本文關(guān)鍵詞：IFN-λ真核表達(dá)載體的建立及其表達(dá)產(chǎn)物的生物學(xué)功能評(píng)估

  更多相關(guān)文章： IFN-λ 真核表達(dá) 抗增殖 凋亡 抗病毒

【摘要】：目的構(gòu)建IFN-λ真核表達(dá)體系,檢測(cè)IFN-λ基因在真核細(xì)胞中的表達(dá),評(píng)估真核細(xì)胞表達(dá)IFN-λ的抗增殖和抗病毒生物學(xué)作用。方法從poly I∶C刺激的Hu H-7細(xì)胞mRNA中克隆IFN-λ1/2基因全長(zhǎng),并進(jìn)行DNA基因測(cè)序;構(gòu)建pc DNA3-IFN-λ1/2質(zhì)粒,酶切鑒定,并將其轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,應(yīng)用Western印跡檢測(cè)IFN-λ1/2在COS-7細(xì)胞中的表達(dá)。COS-7細(xì)胞表達(dá)的IFN-λ1/2作用于人食管癌YES5和T.Tn細(xì)胞株,CCK-8法檢測(cè)癌細(xì)胞增殖,Western印跡檢測(cè)凋亡蛋白caspase-3的活化,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)ISG15及Mx A抗病毒基因表達(dá)。結(jié)果經(jīng)PCR、DNA測(cè)序和酶切鑒定,克隆的IFN-λ1/2基因與Gen Bank公布的序列一致,IFN-λ1/2基因序列正確構(gòu)建入pc DNA3載體中;在pc DNA3-IFN-λ1/2轉(zhuǎn)染的COS-7細(xì)胞中檢測(cè)到IFN-λ1/2蛋白表達(dá);其表達(dá)產(chǎn)物可誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞增殖抑制、活化凋亡蛋白caspase-3,并且上調(diào)抗病毒ISG15及Mx A基因。結(jié)論建立了IFN-λ真核表達(dá)體系,即通過(guò)pc DNA3-IFN-λ1/2轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞實(shí)現(xiàn)了IFN-λ表達(dá);經(jīng)此體系表達(dá)的IFN-λ具有抗增殖、誘導(dǎo)凋亡及上調(diào)抗病毒基因表達(dá)的生物學(xué)作用;此體系的建立為IFN-λ的生物學(xué)功能研究和臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院細(xì)胞治療實(shí)驗(yàn)室;河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院乳腺疾病治療中心;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院內(nèi)分泌科;河北醫(yī)科大學(xué)流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)教研室;河北醫(yī)科大學(xué)護(hù)理學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81000913) 河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目(10396101D) 河北省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(13397703D) 河北省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃重點(diǎn)基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(14967719D,15962704D) 河北省醫(yī)學(xué)科研研究重點(diǎn)課題計(jì)劃指導(dǎo)項(xiàng)目(20150626)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 2002年10月,“細(xì)胞因子與干擾素”會(huì)議在意大利都靈舉行,Kotenko在會(huì)議上首次報(bào)告發(fā)現(xiàn)了新型人干擾素lambda(IFN-λs)。2003年,相關(guān)論文在Nature Immunology雜志發(fā)表。IFN-λs是一個(gè)全新的Ⅲ型干擾素家族,家族成員包括干擾素λ1、λ2和λ3,同時(shí)被命名為IL-29、IL-28A和IL-28B;

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫麗霞;任金榮;單保恩;李元振;何蘭欣;艾軍;;大黃制劑對(duì)小鼠的急性毒性和自然免疫調(diào)節(jié)作用[J];癌變.畸變.突變;2006年01期

2 翟澤玲;商亞珍;;燈盞花素治療缺血性腦病的機(jī)制[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年01期

3 王海洲;丁永貴;賈曉暉;;五蓮黑豬IFN-γ基因克隆、序列分析及同源建模研究[J];山東畜牧獸醫(yī);2011年12期

4 馬春花,周鵬,王華;幾丁質(zhì)酶、葡聚糖酶與蘿卜抗真菌蛋白R(shí)_S-AFP2基因三價(jià)表達(dá)載體的構(gòu)建及農(nóng)桿菌工程菌株的重組[J];西北植物學(xué)報(bào);2004年04期

5 師亮;張宇新;張作鳳;陳浩;;COX-2對(duì)帕金森病小鼠黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元的毒性作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年18期

6 趙俊霞;鄭力芬;趙娟;申園;王彥玲;閆蘊(yùn)力;;滑菇多糖對(duì)K562白血病細(xì)胞增殖的抑制及Caspase-3基因表達(dá)的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年15期

7 高芬芳;趙中艷;郭劍平;;洋蔥假單胞菌抗汞質(zhì)粒的研究[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2005年06期

8 陳燕梅;黃劍東;劉豐冉;孫瑞卿;吳基培;;十六羧酸基酞菁鋅光敏劑與白蛋白相互作用的光譜研究及復(fù)合物的制備[J];光譜學(xué)與光譜分析;2006年08期

9 肖榮平;張娜;黃劍東;張漢輝;;白蛋白對(duì)單取代酞菁鋅光譜性質(zhì)和存在狀態(tài)的影響[J];光譜學(xué)與光譜分析;2011年04期

10 肖榮平;黃劍東;張漢輝;;間二羧基苯氧基取代酞菁鋅與白蛋白共價(jià)結(jié)合物的合成與光譜性質(zhì)[J];光譜學(xué)與光譜分析;2011年05期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 肖茜;銀杏內(nèi)酯B對(duì)胎鼠海馬神經(jīng)元的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

2 劉朝暉;次聲對(duì)大鼠海馬部分作用效應(yīng)和相關(guān)機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 姜廣建;hrg-1基因表達(dá)與功能研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2004年

4 郝洪嶺;抗CD44粘附分子單克隆抗體對(duì)HL-60白血病細(xì)胞增殖及分化的影響及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2004年

5 趙彩彥;實(shí)驗(yàn)性脂肪性肝病發(fā)病機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2004年

6 況玲;豬胚胎干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定和分化的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

7 薛國(guó)柱;人源肝癌單鏈抗體的篩選與鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 林軍;銀杏葉提取物（EGb）對(duì)糖尿病大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙保護(hù)作用的機(jī)制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

9 張碩;乾坤寧抗腫瘤的藥效學(xué)和機(jī)理研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年

10 劉雁云;2型糖尿病、甲亢病陰虛證與NOS CTLA-4相關(guān)性的研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王敏;內(nèi)源性硫化氫對(duì)柯薩奇病毒B_3性心肌炎小鼠心肌內(nèi)病毒復(fù)制的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 劉永峰;鬼臼毒素衍生物GMZ-1體外抗腫瘤作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

3 李晗;KLF5和MMP-9表達(dá)與膝關(guān)節(jié)軟骨神經(jīng)血管侵入關(guān)系的臨床研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

4 孟景山;孕酮通過(guò)NF-κB對(duì)腦創(chuàng)傷后大鼠海馬神經(jīng)元COX-2和Caspase-3表達(dá)起調(diào)控作用[D];華北煤炭醫(yī)學(xué)院;2010年

5 賈欣;普胃丸抗胃潰瘍復(fù)發(fā)作用及其抗炎機(jī)制研究[D];華北煤炭醫(yī)學(xué)院;2010年

6 董寶軍;吡啶羧酸鉻對(duì)豬生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)及肌細(xì)胞胰島素受體基因表達(dá)的影響[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2002年

7 張茜;SYBR Green I 同源基因定量PCR快速診斷21-三體綜合征[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2003年

8 李玉;肉用綿羊群體遺傳結(jié)構(gòu)和變異的微衛(wèi)星DNA多態(tài)性分析[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

9 李英秀;羥基喜樹堿聯(lián)用5-氟脲嘧啶、γ-干擾素、對(duì)胃癌MGC-803細(xì)胞株的抗增殖誘導(dǎo)凋亡及凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];延邊大學(xué);2003年

10 陳世旺;慢性淺表性胃炎脾胃濕熱證黃膩舌苔脫落細(xì)胞周期及清化飲作用的研究[D];福建中醫(yī)學(xué)院;2003年

，

本文編號(hào)：1290608