本文關(guān)鍵詞：人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)及細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析

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【摘要】：目的研究人骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的體外分離及培養(yǎng)方法,觀察各代人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特性,為臨床基礎(chǔ)研究提供參考依據(jù)。方法取全膝置換術(shù)患者殘存的無菌膝關(guān)節(jié)軟骨,采用兩步酶消化法(胰蛋白酶+Ⅱ型膠原酶)分離培養(yǎng)人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,并進(jìn)行傳代培養(yǎng)。通過倒置相差顯微鏡下觀察每代的細(xì)胞形態(tài),甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色對細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步鑒定后繪制生長曲線。結(jié)果兩步酶消化法消化出的軟骨細(xì)胞呈接近圓形,培養(yǎng)2~3 d,細(xì)胞貼壁、變形,呈多角形或條狀,2周左右細(xì)胞融合成層,4代后出現(xiàn)明顯分化,軟骨細(xì)胞增殖和生長緩慢。形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)染色顯示細(xì)胞培養(yǎng)4代以內(nèi)可以保持表型的穩(wěn)定。結(jié)論體外培養(yǎng)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞4代以內(nèi)生長良好,生物學(xué)特性明顯,4代以后出現(xiàn)去分化現(xiàn)象,提示我們2或3代骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞是用于實驗研究的最佳選擇。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院骨科;
【基金】：國家青年自然基金項目(81101388)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是一種隨年齡增長而發(fā)生率明顯增加的退行性關(guān)節(jié)疾病,其發(fā)病是一個多因素參與的復(fù)雜過程[1],至今其病因和發(fā)病機(jī)理仍不是十分清楚。大量研究表明,關(guān)節(jié)軟骨的退變被認(rèn)為是引起OA和OA發(fā)展過程中最重要的病理環(huán)節(jié)[2-3]。軟骨細(xì)胞作為軟骨的唯一細(xì)胞成

【參考文獻(xiàn)】

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1 秦俊;陳廖斌;汪暉;Magdalou Jaques;;人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年02期

2 童迅;，

本文編號：1249935