發(fā)布時(shí)間：2017-12-29 01:29

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌Rv3425與Rv3614c的相互作用　出處：《微生物與感染》2015年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：為探究結(jié)核分枝桿菌脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸(PPE)蛋白家族Rv3425的生物學(xué)功能,利用免疫共沉淀聯(lián)合質(zhì)譜分析,在卡介苗(BCG)中篩選與Rv3425相互作用的蛋白。首先,以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增獲得Rv3425基因,并克隆于pMV261載體。將重組載體轉(zhuǎn)化入BCG,裂解細(xì)胞,蛋白免疫印跡法證實(shí)目的蛋白可在BCG中表達(dá)。通過(guò)免疫共沉淀,用特異抗體分離出BCG中的Rv3425蛋白復(fù)合體,質(zhì)譜鑒定其成分,在美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心(NCBI)數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索各蛋白的功能,篩選與Rv3425相互作用的蛋白,并用谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)pulldown驗(yàn)證。結(jié)果顯示,免疫共沉淀聯(lián)合質(zhì)譜分析篩選到10個(gè)與Rv3425相互作用的蛋白,在細(xì)胞內(nèi)Rv3425協(xié)同作用下參與肽聚糖合成途徑、分枝菌酸合成途徑、ESX-1蛋白分泌系統(tǒng)及細(xì)菌毒力調(diào)控。GST pulldown驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)Rv3614c與Rv3425可體外結(jié)合。本研究證實(shí)Rv3425與Rv3614c存在相互作用,Rv3425可能與ESX-1蛋白分泌系統(tǒng)及結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制密切相關(guān)。
[Abstract]:......
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院遺傳工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家傳染病防治科技重大專項(xiàng)(2012ZX10003008)
【分類號(hào)】：R378.911
【正文快照】： 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是嚴(yán)重危害人類健康的一種慢性傳染病。2013年,全球大約有900萬(wàn)新增結(jié)核病病例,150萬(wàn)死于該病,其中36萬(wàn)例是人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)陽(yáng)性患者[1]。隨著HIV與結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tuberculosis)共感

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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2 祁婷婷;何順華;嚴(yán)丁e，

本文編號(hào)：1348289