本文關(guān)鍵詞：甲型副傷寒沙門菌減毒株的構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建甲型副傷寒沙門菌減毒株,測試其減毒效果,為制備減毒疫苗奠定基礎(chǔ)。方法利用同源重組技術(shù)敲除甲型副傷寒沙門菌CMCC50093株的ync D基因和aro C基因,構(gòu)建出ync D單基因敲除株和ync D-aro C雙基因敲除菌株;通過測定和比較野生株、ync D單基因敲除株及ync D-aro C雙基因敲除株的生長曲線,評估基因敲除對細(xì)菌生長的影響;以豬胃黏蛋白增毒小鼠為模型,測定野生株和雙基因敲除株對模型動物的半數(shù)致死量LD50,評價雙基因敲除株的減毒效果。結(jié)果成功構(gòu)建并篩選到y(tǒng)nc D單基因及ync D-aro C雙基因敲除的甲型副傷寒沙門菌突變菌株。生長曲線測定顯示ync D基因和aro C基因敲除后,敲除株生長明顯緩慢。野生株和雙基因敲除株針對模型小鼠的LD50分別為7.90×101和3.33×106CFU,結(jié)果表明ync D-aro C雙敲除菌株的毒力較野生株下降約42 202倍,具有顯著的減毒效果。結(jié)論本研究所構(gòu)建的甲型副傷寒沙門菌ync D-aro C雙基因敲除突變株毒力明顯降低,安全性好,為研制甲型副傷寒減毒活疫苗奠定了堅實(shí)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室重慶市微生物工程實(shí)驗(yàn)室;第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅16營;第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅4營;
【基金】：重慶市科技攻關(guān)計劃項目(cstc2012gg-yyjs10057) 第三軍醫(yī)大學(xué)科研成果轉(zhuǎn)化基金項目
【分類號】：R378.22
【正文快照】： 傷寒仍然是影響人類健康的重要傳染病之一,據(jù)WHO估計全球每年有1 600~3 300萬感染者,死亡病例50~60萬[1]。臨床上引起人類傷寒病的沙門菌總共有4種血清型,即傷寒沙門菌和甲、乙、丙型副傷寒沙門菌。近年來的調(diào)查表明,全球傷寒病的流行特點(diǎn)發(fā)生了重要改變:在主要流行區(qū),甲型副

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本文編號：1252579