本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌感染模型的建立及其外膜蛋白HopX對胃粘膜細(xì)胞生長的影響　出處：《江蘇大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的:建立幽門螺桿菌感染模型,并探討外界因素對幽門螺桿菌感染模型建立的影響;研究幽門螺桿菌外膜蛋白HopX對胃粘膜細(xì)胞生長的影響,為深入研究幽門螺桿菌的致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 方法: 1、常規(guī)培養(yǎng)幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC11637,采用革蘭染色、快速尿素酶試驗(yàn)和氧化酶試驗(yàn)進(jìn)行鑒定; 2、幽門螺桿菌感染模型建立:40只雄性BALB/C小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分成兩組,即Hp組和對照組。Hp組Hp菌液灌胃,0.4ml/只(約含Hp為10~9個(gè)/ml),所有動物灌胃前禁食12小時(shí)、禁水4小時(shí),隔日一次,連續(xù)5次,10天完成;灌胃結(jié)束后再飼養(yǎng)4周后處死,分離胃組織,將其沿胃大彎縱向剪開,用無菌生理鹽水洗凈胃內(nèi)殘留物,縱向一分為二,一半用于快速尿素酶試驗(yàn),另一半10%甲醛固定,石蠟包埋,5μm切片、苯胺藍(lán)染色進(jìn)行Hp定植評價(jià)。 3、外界因素對幽門螺桿菌感染模型建立的影響:40只BALB/C小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為雙重因素組、單純Hp組、單純心理組、對照組,通過Hp菌液灌胃和電擊造模,電擊結(jié)束后處死動物,行Hp感染鑒定,同時(shí)觀察胃粘膜損傷情況。40只雄性BALB/C小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分成兩組,即茶水組、純凈水組;茶水給予3%茶水,一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束;純凈水組則給予普通飲用純凈水。兩組小鼠都Hp菌液灌胃,灌胃結(jié)束后再飼養(yǎng)4周后處死,行Hp感染鑒定。 4、用含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)胃癌細(xì)胞SGC7901,加入不同濃度HopX蛋白,應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞活力、MTT、Hoechest33258熒光染色等方法分析HopX對細(xì)胞增殖的影響;收集培養(yǎng)上清,ELISA法檢測IL-8的分泌量;提取細(xì)胞總RNA,用熒光定量RT-PCR法檢測IL-8mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果: 1.成功建立了幽門螺桿菌感染模型,明確了心理應(yīng)激和茶水對幽門螺桿菌感染模型建立的影響; 2.HopX可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞SGC7901表達(dá)和分泌IL-8,該效應(yīng)呈濃度依賴性;HopX可抑制SGC7901細(xì)胞的增殖及活力,呈劑量-時(shí)間依賴關(guān)系。 結(jié)論:成功建立了幽門螺桿菌感染模型;明確了心理應(yīng)激和茶水對幽門螺桿菌感染模型的建立有一定影響;HopX對胃癌細(xì)胞生長、IL-8分泌與表達(dá)有一定的抑制作用,其抑制作用與濃度和作用時(shí)間有一定關(guān)系。
[Abstract]:Objective: to establish a Helicobacter pylori infection model and explore the influence of external factors on the establishment of Helicobacter pylori infection model, and to study the effect of Helicobacter pylori outer membrane protein HopX on the growth of gastric mucosal cells, so as to lay a foundation for further study of the pathogenesis of Helicobacter pylori.
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1341195