本文關(guān)鍵詞：自制殼聚糖—酵母多糖微球抗白色念珠菌的研究

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【摘要】：目的：探索殼聚糖和酵母多糖對(duì)白色念珠菌的作用，并以殼聚糖和酵母多糖為原料制備微球，考察殼聚糖-酵母多糖微球?qū)Υ笫蟀咨钪榫窝椎寞熜А?方法： 1.采用XTT減低法評(píng)價(jià)殼聚糖對(duì)96孔培養(yǎng)板內(nèi)白色念珠菌生物膜的生長(zhǎng)階段活性的影響。以熒光顯微鏡、掃描電鏡觀察殼聚糖對(duì)生物膜內(nèi)死活菌和形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。不同濃度的酵母多糖注射于大鼠體內(nèi)，提取所有大鼠肺組織內(nèi)總RNA并利用PCR技術(shù)檢測(cè)Dectin-1(Dentritic cell-associated C-type lectin-1)的表達(dá)。 2.采用乳化交聯(lián)法，對(duì)藥物比、油水比、攪拌速度、交聯(lián)劑、交聯(lián)時(shí)間幾項(xiàng)因素進(jìn)行分析，選出優(yōu)于制備微球的條件。通過(guò)掃描電鏡和紅外光譜對(duì)所制微球性質(zhì)和表面形態(tài)進(jìn)行分析。 3.建立免疫低下大鼠肺部感染白色念珠菌模型，隨機(jī)分組為模型組、殼聚糖組、聯(lián)合用藥組和微球組。分別給予相應(yīng)藥物治療后，HE染色觀察各組大鼠肺組織病理變化。Real-time PCR檢測(cè)Dectin-1、TLR2（Toll-like receptor2）mRNA的表達(dá), ELISA檢測(cè)IL-10、TNF-α水平。 結(jié)果： 1.0.0313%殼聚糖對(duì)白色念珠菌浮游菌和早期生物膜有明顯的抑制作用。隨著生物膜的成熟，0.0625%殼聚糖才能夠顯著地抑制生物膜生長(zhǎng)。通過(guò)熒光顯微鏡和掃描顯微鏡下觀察0.0625%殼聚糖能有效殺死生物膜內(nèi)菌體并延緩生物膜形成。低中高濃度的酵母多糖能上調(diào)大鼠體內(nèi)Dectin-1的表達(dá)，但高濃度酵母多糖可能引起全身炎癥反應(yīng)。 2.用乳化交聯(lián)法制備微球操作簡(jiǎn)單且穩(wěn)定。在藥物比為3:2，油水比為8:1，攪拌速度為600rpm，以戊二醛飽和的甲苯溶液作為交聯(lián)劑條件下，所制微球通過(guò)電鏡觀察表面成球型，分散性好,大小基本均勻，紅外光譜證實(shí)殼聚糖-酵母多糖微球內(nèi)殼聚糖和酵母多糖交聯(lián)成功。 3.自制殼聚糖-酵母多糖微球應(yīng)用于感染白色念珠菌肺炎的大鼠體內(nèi)，殼聚糖-酵母多糖微球組肺組織炎癥明顯減輕，且體內(nèi)Dectin-1、TLR2、IL-10水平明顯較模型組和殼聚糖組升高。而殼聚糖-酵母多糖微球組體內(nèi)TNF-α水平明顯較模型組降低。 結(jié)論： 1.殼聚糖具有殺滅白色念珠菌和抑制起生物膜形成的作用。酵母多糖對(duì)大鼠體內(nèi)Dectin-1具有上調(diào)作用。 2.乳化交聯(lián)法制備微球工藝簡(jiǎn)單。經(jīng)過(guò)優(yōu)化后工藝穩(wěn)定適合制備微球。 3.殼聚糖酵母多糖微球能顯著提高感染白色念珠菌肺炎的大鼠體內(nèi)Dectin-1、TLR2表達(dá)，促進(jìn)IL-10分泌并調(diào)節(jié)抑制TNF-α，，以達(dá)到抗白色念珠菌肺炎的作用。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R379.4

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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本文編號(hào)：1252110