本文關(guān)鍵詞：人妊娠特異性β1糖蛋白的原核表達(dá)及其抗體制備

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【摘要】：妊娠特異性β1糖蛋白（Pregnancy Specific β1Glycoprotein, PSG1）是一種胎盤多肽，自1971年德國科學(xué)家Bohn從人胎盤中分離提純以來，各國學(xué)者對其進(jìn)行了廣泛的研究。發(fā)現(xiàn)PSG1與早孕并發(fā)癥、宮內(nèi)胎兒生長狀況及婦科腫瘤疾病關(guān)系密切，對臨床上相關(guān)疾病的診斷具有指示作用。因此，近年來對PSG1的研究受到廣泛關(guān)注。本研究采用基因工程重組技術(shù)制備得到PSG1蛋白，并通過免疫新西蘭大白兔和BALB/c小鼠分別得到抗PSG1的多克隆和單克隆抗體，為PSG1蛋白在孕婦產(chǎn)前胎盤功能檢測試劑盒的研制及臨床相關(guān)疾病的治療研究提供理論依據(jù)。 1.基因表達(dá)：根據(jù)已報(bào)道的人PSG1基因序列，采用RT-PCR的方法從人胎盤組織中獲得PSG1基因。將所得的PCR產(chǎn)物插入pGEM-T質(zhì)粒載體中，經(jīng)酶切及測序鑒定正確后，構(gòu)建pCzn1-PSG1表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入E. coli ArcticExpressTM(DE3)中進(jìn)行高效表達(dá)，并采用親和層析等方法，提取、純化得到分子量約為45kDa的PSG1蛋白。 2.多克隆抗體的制備：以PSG1為免疫原對新西蘭大白兔進(jìn)行免疫，獲得了抗PSG1的多克隆抗體，采用抗原特異性親和層析的方法對抗體進(jìn)行純化，純度大于90%，用間接ELISA方法測得其純化后抗血清效價不低于1:1.28×105。 3.單克隆抗體的制備：以PSG1為免疫原對BALB/c小鼠進(jìn)行免疫，采用雜交瘤技術(shù)獲得了抗PSG1的單克隆抗體，采用抗原特異性親和層析的方法對抗體進(jìn)行純化，純度在95%以上，用間接ELISA方法測得純化后單抗腹水效價不低于1:2.43×105。 本研究成功獲得具有良好特異性和免疫原性的PSG1蛋白，并制備了高效價、高特異性的多克隆抗體和單克隆抗體，，為進(jìn)一步研制用于臨床的PSG1免疫學(xué)檢測試劑盒奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R392

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 祁文瑾;李紅賓;劉靜媛;黃云麗;李白鸞;;抗生素使用與復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病相關(guān)性研究[J];皮膚病與性病;2011年01期

2 蔣麗;;伊曲康唑聯(lián)合硝酸咪康唑栓治療復(fù)發(fā)性念珠菌外陰陰道炎療效觀察[J];皮膚病與性病;2011年05期

3 廖碧珍;杜春燕;周勤;姚珍薇;;產(chǎn)前盆底肌功能鍛煉對陰道分娩及盆底肌張力的影響[J];臨床合理用藥雜志;2008年02期

4 劉學(xué)琴;;卡孕栓和米索前列醇配伍縮宮素預(yù)防產(chǎn)后出血的效果觀察[J];臨床合理用藥雜志;2008年02期

5 張玉梅;楊國標(biāo);;后穹窿穿刺注射藥物治療盆腔炎療效觀察[J];臨床合理用藥雜志;2008年02期

6 陳堂珍;萬群;;惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤化療患者焦慮狀況調(diào)查及原因分析[J];臨床合理用藥雜志;2009年01期

7 隆益會;張琴;李曉霞;;米非司酮聯(lián)合甲氨蝶呤治療異位妊娠的臨床觀察[J];臨床合理用藥雜志;2009年04期

8 韋金杏;;丙泊酚用于無痛人流1316例的臨床觀察[J];臨床合理用藥雜志;2009年04期

9 田俊;;改良造口引流術(shù)和傳統(tǒng)術(shù)式治療前庭大腺膿腫(囊腫)臨床療效觀察[J];臨床合理用藥雜志;2009年05期

10 李虹;;重度妊娠高血壓綜合征的特殊護(hù)理[J];臨床合理用藥雜志;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳曉燕;;淺析多囊卵巢綜合征中醫(yī)病因病機(jī)[A];江西省中醫(yī)藥學(xué)會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

2 莫姿麗;黃諾潔;;妊娠期合理用藥探討[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

3 ;妊娠期相關(guān)性宮頸癌誤診為先兆流產(chǎn)[A];中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第十一屆全國學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 蔣雪清;;宮頸液基細(xì)胞學(xué)在宮頸病變篩查中的應(yīng)用[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會第22屆療養(yǎng)康復(fù)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

5 洪敏;;穩(wěn)心顆粒、復(fù)方丹參滴丸配合艾灸治療更年期冠心病療效觀察[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會第22屆療養(yǎng)康復(fù)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

6 梁文娜;李燦東;高碧珍;張凌媛;沈建英;廖凌虹;李紅;;圍絕經(jīng)期綜合征舌象與舌苔脫落細(xì)胞凋亡調(diào)控基因的研究[A];全國第十二次中醫(yī)診斷學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

7 賀豐杰;白俊;屈小會;;崩漏疑難問題的梳理與對策[A];第十一次全國中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)大會論文集[C];2011年

8 王祖龍;李暉;孫紅;;褚玉霞教授治療胎漏用藥經(jīng)驗(yàn)分析[A];第十一次全國中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)大會論文集[C];2011年

9 卜德艷;張良英;;張良英教授辨治肺子宮內(nèi)膜異位癥心得[A];第十一次全國中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)大會論文集[C];2011年

10 朱希慧;杜惠蘭;馬惠榮;;多中心健康女性月經(jīng)經(jīng)量的臨床調(diào)查研究[A];第十一次全國中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)大會論文集[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦明春;壽胎丸加味方治療腎虛型先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)的臨床研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

2 李坤寅;橘荔散結(jié)丸有效部位對子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡及相關(guān)因子表達(dá)的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

3 時思毛;補(bǔ)腎寧對腎陽虛排卵障礙模型大鼠神經(jīng)遞質(zhì)及生殖機(jī)能調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 曾晶;益氣化瘀方對藥物流產(chǎn)及產(chǎn)后炎癥模型大鼠子宮復(fù)舊不全干預(yù)作用實(shí)驗(yàn)研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 姜迎;情志因素對去卵巢大鼠腦神經(jīng)遞質(zhì)、內(nèi)分泌的影響及中藥的干預(yù)作用[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

6 袁爍;化瘀消ve殺胚法對輸卵管妊娠影響的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 侯麗艷;我國三省不孕癥的流行病學(xué)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 羅陽;女性生殖道感染知信行量表的初步研制[D];中南大學(xué);2011年

9 熊慧娟;CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在妊娠及分娩發(fā)動中的作用及機(jī)制探討[D];中南大學(xué);2011年

10 黃昕;第一胎剖宮產(chǎn)與第二胎新生兒出生結(jié)局關(guān)系的流行病學(xué)研究[D];中南大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 江源;術(shù)中應(yīng)用5-Fu緩釋劑治療晚期卵巢癌的近期療效觀察[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 殷茵;早發(fā)型子癇前期解痙抗凝治療的臨床研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

3 歐蕾;卵巢及子宮內(nèi)膜血流參數(shù)在輔助生殖技術(shù)中的應(yīng)用價值[D];鄭州大學(xué);2010年

4 王婧彥;HLA-G基因14bp缺失多態(tài)性與重度子癇前期的相關(guān)性研究[D];鄭州大學(xué);2010年

5 李靜;父源性HLA-A基因與子癇前期相關(guān)性研究[D];鄭州大學(xué);2010年

6 劉會敏;稽留流產(chǎn)患者絨毛組織中ADAM19和KISS-1基因的表達(dá)及其意義[D];鄭州大學(xué);2010年

7 孫亞蘭;子癇前期患者胎盤組織中Endoglin、VEGF及其受體的表達(dá)及意義[D];鄭州大學(xué);2010年

8 別靜洋;不同原因所致早產(chǎn)兒臨床特征的比較[D];鄭州大學(xué);2010年

9 馬麗紅;FADD、Livin在稽留流產(chǎn)絨毛組織中的表達(dá)及其意義[D];鄭州大學(xué);2010年

10 程海玲;脂連素、內(nèi)皮素-1與妊娠期高血壓疾病的相關(guān)性研究[D];鄭州大學(xué);2010年

本文編號：1258006