本文關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)性淋巴瘀滯誘發(fā)胰組織結(jié)構(gòu)及內(nèi)分泌和代謝的變化　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2009年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 胰組織 胰淀肽 糖代謝 脂質(zhì)代謝 胸導(dǎo)管 形態(tài)學(xué)研究

【摘要】： 器官的正常淋巴回流,對(duì)于維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定,具有重要的功能意義。在大分子物質(zhì)(如胰島素等多肽激素和長鏈脂肪酸)的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn),炎癥擴(kuò)散和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移等諸多生理及病理過程中,胰腺的淋巴管系統(tǒng)起著極其重要的作用。 如果胰腺的淋巴回流途徑被阻斷,會(huì)對(duì)胰組織結(jié)構(gòu)和糖脂代謝產(chǎn)生什么樣的影響?目前,尚未見相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道。 分子生物學(xué)和形態(tài)學(xué)研究表明,胰淀肽屬于胰島B細(xì)胞的正常分泌產(chǎn)物;胰腺內(nèi)出現(xiàn)胰淀肽沉積是2型糖尿病典型的早期病理特征。隨著胰島內(nèi)胰淀肽沉積的加重,胰島細(xì)胞的數(shù)量也在逐漸減少;胰島細(xì)胞被胰淀肽沉積取代的多少,決定了2型糖尿病的發(fā)展或嚴(yán)重程度。胰淀肽為什么會(huì)形成淀粉樣蛋白沉積,并進(jìn)一步影響胰島的內(nèi)分泌功能?在不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,關(guān)于胰淀肽能否形成胰島淀粉樣變,胰淀肽等大分子物質(zhì)的正常轉(zhuǎn)運(yùn)途徑是直接進(jìn)入毛細(xì)血管,還是通過毛細(xì)淋巴管吸收經(jīng)淋巴運(yùn)輸間接進(jìn)入血液,淋巴回流受阻是否影響胰島淀粉樣變的因素,仍需深入研究。 本實(shí)驗(yàn)分為四部分,在對(duì)大鼠胸導(dǎo)管進(jìn)行詳細(xì)解剖的基礎(chǔ)上,將其胸導(dǎo)管進(jìn)行選擇性有效結(jié)扎,造成淋巴回流阻滯的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,利用組織切片的常規(guī)HE染色和剛果紅染色,免疫組織化學(xué)染色方法,對(duì)正常和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胰腺組織標(biāo)本,進(jìn)行光鏡和透射電鏡觀察,探討實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胰腺組織的細(xì)微和超微結(jié)構(gòu)變化,觀察胰淀肽在胰島及其周圍的沉積情況;檢測正常和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血糖、血脂、胰島素和C-肽的變化。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果如下: 第一部分結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管誘發(fā)胰淋巴淤滯模型的建立 目的:本實(shí)驗(yàn)擬在對(duì)大鼠胸導(dǎo)管進(jìn)行詳細(xì)解剖的基礎(chǔ)上,將其胸導(dǎo)管進(jìn)行選擇性有效結(jié)扎,造成淋巴回流阻滯的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并通過形態(tài)學(xué)觀察進(jìn)行評(píng)價(jià)。 方法:選用10月齡SD大鼠20只(由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供),雌雄各半,分籠飼養(yǎng),隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)(手術(shù))組和對(duì)照(假性手術(shù))組;實(shí)驗(yàn)前30~60分鐘用植物油2~5毫升灌胃,用6%水合氯醛(5ml/kg)腹腔注射麻醉,在手術(shù)顯微鏡下,假性手術(shù)組只充分游離胸導(dǎo)管而不結(jié)扎。手術(shù)組在充分暴露胸導(dǎo)管的基礎(chǔ)上,于腹部膈腳下將其結(jié)扎。選擇在腹部對(duì)大鼠胸導(dǎo)管起始部,進(jìn)行結(jié)扎造模,以減少結(jié)扎副作用和提高造模成功率。術(shù)后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,常規(guī)喂養(yǎng)。造模術(shù)后6個(gè)月的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,在6%水合氯醛(5ml/kg)腹腔注射深度麻醉下,快速切取大鼠胰組織標(biāo)本,部分胰腺標(biāo)本行石蠟包埋和組織切片,行常規(guī)HE和剛果紅染色或免疫組織化學(xué)染色后光鏡觀察。 結(jié)果:1.大鼠胰組織切片HE染色光鏡觀察顯示,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,胰腺小葉間隙顯著增寬,出現(xiàn)明顯的淋巴管擴(kuò)張、結(jié)締組織增生和脂肪堆積。2.實(shí)驗(yàn)組術(shù)后動(dòng)物剛果紅染色切片的光鏡觀察提示,胰腺小葉組織間隙明顯增寬,胰島表現(xiàn)為朱紅色剛果紅著色現(xiàn)象。 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胰組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化提示,胸導(dǎo)管結(jié)扎可導(dǎo)致胰淋巴引流障礙,引起胰淋巴管擴(kuò)張、結(jié)締組織間隙增寬、脂肪堆積以及胰淀肽沉積等。采用腹部結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管的手術(shù)方法,可以建立胰淋巴淤滯的動(dòng)物模型,為進(jìn)一步探討實(shí)驗(yàn)性淋巴淤滯對(duì)胰組織細(xì)微和超微結(jié)構(gòu)、以及對(duì)內(nèi)分泌和代謝的影響奠定了基礎(chǔ)。 第二部分結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管誘發(fā)胰組織結(jié)構(gòu)變化和胰淀肽沉積的形態(tài)學(xué)觀察 目的:胰淀肽是由37個(gè)氨基酸組成的多肽,屬于胰島B細(xì)胞的正常分泌產(chǎn)物,并與胰島素共同貯存于B細(xì)胞的分泌顆粒內(nèi),胰淀肽沉積是2型糖尿病典型的早期病理特征,并隨年齡的增長而增多。通過腹部結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管,建立胰淋巴淤滯動(dòng)物模型,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胰組織結(jié)構(gòu)變化和胰淀肽沉積情況,探討淋巴淤滯對(duì)胰組織細(xì)微和超微結(jié)構(gòu)的影響。 方法:10月齡大鼠20只,隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)(手術(shù))組和對(duì)照(假性手術(shù))組;造模后6個(gè)月取材,部分胰組織做石蠟包埋切片,HE和剛果紅染色;部分組織切片做免疫組織化學(xué)染色和光鏡觀察。 結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)組大鼠胰組織切片HE染色光鏡觀察顯示,胰腺小葉間隙顯著增寬,出現(xiàn)明顯的淋巴管擴(kuò)張、結(jié)締組織增生和脂肪堆積,胰島明顯可見呈淡染。2.術(shù)后動(dòng)物剛果紅染色切片的光鏡觀察提示,胰腺小葉組織間隙明顯增寬,胰島表現(xiàn)為朱紅色剛果紅著色現(xiàn)象。3.胰淀肽免疫組織化學(xué)染色切片的光鏡觀察表明,在術(shù)后動(dòng)物的胰島及其周圍,呈現(xiàn)胰淀肽免疫反應(yīng)強(qiáng)陽性棕褐色著色反應(yīng)。 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胰組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化提示,胸導(dǎo)管結(jié)扎可導(dǎo)致胰淋巴引流障礙,引起胰淋巴管擴(kuò)張、結(jié)締組織間隙增寬、脂肪堆積以及胰淀肽沉積等,結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管所致的結(jié)構(gòu)變化包括脂肪變和淀粉樣變,這些結(jié)構(gòu)變化會(huì)進(jìn)一步影響胰島的內(nèi)分泌功能。 第三部分結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管對(duì)胰組織結(jié)構(gòu)變化及胰島激素和糖代謝的影響 目的:在生理情況下,胰島素由B細(xì)胞分泌入組織間隙后,可以進(jìn)入胰島周圍的淋巴管,通過淋巴進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn),胰腺的淋巴系統(tǒng),是胰島素正常轉(zhuǎn)運(yùn)的一條重要途徑。但是,如果這條途徑被阻斷,會(huì)不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的糖代謝產(chǎn)生影響?目前,尚未見相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用腹部結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管,建立胰淋巴淤滯動(dòng)物模型,觀察術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胰組織結(jié)構(gòu)變化和胰淀肽沉積情況,探討實(shí)驗(yàn)性淋巴淤滯對(duì)大鼠胰島激素及糖代謝的影響。 方法:30只10月齡SD大鼠隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)(手術(shù))組15只和對(duì)照(假性手術(shù))組15只;造模后6個(gè)月取材,部分胰腺標(biāo)本行石蠟包埋和組織切片,行常規(guī)HE和剛果紅染色后光鏡觀察;部分標(biāo)本做冰凍切片,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色和光鏡觀察;部分標(biāo)本進(jìn)行透射電鏡樣品制備和觀察。并于胸導(dǎo)管結(jié)扎前后及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死前,分別取靜脈血檢測空腹血糖、胰島素及C-肽,其中血糖做結(jié)扎前后的自身對(duì)照差異檢驗(yàn),胰島素和C-肽做實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的組間差異檢驗(yàn)。 結(jié)果:1.胰淀肽免疫組織化學(xué)染色切片的光鏡觀察表明,在術(shù)后動(dòng)物的胰島及其周圍,呈現(xiàn)胰淀肽免疫反應(yīng)強(qiáng)陽性棕褐色著色反應(yīng)。2.術(shù)后動(dòng)物剛果紅染色切片的光鏡觀察提示,胰腺小葉組織間隙明顯增寬,胰島表現(xiàn)為朱紅色剛果紅著色現(xiàn)象。3.超薄切片透射電鏡觀察顯示,胰腺小葉間隙增寬,可見血管和擴(kuò)大的淋巴管;胰島細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞間隙內(nèi)可見大量脂滴樣物質(zhì)和膠原原纖維樣結(jié)構(gòu)。此外,在增寬的胰組織間隙內(nèi),胰島細(xì)胞間隙增寬,甚至擴(kuò)大形成管狀或池狀;除有明顯的脂類物質(zhì)堆積,還常可見到溢出血管外又難以被吸收的紅細(xì)胞;可見分泌顆粒大小和電子密度不同的胰島細(xì)胞,在胰島B細(xì)胞內(nèi),有些分泌顆粒的暈環(huán)明顯增寬;有些胰島細(xì)胞的核,其核膜變得模糊不清,出現(xiàn)核染色質(zhì)邊集甚至核固縮,呈似細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。4.胸導(dǎo)管結(jié)扎組大鼠術(shù)后血糖升高,與術(shù)前基礎(chǔ)值相比,差異具有顯著性(P 0.05);術(shù)后結(jié)扎組空腹血清胰島素水平下降,與假手術(shù)對(duì)照組相比差異顯著(P 0.05),C-肽變化不明顯,組間差異不具有顯著性(P 0.05)。 結(jié)論:術(shù)后實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的血糖水平明顯增高,排除手術(shù)過程的應(yīng)激影響,手術(shù)組血糖水平較術(shù)前明顯增高,推測結(jié)扎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胸導(dǎo)管可導(dǎo)致胰淋巴引流障礙,脂肪堆積以及胰淀肽沉積等,胰島細(xì)胞功能受損,部分胰島細(xì)胞凋亡,胰島激素轉(zhuǎn)運(yùn)受阻,血中胰島素濃度下降,并進(jìn)一步影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的糖代謝,導(dǎo)致血糖升高。 第四部分結(jié)扎大鼠胸導(dǎo)管對(duì)脂質(zhì)代謝和胰組織結(jié)構(gòu)的影響 目的:探討胸導(dǎo)管結(jié)扎對(duì)脂質(zhì)代謝的影響,揭示淋巴回流障礙誘發(fā)胰組織的細(xì)微和超微結(jié)構(gòu)變化。 方法:選用10月齡SD大鼠30只,隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照(10只)組和結(jié)扎胸導(dǎo)管模型(20只)組,建立淋巴淤滯動(dòng)物模型。術(shù)后6個(gè)月取靜脈血標(biāo)本進(jìn)行血脂檢測;部分胰組織標(biāo)本做石蠟包埋切片,HE和剛果紅染色光鏡觀察;部分胰組織進(jìn)行透射電鏡樣品制備和觀察。 結(jié)果:1.與對(duì)照組相比,胸導(dǎo)管結(jié)扎模型組大鼠游離脂肪酸濃度明顯下降(P0.001),甘油三酯濃度也下降(P0.001),然而,膽固醇濃度無顯著變化(P0.05)。2.常規(guī)HE和剛果紅染色切片光鏡觀察顯示,模型組大鼠的胰腺小葉間隙增寬,淋巴管擴(kuò)張,呈明顯的結(jié)締組織增生和脂肪堆積。3.超薄切片透射電鏡觀察顯示,模型組大鼠的胰島細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞間隙內(nèi)可見大量脂滴樣物質(zhì)、紅細(xì)胞和膠原原纖維樣結(jié)構(gòu)。 結(jié)論:胸導(dǎo)管結(jié)扎可引起胰淋巴回流障礙和脂質(zhì)代謝紊亂,導(dǎo)致胰腺組織間隙增寬、脂肪堆積、胰島細(xì)胞內(nèi)大量脂滴出現(xiàn)等,這些結(jié)構(gòu)變化可能影響胰的內(nèi)、外分泌功能。 對(duì)大鼠胸導(dǎo)管起始部進(jìn)行選擇性有效結(jié)扎后,肉眼可見乳糜池明顯充盈,乳白色腸系膜淋巴管充分顯現(xiàn),成功建立了淋巴回流阻滯的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型;術(shù)后半年取胰組織標(biāo)本光鏡觀察顯示,胰腺內(nèi)出現(xiàn)淋巴管擴(kuò)張、結(jié)締組織間隙增寬、脂肪堆積以及胰淀肽沉積等形態(tài)學(xué)變化;實(shí)驗(yàn)組胰組織透射電鏡樣品觀察提示胰島細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴,胰島B細(xì)胞分泌顆粒擴(kuò)大、暈環(huán)增寬等超微結(jié)構(gòu)改變;胰島細(xì)胞功能受損,血中胰島素濃度下降,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的糖代謝和脂質(zhì)代謝發(fā)生紊亂。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 傅劍華;胡垎;黃偉釗;楊弘;朱志華;鄭斌;;預(yù)防性胸導(dǎo)管結(jié)扎術(shù)在食管癌根治術(shù)中應(yīng)用的評(píng)價(jià)[J];癌癥;2006年06期

2 李濱,孫永波,馬榮花;與糖尿病有關(guān)的多肽及其生理意義[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1997年02期

3 王忠民,喬剛,李漢臣;食管癌切除患者胸導(dǎo)管預(yù)防性結(jié)扎的細(xì)胞免疫及臨床研究[J];中國醫(yī)師雜志;2003年11期

4 徐佳;李果;;胰淀素引起胰島β細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J];國際內(nèi)分泌代謝雜志;2006年06期

5 王昕;楊文英;蕭建中;王娜;趙文惠;劉雪麗;;靜脈輸注胰淀素對(duì)大鼠胰島激素分泌及血糖的影響[J];國際內(nèi)科學(xué)雜志;2008年07期

6 周和超;黃貴心;;脂毒性與胰島素抵抗的相關(guān)研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊);2007年01期

7 湯躍卿;食管癌術(shù)中多平面縫扎胸導(dǎo)管預(yù)防術(shù)后乳糜胸的發(fā)生[J];廣州醫(yī)藥;2000年01期

8 王保芝;堅(jiān)持腰部運(yùn)動(dòng)可防治肥胖和糖尿病[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

9 王保芝,王學(xué)禮,王樹峰,趙玉珍,劉貴生,王建欽;胰組織結(jié)構(gòu)提示多肽胰島素的正常轉(zhuǎn)運(yùn)經(jīng)淋巴而非門脈途徑[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2002年01期

10 張榮新;劉小五;王圣應(yīng);張暉;;選擇性結(jié)扎胸導(dǎo)管在預(yù)防食管癌術(shù)后乳糜胸中的應(yīng)用[J];解剖與臨床;2007年02期

，

本文編號(hào)：1350727