本文關鍵詞：5-羥色胺在大鼠海馬CA1、CA2和CA3的表達　出處：《大連醫(yī)科大學》2010年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】： 目的：大鼠海馬屬于腦的邊緣系統(tǒng),包括CA1、CA2和CA3。在結構上無明顯分界標志,功能上可視為一個整體。5-羥色胺(5-HT),一種在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布的神經(jīng)遞質,主要參與情感、睡眠、疼痛、學習記憶等復雜生理功能的調節(jié)。為了解5-羥色胺在海馬中的分布特點,本實驗采用5-HT特異性抗體的方法,利用免疫組織化學技術,觀察海馬CA1、CA2和CA3中三個區(qū)域5-HT神經(jīng)元及神經(jīng)纖維終末的表達,為進一步研究5-HT在海馬學習、記憶的作用機制,提供形態(tài)學依據(jù)。 方法：1、實驗動物和主要試劑：成年雄性SD大鼠8只(由大連醫(yī)科大學實驗動物中心提供)、山羊超敏二步法免疫組化檢測試劑、濃縮型DAB(購自北京中杉金橋)。2、灌注固定：把大鼠經(jīng)10%水合氯醛進行腹腔麻醉。仰臥固定,用剪刀打開胸腔,將穿刺針經(jīng)左心室插入升主動脈,剪開右心耳,先用150ml生理鹽水快速沖洗后,給予4%多聚甲醛磷酸緩沖液300ml灌注,持續(xù)灌注4小時后斷頭開顱取腦,放入相同固定液中4℃過夜。在振動切片機連續(xù)冠狀切片,片厚30um,選取具有海馬的切片,置入0.01mol/L的PBS(PH值7.4)溶液中備用。3、免疫組織化學法：采用二步法進行免疫組織化學染色。4、統(tǒng)計學分析：在正置熒光顯微鏡圖像分析儀觀察拍攝,核團定位參照George Raxinos,Charles Watsonbian編著的The Rat Brain in stereotaxic coordinates(大鼠腦立體定位圖譜,第三版)。在低倍鏡下觀察海馬和5-HT陽性神經(jīng)元在海馬中CA1、CA2和CA3區(qū)的表達。在高倍鏡下觀察5-HT陽性神經(jīng)纖維終末。所得數(shù)據(jù)采用SPSS16.5軟件分析。 結果：在低倍光鏡下觀察：1、大鼠海馬內(nèi)5-HT免疫反應產(chǎn)物為棕黃色(圖1 a),可見大量的5-HT能陽性神經(jīng)元和樹突。陽性產(chǎn)物位于胞漿中,細胞核透明,未見明顯染色(圖2a,3a,4a)2、免疫反應陽性產(chǎn)物在海馬錐體層細胞中分布最多,密集呈帶。3、在20×10倍光鏡下計數(shù),CA2區(qū)免疫反應陽性神經(jīng)元數(shù)最多,其次是CA1區(qū),CA3區(qū)最少。4、CA3的細胞比其它區(qū)域略小,染色比CA1區(qū)弱。在高倍鏡下：1、在海馬CA1、CA2和CA3中呈陽性反應的神經(jīng)元胞體為圓形或卵圓形。2、海馬內(nèi)可見免疫反應陽性、呈串珠狀的5-HT能神經(jīng)纖維終末(圖2b,3b,4b)。免疫反應對照切片為陰性(4×10),未見CA1、CA2和CA3區(qū)有5.HT免疫反應陽性神經(jīng)元及神經(jīng)纖維終末表達。統(tǒng)計學結果：CA1、CA2和CA3區(qū)陽性神經(jīng)元平均數(shù)士標準差分別是5.60±1.075,5.70±1.252,3.50±1.269。經(jīng)統(tǒng)計學分析CA1、CA2與CA3區(qū)陽性神經(jīng)元數(shù)之間比較有統(tǒng)計學差異,CA1CA3, CA2CA3 (P0.01)。 結論：1、大鼠海馬內(nèi)有5-HT能神經(jīng)元和神經(jīng)纖維終末表達。2、5-HT免疫陽性產(chǎn)物在CA1、CA2與CA3區(qū)表達強度有差異,其陽性神經(jīng)元數(shù)CA1CA3, CA2CA3。
[Abstract]:Objective: the rat hippocampus belongs to the brain's marginal system, including CA1, CA2 and CA3. There is no clear demarcation mark on the structure, and the function can be regarded as a whole. 5- serotonin (5-HT), a neurotransmitter widely distributed in the central nervous system, is mainly involved in the regulation of complex physiological functions such as emotion, sleep, pain, learning and memory. In order to understand the distribution characteristics of 5- of 5-HT in the hippocampus, this experiment adopts the method of 5-HT specific antibodies, using immunohistochemistry to observe the expression of three 5-HT neurons and nerve fiber terminals CA2 and CA3 and CA1 in hippocampus, mechanism of memory for further study of 5-HT in the hippocampus of learning, and provide morphological basis.
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

【參考文獻】

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本文編號：1347517