人骨關節(jié)炎軟骨細胞的體外培養(yǎng)及細胞形態(tài)學分析
發(fā)布時間:2017-12-03 20:23
本文關鍵詞:人骨關節(jié)炎軟骨細胞的體外培養(yǎng)及細胞形態(tài)學分析
【摘要】:目的研究人骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨細胞的體外分離及培養(yǎng)方法,觀察各代人關節(jié)軟骨細胞的形態(tài)學特性,為臨床基礎研究提供參考依據(jù)。方法取全膝置換術患者殘存的無菌膝關節(jié)軟骨,采用兩步酶消化法(胰蛋白酶+Ⅱ型膠原酶)分離培養(yǎng)人關節(jié)軟骨細胞,并進行傳代培養(yǎng)。通過倒置相差顯微鏡下觀察每代的細胞形態(tài),甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色對細胞進行進一步鑒定后繪制生長曲線。結果兩步酶消化法消化出的軟骨細胞呈接近圓形,培養(yǎng)2~3 d,細胞貼壁、變形,呈多角形或條狀,2周左右細胞融合成層,4代后出現(xiàn)明顯分化,軟骨細胞增殖和生長緩慢。形態(tài)學、免疫組織化學染色顯示細胞培養(yǎng)4代以內(nèi)可以保持表型的穩(wěn)定。結論體外培養(yǎng)骨關節(jié)炎軟骨細胞4代以內(nèi)生長良好,生物學特性明顯,4代以后出現(xiàn)去分化現(xiàn)象,提示我們2或3代骨關節(jié)炎軟骨細胞是用于實驗研究的最佳選擇。
【作者單位】: 四川大學華西醫(yī)院骨科;
【基金】:國家青年自然基金項目(81101388)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 骨關節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是一種隨年齡增長而發(fā)生率明顯增加的退行性關節(jié)疾病,其發(fā)病是一個多因素參與的復雜過程[1],至今其病因和發(fā)病機理仍不是十分清楚。大量研究表明,關節(jié)軟骨的退變被認為是引起OA和OA發(fā)展過程中最重要的病理環(huán)節(jié)[2-3]。軟骨細胞作為軟骨的唯一細胞成
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 秦俊;陳廖斌;汪暉;Magdalou Jaques;;人骨關節(jié)炎軟骨細胞的體外培養(yǎng)[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2007年02期
2 童迅;,
本文編號:1249935
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