本文關(guān)鍵詞：烏司他丁對(duì)心肺復(fù)蘇后大鼠急性腎損傷保護(hù)的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的采用窒息法建立大鼠心肺復(fù)蘇模型，以不同劑量的烏司他丁注射于CPR后大鼠股靜脈內(nèi)，研究各組大鼠不同時(shí)相血清腎功能指標(biāo)和炎癥因子的變化，觀察腎臟組織病理和組織中炎癥因子表達(dá)的改變,評(píng)價(jià)其對(duì)CPR后急性腎損傷的保護(hù)作用，并探討其作用機(jī)制。 方法健康SD大鼠80只按照隨機(jī)對(duì)照原則分為假手術(shù)組(C組)、生理鹽水組(NS組)、烏司他丁組[根據(jù)劑量分為小劑量組（5萬u/kg）(U1組)、中劑量組（10萬u/kg）(U2組)、大劑量組（20萬u/kg）(U3組)]，每組16只。假手術(shù)組(C組)：不建立心肺復(fù)蘇模型，只進(jìn)行氣管插管及股動(dòng)靜脈穿刺并留置穿刺管；生理鹽水組(NS組)：采用窒息法建立大鼠心肺復(fù)蘇模型，行氣管插管及股動(dòng)靜脈穿刺并留置穿刺管，呼氣末夾閉氣管插管直至心臟驟停，7min后開始CPR，大鼠自主循環(huán)恢復(fù)（ROSC）即刻給予2ml/kg生理鹽水；烏司他丁組：采用窒息法建立心肺復(fù)蘇模型，行氣管插管及股動(dòng)靜脈穿刺并留置穿刺管，呼氣末夾閉氣管插管至心臟驟停，7min后開始CPR，ROSC即刻按照烏司他丁劑量分組分別給予U1組、U2組、U3組相應(yīng)劑量烏司他丁。分別采集ROSC即刻（T0）、ROSC后6h（T6）、ROSC后24h（T_(24)）大鼠靜脈血標(biāo)本，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中BUN和Cr水平；采用ELISA法檢測(cè)上述各時(shí)相點(diǎn)血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin，，NGAL)水平；分別于T6、T_(24)處死大鼠，取腎組織固定包埋并切片，行HE染色，光鏡觀察腎臟病理變化，并采用Mc Whinnie半定量法評(píng)估腎小管損傷程度；采用ELISA法檢測(cè)上述各時(shí)相點(diǎn)血清TNF-α水平，并采用免疫組化檢測(cè)T6、T_(24)腎臟組織中TNF-α的表達(dá)。 結(jié)果1、各組腎臟病理變化：C組大鼠腎臟HE染色光學(xué)顯微鏡觀察：T6時(shí)腎臟組織結(jié)構(gòu)清楚，腎小管上皮細(xì)胞未見明顯變性及壞死；T_(24)與T6比較未見明顯變化。NS組大鼠腎臟組織HE染色光學(xué)顯微鏡觀察：T6時(shí)腎臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)紊亂，腎小管上皮細(xì)胞可見腫脹，上皮細(xì)胞扁平，刷狀緣出現(xiàn)脫落； T_(24)時(shí)可見腎臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯紊亂，腎間質(zhì)水腫，腎小管上皮細(xì)胞可見腫脹，細(xì)胞核消失，上皮細(xì)胞扁平，刷狀緣出現(xiàn)脫落，并可見基底膜裸露。U1組、U2組及U3組大鼠腎臟組織HE染色光學(xué)顯微鏡觀察：T6時(shí)腎臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)紊亂，腎小管上皮細(xì)胞可見腫脹，上皮細(xì)胞扁平，刷狀緣出現(xiàn)脫落；T_(24)時(shí)腎臟組織損傷較NS組損傷明顯減輕，僅可見少量腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性，刷狀緣脫落,而腎小管形狀結(jié)構(gòu)保持良好。與C組比較，NS組CPR后6h和24h腎小管損傷評(píng)分明顯升高，而U1、U2、U3組評(píng)分比NS組明顯降低，且隨烏司他丁劑量增大腎小管損傷評(píng)分逐漸降低。2、各組腎功能結(jié)果：C組中各時(shí)相點(diǎn)血清BUN和Cr比較無顯著性差異（P＞0.05）；與C組相比，NS組、U1組、U2組、U3組復(fù)蘇后6h、24h顯著升高（P＜0.05）；與T0相比，NS組T6、T_(24)顯著升高（P＜0.05）；與NS組相比，U1組、U2組、U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）；與U1組相比，U2組、U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）；與U2組相比，U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）。3、各組血清NGAL的比較：各組T0比較無顯著性差異（P＞0.05），NS組中T6、T_(24)比T0顯著升高（P＜0.05）；NS組、U1組、U2組、U3組T6血清NGAL比C組明顯升高（P＜0.05），U1組、U2組、U3組T6血清NGAL比NS組顯著降低（P＜0.05），且U2組比U1組、U3組比U2組顯著降低（P＜0.05）；NS組中T_(24)比T6明顯降低（P＜0.05），但仍高于T0（P＜0.05）；U1組、U2組、U3組T_(24)血清NGAL比NS組顯著降低(P＜0.05)，而U1組、U2組、U3組之間T_(24)血清NGAL比較無顯著性差異（P＞0.05）。4、各組大鼠血清TNF-α的比較：C組中各時(shí)相點(diǎn)血清TNF-α比較無顯著性差異（P＞0.05）；與C組相比，NS組、U1組、U2組、U3組T6、T_(24)顯著升高（P＜0.05）；與T0相比，NS組T6、T_(24)顯著升高（P＜0.05）；與NS組相比，U1組、U2組、U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）；與U1組相比，U2組、U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）；與U2組相比，U3組T6、T_(24)顯著降低（P＜0.05）。5、在正常大鼠腎組織中，TNF-α少量表達(dá)或幾乎不表達(dá)。NS組）、U1組、U2組及U3組T6比C組IOD值明顯升高（P＜0.05）；與NS組比較，U1組、U2組及U3組T6IOD值明顯降低（P＜0.05），且U2組比U1組IOD值明顯降低（P＜0.05），U3組比U2組IOD值明顯降低（P＜0.05）；NS組、U1組、U2組及U3組T_(24)比T6各組IOD值明顯降低（P＜0.05），NS組、U1組、U2組及U3組T_(24)比C組IOD值明顯升高（P＜0.05），與NS組比較，U1組、U2組及U3組T_(24)IOD值明顯降低（P＜0.05），且U2組比U1組IOD值明顯降低（P＜0.05），U3組比U2組IOD值明顯降低（P＜0.05）。 結(jié)論CPR后大鼠早期出現(xiàn)急性腎損傷；血清NGAL可作為CPR后早期大鼠急性腎損傷的標(biāo)志物；炎癥反應(yīng)是CPR后早期腎臟損傷發(fā)生發(fā)展的機(jī)制之一；烏司他丁通過抑制炎癥反應(yīng)對(duì)CPR后大鼠急性腎損傷有一定的保護(hù)作用，且保護(hù)作用與烏司他丁使用劑量相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R614;R-332

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本文編號(hào)：1276356