一研究證實腺病毒載體依然是安全的[N];健康報;2011年

2 趙煒;骨髓間充質(zhì)干細胞可減輕排異反應(yīng)[N];健康報;2004年

3 本報記者 劉松柏;基因治療的探路者[N];經(jīng)濟日報;2010年

4 火言;疫苗研發(fā)全球賽跑[N];中國質(zhì)量報;2003年

5 本報記者 吳潔;為實現(xiàn)“人體配件工廠”的夢想[N];科技日報;2002年

6 萬同己;P53基因與腫瘤基因治療[N];中國醫(yī)藥報;2004年

7 麥迪信;糖尿病基因療法初見成效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

8 加聞;加拿大非典疫苗研究獲新進展[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

9 翁維良：中國中醫(yī)研究院首席研究員，，中國中西醫(yī)結(jié)合學會活血化瘀學會副主任委員，內(nèi)科主任醫(yī)師，博士生導師;心血管病基因療法[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

10 記者　秦軍　;“萬能細胞”巧治心臟病[N];浙江日報;2004年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 林美萍;肝細胞生長因子基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞治療心肌病心力衰竭的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2008年

2 潘廷明;轉(zhuǎn)染cxcr4基因?qū)撬栝g充質(zhì)干細胞向SDF-1趨化能力的影響[D];福建醫(yī)科大學;2009年

3 陳媛媛;hIL-12腺病毒載體的構(gòu)建及在人hBMSCs中的表達[D];山西醫(yī)科大學;2010年

4 宋默;攜帶p53基因和Flt3L配體基因的腺病毒載體的構(gòu)建及鑒定[D];大連醫(yī)科大學;2010年

5 宋付凱;高表達hRAMP1基因腺病毒載體的構(gòu)建及其在兔MSCs中表達的實驗研究[D];遵義醫(yī)學院;2010年

6 劉海斌;腺病毒介導的mda-7/IL-24基因?qū)θ撕戆┘毎鸋ep-2的凋亡作用[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

7 魏菁;腺病毒介導ChM-I基因抑制BMSCs體內(nèi)構(gòu)建的軟骨血管化的實驗研究[D];西北大學;2010年

8 劉海平;非增殖性腺病毒攜帶全長抗體Cetuximab的腫瘤基因治療的研究[D];浙江理工大學;2010年

9 蘇秀云;應(yīng)用AdEasy腺病毒載體系統(tǒng)構(gòu)建攜帶人骨形成蛋白2基因的重組腺病毒[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

10 毛亮;選擇增殖型腺病毒ZD55攜帶自殺基因Dm-dNK(果蠅脫氧核糖核苷酸激酶）治療大腸癌的研究[D];中國醫(yī)科大學;2010年

本文編號：1353490