FoxO3a在大鼠胚胎神經(jīng)細(xì)胞LTP過程中的早期表達(dá)變化的研究
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【摘要】:目的:觀察Kcl刺激誘導(dǎo)大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)FoxO3a及與其表達(dá)調(diào)控相關(guān)的基因Ras、Raf、MEK、ERKl、ERK2、PI3K、Akt、P27kip及Bim表達(dá)的變化,初步探討FoxO3a與這九個(gè)基因的相互作用對活動(dòng)依賴性神經(jīng)細(xì)胞生長、存活的作用及影響。方法:原代細(xì)胞培養(yǎng)獲取胎齡17d大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞;收集胎齡11d至出生1d的大鼠腦皮質(zhì)組織;采用RT-PCR方法分別檢測Kcl刺激誘導(dǎo)的大鼠腦皮質(zhì)及不同發(fā)育時(shí)期大腦皮質(zhì)組織中FoxO3a以及相關(guān)九個(gè)基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)情況。結(jié)果:原代細(xì)胞培養(yǎng)顯示細(xì)胞狀態(tài)良好。RT-PCR顯示,在Kcl刺激誘導(dǎo)的大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞中:(1)FoxO3a、Ras、Raf、MEK、ERKl、ERK2、PI3K、Akt、P27kip及Bim mRNA在各組不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)細(xì)胞中均有表達(dá);(2)FoxO3a mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min、3h表達(dá)均低于正常對照組(P0.05),且30min表達(dá)最低,12h表達(dá)最高;(3)Ras mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min表達(dá)最低,3h表達(dá)最高,在6h、12h較正常對照組表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(4)Raf mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min、6h、12h表達(dá)均低于正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(5)MEKmRNA在刺激誘導(dǎo)后3h表達(dá)最高,在30min、6h、12h表達(dá)均低于正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(6)ERK1在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min、12h表達(dá)均低于正常對照組(P0.05),,在3h表達(dá)最高,在6h的表達(dá)下降,且與正常對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(7)ERK2在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min、12h表達(dá)均低于正常對照組(P0.05),在3h表達(dá)最高,在6h表達(dá)下降,且與正常對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(8)PI3K在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min、12h表達(dá)均低于正常對照組(P0.05);在3h、6h表達(dá)均高于正常對照組(P0.05),且3h表達(dá)最高;(9)Akt在Kcl刺激誘導(dǎo)后3h表達(dá)最高,在30min、6h、12h表達(dá)均低于正常對照組(P0.05);(10)P27kip在Kcl刺激誘導(dǎo)各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均低于正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(11)Bim在Kcl刺激誘導(dǎo)12h的表達(dá)低于正常對照組(P0.05),30min、3h、6h的表達(dá)與正常對照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在大鼠腦皮質(zhì)組織中:(1)FoxO3a、Raf、ERKl、PI3K、Akt、P27kip及Bim在胚胎不同發(fā)育時(shí)期腦皮質(zhì)組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)Ras、MEK、ERK2在胚胎不同發(fā)育時(shí)期腦皮質(zhì)組織中表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); 結(jié)論:FoxO3a的表達(dá)與Kcl刺激時(shí)間長短有關(guān),其表達(dá)升高及與上下游基因的相互作用對胚胎期腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞早期反應(yīng)中的活動(dòng)功能具有重要作用。
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R338.2
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號:1251073
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