本文關(guān)鍵詞：脂肪干細胞來源的生長因子對皮膚成纖維細胞遷移和增殖的影響

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【摘要】：背景：脂肪干細胞條件培養(yǎng)液（adipose stem cell-conditioned medium，ASC-CM）中富含各類脂肪干細胞（adipose stem cells，ASCs）來源的細胞因子。目前研究證實，ASC-CM可以促進皮膚創(chuàng)傷修復(fù)，皮膚成纖維細胞是一類幾乎參與整個創(chuàng)傷修復(fù)過程的重要效應(yīng)細胞，其遷移與增殖是創(chuàng)傷修復(fù)首要的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 目的：研究ASC-CM中表皮生長因子（EGF），血小板源性生長因子（PDGF），血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），成纖維細胞生長因子（bFGF）在創(chuàng)傷愈合過程中對皮膚成纖維細胞遷移和增殖的作用機制。 方法：（1）采用蛋白芯片技術(shù)，檢測ASC-CM中包括EGF、PDGF、VEGF以及bFGF在內(nèi)的507種細胞因子的含量（信號值，SV）；（2）采用劃痕實驗和transwell小室遷移實驗，在ASC-CM中分別加入0、1、10、20、50、100ng/ml濃度的EGF、PDGF、VEGF和bFGF，上述各因子的中和抗體，，及上述單一因子誘導(dǎo)皮膚成纖維細胞遷移24h后，檢測其遷移率；（3）采用CCK-8實驗，誘導(dǎo)皮膚成纖維細胞增殖3d后，檢測其增殖率，分組同上。 結(jié)果：（1）ASC-CM中EGF（SV=458.0）、PDGF（SV=363.5）、VEGF（SV=360.5）、以及bFGF（SV=389.5）信號值均大于300；（2）相較于單一因子，ASC-CM對成纖維細胞的遷移有明顯的促進作用。其中，PDGF、VEGF和bFGF對細胞遷移的促進作用顯著，且隨著濃度的上升而增加，PDGF在50ng/ml時、VEGF在20ng/ml時、bFGF在20ng/ml時達到各自的平臺期；在ASC-CM中分別加入PDGF、VEGF和bFGF的中和抗體后，促進作用可被明顯抑制；（3）相較于單一因子，ASC-CM對成纖維細胞的增殖有明顯的促進作用。其中，EGF和bFGF對細胞增殖的促進作用顯著，且隨著濃度的上升而增加，并分別在50ng/ml和20ng/ml時達到平臺期；在ASC-CM中分別加入EGF和bFGF的中和抗體后，促進作用可被明顯抑制。 結(jié)論：相較于單一因子，ASC-CM可明顯促進皮膚成纖維細胞的遷移和增殖，其中所含有的PDGF、VEGF和bFGF對細胞遷移促進作用非常明顯，且具有濃度依賴性；EGF和bFGF對細胞增殖促進作用非常明顯，且具有濃度依賴性。因此ASC-CM對皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的促進作用優(yōu)于單一因子；同時，在應(yīng)用ASC-CM時應(yīng)注意選擇適宜的細胞因子濃度，可更有效地促進成纖維細胞的遷移和增殖。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2

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本文編號：1275478