本文關鍵詞：不同亞類小鼠IgG對SpA和SpG單結構域構成的隨機組合噬菌體文庫的體外進化研究

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【摘要】：目的判斷不同亞類小鼠IgG Fc段構像及與SpA或SpG的結合特點,采用不同亞類小鼠IgG對SpA和SpG單結構域構成的隨機組合噬菌體展示文庫進行親和篩選。方法不同亞類小鼠IgG對噬菌體文庫進行親和篩選,獲得具有結合優(yōu)勢的單結構域排列組合,噬菌體ELISA法來比較其與不同亞類小鼠IgG的結合特性,優(yōu)勢組合分子經原核表達蛋白,HRP標記后,ELISA法進一步來比較其與小鼠不同亞類IgG的結合特性。結果小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3分別經過5、4、5和5輪親和篩選后,其文庫的展示片段大小均為2個domain,表明進化完全。測序分析顯示:小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3篩選得到的具有結合優(yōu)勢組合分子分別是D-D、D-D、A-C和D-C。噬菌體ELISA驗證結合優(yōu)勢組合分子對小鼠不同亞類IgG的結合能力;蛋白經HRP標記后的ELISA結果和篩選不完全一致,但其結合強弱具有一致性,均為:IgG3IgG2aIgG2bIgG1。結論得到3種不存在于天然SpA、SpG分子中,分別與不同亞類小鼠IgG具有較強結合作用的新型組合分子D-D、A-C和D-C,為進一步研究IgG Fc段構像及與SpA或SpG的結合特點提供了新的參考分子。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學病理生理學教研室;第二軍醫(yī)大學病原生物學教研室;安慶醫(yī)藥高等�？茖W校;
【基金】：安徽省教育廳自然基金項目(編號:KJ2010A117) 國家自然科學基金(編號:30872405、30872246、30972632、30972799)
【分類號】：R392.7
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal proteinA,SpA)[1]和鏈球菌蛋白G(Streptococcal protein G,SpG)[2]是研究最多的細菌免疫球蛋白結合蛋白[3],其中SpA的分子量大約57 ku,含有5個具有Ig結合功能且重復串聯的結構域,為E、D、A、B、C[4]。SpG分子量為65 ku,包含3個具有Ig結合

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1 李六金,姜煥宏,屈紅麗,李成,吳鐘靈,陳惠茹,李宏;抗豬瘟病毒IgG的研制[J];甘肅畜牧獸醫(yī);2003年02期

2 沈誠誠;粘膜屏障部位抗體介導免疫力的多樣性[J];國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊;2000年02期

3 王琰,王欲曉,朱迎春,劉曉琳,張海榮,劉群英,化冰,陳曉穗,陳宇萍;將抗體庫所獲抗-HBs Fab轉換為全長人IgG[J];中華微生物學和免疫學雜志;2000年01期

4 韓雙艷,郭勇,楊慧蘭,王捷,楊太成,冼江;新型DNA疫苗的構建及其對小鼠保護作用的研究[J];激光生物學報;2004年02期

5 丁毅,劉曉穎;豬血制備丙種球蛋白的研究[J];安徽大學學報(自然科學版);2000年01期

6 韓雙艷,王捷,楊慧蘭,楊太成,冼江;單純皰疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的免疫研究[J];廣東醫(yī)學;2004年05期

7 韓劍秋,吳萍,WarrenN．Schmidt,Pao-minLoh,GaryNeil,DouglasR．LaBrecque,JackT．Stapleton;丙型肝炎病毒與人IgG Fc片段的特異性結合[J];中國病毒學;1997年03期

8 張明杰,汪美先,姜紹諄,馬文煜,于碧云;抗猴IgM和IgG免疫血清的制備研究[J];免疫學雜志;1989年02期

9 黃文杰,劉志紅,周錫鵬,卜鳳榮,黃祥端,馬立人;人巨細胞病毒ISCOMs的研制[J];中國生物制品學雜志;1998年01期

10 敖長金,侯先志,于志紅,趙志恭,于向春;豬乳中IgG和有關生長因子的動態(tài)變化[J];內蒙古農業(yè)大學學報(自然科學版);1999年01期

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1 冀德君;張林;胡勇;陳勇;;利用山羊生產抗人IgG等多抗血清[A];畜牧業(yè)環(huán)境、生態(tài)、安全生產與管理——2010年家畜環(huán)境與生態(tài)學術研討會論文集[C];2010年

2 武靜;陳巍;屈鋒;;IgG與DNA文庫相互作用的毛細管電泳方法研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜學術交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

3 錢寶珍;胡海濤;;先天性感染日本血吸蟲家兔攻擊感染后血清抗體動態(tài)的研究[A];2005年浙江省醫(yī)學病毒學、醫(yī)學微生物與免疫學學術會議論文匯編[C];2005年

4 王靜蓉;姜志宏;;四個亞型IgG的糖組學及糖肽組學的研究[A];中國化學會第28屆學術年會第3分會場摘要集[C];2012年

5 曹祥榮;潘少坤;李東霞;沈瑋;;原核表達系統(tǒng)pET28a(+)中抗CD20微抗體的表達[A];江蘇省遺傳學會第八屆會員代表大會暨學術研討會論文集[C];2010年

6 王瑩;謝芝勛;劉加波;龐耀珊;鄧顯文;謝志勤;謝麗基;;禽呼腸孤病毒直接免疫熒光檢測方法的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十五次學術研討會論文集[C];2010年

7 馮林;鄭峻松;刁慶春;;MRL/lps小鼠中CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞對B細胞影響的研究[A];中華中醫(yī)藥學會皮膚科分會第七次學術年會、2010年重慶四川中西醫(yī)結合皮膚性病學術年會、全國中西醫(yī)結合診療皮膚性病新進展新技術學習班論文匯編[C];2010年

8 牛麗紅;劉丹;戴樹璽;杜祖亮;;量子點標記的Anti-rabbit IgG的固定與識別[A];2011中國材料研討會論文摘要集[C];2011年

9 周波;王海燕;劉珍寶;樓莎;朱敦皖;張海玲;宋麗萍;冷希崗;;生物載體與生物大分子對分子信標探針應用的影響[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第29屆學術年會暨首屆生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2009年

10 陳巍;趙新穎;屈鋒;;毛細管電泳法篩選蛋白質的核酸適配體的初步研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜學術交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

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1 王瑞琳;SARS冠狀病毒分離鑒定、疫苗構建及免疫血清制備研究[D];吉林大學;2006年

2 李禹濤;人參莖葉皂甙提高口蹄疫和新城疫油佐劑疫苗免疫效果的研究[D];浙江大學;2012年

3 呂正檢;基于計算機模擬、自組裝和力譜技術的蛋白質分子間相互作用研究[D];重慶大學;2010年

4 崔金輝;新型納米基因載體和蛋白質檢測探針的構建、表征與應用[D];中國農業(yè)科學院;2013年

5 云雯;電致化學發(fā)光生物傳感新技術的研究[D];華東師范大學;2011年

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1 毛未賢;IgG結合結構域重組蛋白A表達、純化及鑒定[D];吉林大學;2010年

2 劉玉松;豬IgGⅡB類Fc受體剪接異構體克隆與活性鑒定[D];河南農業(yè)大學;2010年

3 吳方波;HCoV-NL63和HCoV-229E血清IgG抗體ELISA檢測法的建立及初步應用[D];福建醫(yī)科大學;2012年

4 孫悅;用斜入射光反射差法無標記實時以及高通量探測生物芯片[D];河北大學;2013年

5 胡燕賓;鴨肝炎病毒（DHV-1）的純化及結構蛋白分析[D];西南大學;2007年

6 張霞;時間分辨熒光免疫分析技術檢測免疫球蛋白[D];華中科技大學;2012年

7 吳瓊;HCMV先天性潛伏感染Balb/c小鼠免疫功能檢測及pp65截短抗原在腎移植標本檢測中的應用研究[D];安徽醫(yī)科大學;2010年

8 楊婧婧;錦燈籠莖堿提水溶性多糖的結構及免疫增強作用研究[D];東北師范大學;2012年

9 李玲玲;鹽析萃取偶聯柱層析分離純化血漿蛋白[D];大連理工大學;2013年

10 李曉俊;C1INH（14-32）-HSA的表達純化及多克隆抗體的制備[D];湖北大學;2012年

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