本文關(guān)鍵詞：銀花泌炎靈片對(duì)大腸埃希菌的抑菌作用及抑菌機(jī)理的初步研究

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【摘要】：銀花泌炎靈片是由金銀花、半枝蓮、扁蓄等組成的純中藥制劑，具有清熱解毒，利濕通淋的功效。臨床常用于治療急性腎盂腎炎，急性膀胱炎，下焦?jié)駸嶙C等泌尿系統(tǒng)感染，是目前臨床治療難治性泌尿系統(tǒng)感染的常用藥。目前,尚無(wú)銀花泌炎靈片抑菌機(jī)制方面的研究。因此，本文在研究銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對(duì)泌尿系統(tǒng)感染主要致病菌大腸埃希菌抑菌活性的基礎(chǔ)上，初步探討其抑菌的機(jī)制，旨在為更好的指導(dǎo)臨床用藥，制定合理的臨床用藥方案，提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證。 本研究采用瓊脂稀釋法和試管法測(cè)定銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對(duì)大腸埃希菌的抑菌活性，其MIC50-90為50～100mg/mL，MBC50-90為100～250mg/mL。通過(guò)繪制時(shí)間-殺菌曲線（KCs)、電鏡觀察藥物作用后菌體超微結(jié)構(gòu)變化、SDS-PAGE電泳等實(shí)驗(yàn)初步探討其抑菌機(jī)理。KCs研究發(fā)現(xiàn)銀花泌炎靈片95%乙醇提取物延遲了大腸埃希菌的分裂時(shí)間，使大腸埃希菌生長(zhǎng)周期中的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期延長(zhǎng)，同時(shí)縮短了平臺(tái)期，加速其進(jìn)入衰退期，破壞了細(xì)菌正常的生長(zhǎng)周期，，從而抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖；掃描電子顯微鏡下可見經(jīng)銀花泌炎靈片95%乙醇提取物作用后大腸埃希菌菌體表面出現(xiàn)塌陷，兩端可見凹陷和刺狀突起，有的細(xì)菌嚴(yán)重變形；負(fù)染透射電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)藥物作用后菌體折光性明顯變差，菌體變形出現(xiàn)褶皺，且部分細(xì)胞壁出現(xiàn)凹陷；超薄切片透射電子顯微鏡下觀察到藥物作用后，菌體固縮膨大，細(xì)胞壁模糊不清甚至缺失，細(xì)胞質(zhì)固縮解體,形成小空泡。電鏡結(jié)果顯示其抑菌機(jī)制可能是藥物干擾或破壞大腸埃希菌細(xì)胞壁合成或破壞菌體內(nèi)大分子量蛋白，以致菌體超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)改變，從而達(dá)到抑制或殺滅菌體的目的；SDS-PAGE電泳顯示菌體蛋白電泳譜帶，對(duì)照組和加藥組兩者呈現(xiàn)顯著差別，藥物作用后，菌體蛋白條帶有5條變淺，分子量170KD和60KD的蛋白質(zhì)譜帶變淺很明顯，130KD、100KD和70KD的蛋白質(zhì)譜帶有變化。這種蛋白條帶明顯改變的現(xiàn)象，提示了銀花泌炎靈片95%乙醇提取物可能影響了菌體蛋白的正常表達(dá)或影響了其功能，抑制了細(xì)菌某些關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)或功能蛋白的合成。 綜上，銀花泌炎靈片95%乙醇提取物對(duì)大腸埃希菌具有一定的抑菌活性，其初步抑菌機(jī)理可能與其延長(zhǎng)細(xì)菌的分裂周期，抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，同時(shí)藥物可能干擾或破壞大腸埃希菌細(xì)胞壁合成或破壞菌體內(nèi)大分子量蛋白，以致菌體超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)改變和蛋白質(zhì)減少。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R378.21;R285

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本文編號(hào)：1258098