發(fā)布時(shí)間：2017-12-27 23:29

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌dnaE2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究　出處：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 結(jié)核分枝桿菌 DnaE2 轉(zhuǎn)錄因子 NmtR

【摘要】：結(jié)核分枝桿菌(M. tuberculosis)的耐藥問題是當(dāng)前控制結(jié)核病爆發(fā)和流行的關(guān)鍵問題。已有的研究表明,結(jié)核分枝桿菌的一個(gè)C家族的DNA聚合酶DnaE2是其基因組發(fā)生高頻突變以及抗藥性產(chǎn)生所必須的。因此,研究DnaE2的表達(dá)調(diào)控對于深入理解結(jié)核耐藥性產(chǎn)生的分子基礎(chǔ)具有重要意義。本研究篩選和鑒定了一個(gè)ArsR-SmtB家族的轉(zhuǎn)錄因子NmtR (Rv3744)能夠直接參與DnaE2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控并且顯著影響分枝桿菌的耐藥突變能力,具體取得了以下幾個(gè)方面的結(jié)果： 本研究取得了以下發(fā)現(xiàn)： 1)通過單雜交驗(yàn)證以及EMSA實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了多個(gè)重要轉(zhuǎn)錄因子,包括新型阻遏蛋白NmtR、雙組份RR蛋白RegX3、σ因子SigB以及SOS系統(tǒng)的阻遏蛋白LexA與dnaE2啟動子區(qū)域的物理相互作用； 2)首次發(fā)現(xiàn)新型轉(zhuǎn)錄因子NmtR對dnaE2的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用,并在M. smegmatismc2155體內(nèi)通過Ch-IP染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn),獲得了NmtR可能的DNA調(diào)控序列； 3)通過基因敲除,構(gòu)建了nmtR缺失突變株MsmΔnmtR,敲除菌株MsmΔnmtR的dnaE2基因的表達(dá)量是野生型M. smegmatis mc2155的1.7倍； 4)針對nmtR缺失突變株MsmΔnmtR進(jìn)行了抗藥性研究。缺失突變株在受到紫外線脅迫條件下基因突變頻率比野生型M. smegmatis mc2155增加了2倍。 這些工作為闡明這個(gè)獨(dú)特的結(jié)核桿菌的易錯(cuò)DNA聚合酶MtbDnaE2的表達(dá)調(diào)控規(guī)律,其抗藥突變機(jī)制,以及Mtb持續(xù)性感染能力等提供了重要信息。
[Abstract]:The drug resistance of Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) is the key problem to control the outbreak and epidemic of tuberculosis. Previous studies have shown that the DNA polymerase DnaE2 of a C family of Mycobacterium tuberculosis is essential for high frequency mutations in the genome and resistance to drug resistance. Therefore, the study of the expression and regulation of DnaE2 is of great significance in understanding the molecular basis of drug resistance. This study screened and identified a transcription factor NmtR (Rv3744) of ArsR-SmtB family, which can directly participate in the transcriptional regulation of DnaE2 gene and significantly affect the mutagenesis ability of Mycobacterium.
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R378

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本文編號：1343660