本文關(guān)鍵詞：缺氧誘導肝纖維化動物模型的建立　出處：《第四軍醫(yī)大學》2010年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 缺氧 肝纖維化 大鼠 模型

【摘要】：原發(fā)性肝癌(Primary liver carcinoma,PLC)是嚴重危害人類健康的常見惡性腫瘤之一,全球每年新增約60萬肝癌患者,我國肝癌年發(fā)病人數(shù)約35萬,有30萬人死于此病,發(fā)病率和死亡率均占惡性腫瘤第二位。目前,肝切除術(shù)、肝移植等根治性外科治療仍是肝癌首選治療方法。但是肝癌發(fā)病隱匿,早期患者可能沒有任何癥狀,將近70%的患者就診時已屬中晚期,失去了手術(shù)的機會。 經(jīng)導管動脈化療栓塞術(shù)(Transcatheter arterial chemoembolization, TACE)被公認為是不能手術(shù)切除肝癌的首選治療方法,該治療能夠阻斷肝癌供血的靶動脈,導致肝癌組織缺血壞死�；颊咧委熀笈R床病情明顯改善,腫瘤體積縮小,癥狀緩解或消失。介入栓塞治療降低了肝癌組織的血管侵襲及轉(zhuǎn)移的幾率,部分病人可重新獲得手術(shù)切除機會。但是,臨床觀察發(fā)現(xiàn),介入栓塞治療或多或少都會影響患者的肝臟功能,特別是反復介入栓塞后,大部分伴有肝硬化的肝癌患者出現(xiàn)肝纖維化程度進行性加重,肝功能持續(xù)下降,嚴重影響了肝癌介入栓塞治療的遠期療效及患者生存期。 以往研究認為,肝纖維化是各種原因引起的慢性肝損傷所共有的病理改變,介入栓塞治療后化療藥物、炎癥、組織缺血、缺氧以及治療后可能出現(xiàn)的機體免疫機能變化、細胞因子調(diào)控失常,均可從不同的環(huán)節(jié)啟動肝纖維化過程,并最終加重肝纖維化。栓塞所致的組織缺氧是導致肝癌組織壞死的主要原因,也可能是加重肝纖維化重要的因素之一。 因此,本研究擬建立一種肝臟組織缺氧導致的肝纖維化動物模型,用于介入治療后缺氧導致肝纖維化機制的研究,并且研究這一過程中可能的關(guān)鍵分子,為介入栓塞后肝纖維化的治療提供理論依據(jù)。本研究分兩個部分: 第一部分肝固有動脈結(jié)扎術(shù)建立大鼠肝臟缺氧模型 目的:利用肝動脈結(jié)扎術(shù)(Hepatic arterial ligation,HAL)的手術(shù)方法,建立大鼠肝臟缺氧模型。 方法:健康成年Sprague Dawley(SD)大鼠8只,隨機抽取3只進行解剖,了解實驗動物肝臟位置、大小、分葉情況,確定腹腔血管走行及分支情況,掌握肝門部管道的位置關(guān)系及解剖分離技術(shù)。另外5只大鼠麻醉后行開腹手術(shù),分離暴露肝門部,結(jié)扎其肝固有動脈造成肝臟缺氧,縫合腹壁。觀察手術(shù)后大鼠基本生命體征變化和存活情況。 結(jié)果:通過對3只實驗動物的解剖觀察,熟悉了大鼠肝臟及腹腔血管的解剖位置。對5只大鼠進行肝固有動脈結(jié)扎術(shù),1只動物由于術(shù)中誤傷肝門靜脈導致大出血死亡,其余動物手術(shù)順利,術(shù)后全部存活,生命體征平穩(wěn)。 結(jié)論:大鼠肝固有動脈結(jié)扎術(shù)手術(shù)成功率高,適合用于建立肝臟缺氧的動物模型。 第二部分肝臟缺氧誘導的大鼠肝纖維化 目的:利用肝臟缺氧模型,觀察手術(shù)后大鼠肝臟病理改變,初步分析缺氧誘導肝纖維化形成過程中起關(guān)鍵作用的分子。 方法:10只SD大鼠,隨機分為缺氧組和對照組,每組5只,缺氧組行肝固有動脈結(jié)扎術(shù),對照組手術(shù)開腹分離至肝門部后即縫合腹壁。14天后處死實驗動物取出肝臟,福爾馬林固定后石蠟包埋切片,行蘇木精-伊紅(Hematoxylin  Eosin,HE)染色觀察組織病理改變,并進行天狼星紅-苦味酸染色觀察膠原增生情況。免疫組織化學染色(Immunohistochemistry ,IHC)觀察缺氧誘導因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,Hif-1α)表達。 結(jié)果:缺氧組大鼠肝細胞壞死、增生,膠原纖維生成,Hif-1α表達顯著升高,與對照組比較具有顯著差異。 結(jié)論:肝固有動脈結(jié)扎缺氧能夠誘導大鼠肝臟纖維化形成,Hif-α在肝纖維化組織中表達升高,有可能參與了這一病理變化過程。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R575.2;R-332

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 曹繼寬;項榮;王小玲;暢國華;;肝纖維化時血清標志物的變化[J];當代醫(yī)學;2009年27期

2 李辛,黎海亮,劉海泉,張建偉,郭e，

本文編號：1350401