NIRF對HBV復(fù)制的影響及其對組蛋白H3乙;降男揎
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【摘要】:為研究NIRF(Np95/ICBP-90 like RING finger protein)對乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的復(fù)制以及與乙型肝炎病毒共價環(huán)狀閉合DNA(HBV cccDNA)結(jié)合的組蛋白H3乙酰化的影響,采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染將pGEM-HBV1.3+pFLAG、pGEM-HBV1.3+pFLAG-NIRF、pGEM-HBV1.3質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入HepG2細胞,Western blot檢測NIRF蛋白的表達,用ELISA結(jié)合RT-PCR檢測HBsAg、HBeAg以及HBV cccDNA的量并同時說明HBV在細胞內(nèi)是完成完整復(fù)制表達的,采用染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)的方法檢測與HBV cccDNA結(jié)合的組蛋白H3以及H3乙;降膭討B(tài)變化。結(jié)果顯示,NIRF蛋白下調(diào)HBV標志物HBeAg、HBsAg的分泌以及HBV cccDNA的表達,表明其對HBV復(fù)制具有抑制作用;組蛋白H3及乙;慕M蛋白H3都與HBV cccDNA的動態(tài)變化水平呈現(xiàn)相似的平行性,而NIRF蛋白也明顯抑制組蛋白H3的表達水平和乙酰化水平。結(jié)論證實NIRF不僅能抑制HBV在肝癌細胞中的復(fù)制,而且能下調(diào)與HBV cccDNA結(jié)合的組蛋白H3和乙酰化組蛋白H3的表達。期待NIRF能為后續(xù)的HBV致病機理、HBV復(fù)制表觀遺傳學水平研究及有效抗病毒藥物的研究與開發(fā)提供理論上的支持與幫助。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學細胞生物學遺傳學教研室;重慶醫(yī)科大學臨床檢驗診斷中心教育部重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金(批準號:30872248) 重慶市科技委員會基金(批準號:2008BB5400) 重慶市教育委員會基金(批準號:KJ080326)資助的課題~~
【分類號】:R735.7
【正文快照】: 肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界第五大惡性腫瘤,我國肝癌患者占全世界肝癌患者的比例達到55%[1-2]。研究表明,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是肝臟疾病和肝臟腫瘤的主要病因之一,HBV感染對人類健康造成如此巨大的危害,是全世界尤其是我國急需解決
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10 錢R季,
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