甲型副傷寒沙門(mén)菌減毒株的構(gòu)建與鑒定
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【摘要】:目的構(gòu)建甲型副傷寒沙門(mén)菌減毒株,測(cè)試其減毒效果,為制備減毒疫苗奠定基礎(chǔ)。方法利用同源重組技術(shù)敲除甲型副傷寒沙門(mén)菌CMCC50093株的ync D基因和aro C基因,構(gòu)建出ync D單基因敲除株和ync D-aro C雙基因敲除菌株;通過(guò)測(cè)定和比較野生株、ync D單基因敲除株及ync D-aro C雙基因敲除株的生長(zhǎng)曲線(xiàn),評(píng)估基因敲除對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響;以豬胃黏蛋白增毒小鼠為模型,測(cè)定野生株和雙基因敲除株對(duì)模型動(dòng)物的半數(shù)致死量LD50,評(píng)價(jià)雙基因敲除株的減毒效果。結(jié)果成功構(gòu)建并篩選到y(tǒng)nc D單基因及ync D-aro C雙基因敲除的甲型副傷寒沙門(mén)菌突變菌株。生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定顯示ync D基因和aro C基因敲除后,敲除株生長(zhǎng)明顯緩慢。野生株和雙基因敲除株針對(duì)模型小鼠的LD50分別為7.90×101和3.33×106CFU,結(jié)果表明ync D-aro C雙敲除菌株的毒力較野生株下降約42 202倍,具有顯著的減毒效果。結(jié)論本研究所構(gòu)建的甲型副傷寒沙門(mén)菌ync D-aro C雙基因敲除突變株毒力明顯降低,安全性好,為研制甲型副傷寒減毒活疫苗奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室重慶市微生物工程實(shí)驗(yàn)室;第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅16營(yíng);第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅4營(yíng);
【基金】:重慶市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(cstc2012gg-yyjs10057) 第三軍醫(yī)大學(xué)科研成果轉(zhuǎn)化基金項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】:R378.22
【正文快照】: 傷寒仍然是影響人類(lèi)健康的重要傳染病之一,據(jù)WHO估計(jì)全球每年有1 600~3 300萬(wàn)感染者,死亡病例50~60萬(wàn)[1]。臨床上引起人類(lèi)傷寒病的沙門(mén)菌總共有4種血清型,即傷寒沙門(mén)菌和甲、乙、丙型副傷寒沙門(mén)菌。近年來(lái)的調(diào)查表明,全球傷寒病的流行特點(diǎn)發(fā)生了重要改變:在主要流行區(qū),甲型副
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本文編號(hào):1252579
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