本文關(guān)鍵詞：銀花泌炎靈片對大腸埃希菌的抑菌作用及抑菌機理的初步研究

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【摘要】：銀花泌炎靈片是由金銀花、半枝蓮、扁蓄等組成的純中藥制劑，具有清熱解毒，利濕通淋的功效。臨床常用于治療急性腎盂腎炎，急性膀胱炎，下焦?jié)駸嶙C等泌尿系統(tǒng)感染，是目前臨床治療難治性泌尿系統(tǒng)感染的常用藥。目前,尚無銀花泌炎靈片抑菌機制方面的研究。因此，本文在研究銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對泌尿系統(tǒng)感染主要致病菌大腸埃希菌抑菌活性的基礎(chǔ)上，初步探討其抑菌的機制，旨在為更好的指導(dǎo)臨床用藥，制定合理的臨床用藥方案，提供理論依據(jù)和實驗數(shù)據(jù)驗證。 本研究采用瓊脂稀釋法和試管法測定銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對大腸埃希菌的抑菌活性，其MIC50-90為50～100mg/mL，MBC50-90為100～250mg/mL。通過繪制時間-殺菌曲線（KCs)、電鏡觀察藥物作用后菌體超微結(jié)構(gòu)變化、SDS-PAGE電泳等實驗初步探討其抑菌機理。KCs研究發(fā)現(xiàn)銀花泌炎靈片95%乙醇提取物延遲了大腸埃希菌的分裂時間，使大腸埃希菌生長周期中的對數(shù)生長期延長，同時縮短了平臺期，加速其進入衰退期，破壞了細菌正常的生長周期，，從而抑制了細菌的生長繁殖；掃描電子顯微鏡下可見經(jīng)銀花泌炎靈片95%乙醇提取物作用后大腸埃希菌菌體表面出現(xiàn)塌陷，兩端可見凹陷和刺狀突起，有的細菌嚴重變形；負染透射電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)藥物作用后菌體折光性明顯變差，菌體變形出現(xiàn)褶皺，且部分細胞壁出現(xiàn)凹陷；超薄切片透射電子顯微鏡下觀察到藥物作用后，菌體固縮膨大，細胞壁模糊不清甚至缺失，細胞質(zhì)固縮解體,形成小空泡。電鏡結(jié)果顯示其抑菌機制可能是藥物干擾或破壞大腸埃希菌細胞壁合成或破壞菌體內(nèi)大分子量蛋白，以致菌體超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)改變，從而達到抑制或殺滅菌體的目的；SDS-PAGE電泳顯示菌體蛋白電泳譜帶，對照組和加藥組兩者呈現(xiàn)顯著差別，藥物作用后，菌體蛋白條帶有5條變淺，分子量170KD和60KD的蛋白質(zhì)譜帶變淺很明顯，130KD、100KD和70KD的蛋白質(zhì)譜帶有變化。這種蛋白條帶明顯改變的現(xiàn)象，提示了銀花泌炎靈片95%乙醇提取物可能影響了菌體蛋白的正常表達或影響了其功能，抑制了細菌某些關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)或功能蛋白的合成。 綜上，銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對大腸埃希菌具有一定的抑菌活性，其初步抑菌機理可能與其延長細菌的分裂周期，抑制細菌的生長繁殖，同時藥物可能干擾或破壞大腸埃希菌細胞壁合成或破壞菌體內(nèi)大分子量蛋白，以致菌體超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)改變和蛋白質(zhì)減少。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R378.21;R285

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本文編號：1258098