發(fā)布時(shí)間：2017-12-03 18:21

  本文關(guān)鍵詞：成肌因子介導(dǎo)microRNA表達(dá)的力學(xué)信號(hào)調(diào)控

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【摘要】：研究背景： MicroRNA是一類高度保守的小分子的非編碼RNAs,通過(guò)與靶基因mRNA分子3’末端非翻譯區(qū)域特異性結(jié)合,負(fù)性調(diào)控轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá)。已證實(shí)miRNA廣泛存在于各種真核細(xì)胞中,參與生命過(guò)程的一系列過(guò)程,包括細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育,細(xì)胞增殖、分化,細(xì)胞凋亡等。其中miR-1, miR-133和miR-206被證實(shí)主要作用在肌原細(xì)胞或成肌細(xì)胞增殖、分化為成熟肌管的過(guò)程中。骨骼肌是人體最大的組織,它的收縮和舒張活動(dòng)是人體各種運(yùn)動(dòng)的基礎(chǔ)。各種外界刺激可能引起骨骼肌細(xì)胞細(xì)微損傷、凋亡以及壞死等,與此同時(shí)骨骼肌也可不斷地進(jìn)行修復(fù)和再生。骨骼肌的再生修復(fù)過(guò)程主要是由外部力學(xué)因素和內(nèi)部細(xì)胞因素兩者共同協(xié)調(diào)完成的一個(gè)非常復(fù)雜且呈多階段的過(guò)程。然而骨骼肌自身修復(fù)的能力有限,嚴(yán)重的骨骼肌損傷恢復(fù)不佳會(huì)極大的影響人們的運(yùn)動(dòng)能力和生活質(zhì)量,并且隨著骨骼肌損傷的發(fā)病率越來(lái)越高,有關(guān)骨骼肌損傷后修復(fù)、再生和重建的細(xì)胞、分子以及力學(xué)水平的機(jī)制研究日益受到研究者們的重視,一種結(jié)合細(xì)胞分子水平和力學(xué)刺激治療骨骼肌損傷的新方法殛待被發(fā)現(xiàn)。 1993年,Lee RC等在秀麗新小桿線蟲c.elegans中意外地發(fā)現(xiàn)了一種定時(shí)調(diào)控胚胎后期發(fā)育的miRNA-lin4,它是一種非編碼RNA,長(zhǎng)度為22nt。2000年,miRNA-let7的發(fā)現(xiàn)掀起了尋找miRNA的熱潮。近幾年,隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,分子克隆技術(shù)的改進(jìn)和模式物種cDNA文庫(kù)的建立,相繼又在線蟲、果蠅、Hela細(xì)胞等許多真核模式生物和細(xì)胞中找到了數(shù)百種相似的小分子RNA,并將其稱為miRNA (microRNA)。MicroRNA是小分子的進(jìn)化上高度保守的非編碼RNAs,其由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄作為編碼一個(gè)或多個(gè)miRNAs的長(zhǎng)前體miRNAs。大部分miRNA作為獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄本被轉(zhuǎn)錄,但大約有1/3嵌在蛋白編碼基因的內(nèi)含子中,被前信使RNAs剪接。Pri-miRNAs在胞核中經(jīng)蛋白質(zhì)Drosha和DGCR8剪切,產(chǎn)生一個(gè)60～70bp的具有發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)的RNA,稱為前體miRNA(precursor miRNA, pre-miRNA),Exprotin-5將其由胞核運(yùn)至胞質(zhì),在胞質(zhì)中Dicer酶將其剪切成為21～25bp的雙鏈RNA。這個(gè)雙鏈RNA由Dicer酶上釋放,在解螺旋酶作用下分離,其中一條單鏈與RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RNA-induced silencingcomplex, RISC)結(jié)合,與目標(biāo)mRNAs互補(bǔ),發(fā)揮miRNA功能,另一條立即被降解。miRNAs通過(guò)與靶mRNA3'UTRs序列特異性互補(bǔ),調(diào)節(jié)基因表達(dá),導(dǎo)致翻譯抑制或使mRNA失去穩(wěn)定性。對(duì)靶mRNA結(jié)合特異性互補(bǔ)的主要決定因素是由miRNA5’末端Watson-Crick2-8個(gè)堿基配對(duì)核苷酸決定,稱為“種子序列”。然而,這個(gè)區(qū)域外的核苷酸作為mRNA3'UTR序列環(huán)繞區(qū)域的二級(jí)結(jié)構(gòu),同樣影響mRNA抑制,且其miRNA的靶向定位與開放讀框有關(guān)。microRNA與其靶基因的互補(bǔ)程度決定其作用模式：1、microRNA與靶mRNA完全互補(bǔ)結(jié)合,切割靶mRNA。2、microRNA與靶mRNA不完全互補(bǔ)結(jié)合,抑制靶蛋白翻譯而不影響mRNA穩(wěn)定性。3、同時(shí)具有以上兩種作用模式。 肌組織特異表達(dá)的三種miRs:即miR-1, miR-133和miR-206,它們被證實(shí)主要作用在肌原細(xì)胞或成肌細(xì)胞增殖、分化為成熟肌管的過(guò)程中。體外組織培養(yǎng)細(xì)胞可模擬體內(nèi)肌肉增殖分化過(guò)程。使用C2C12細(xì)胞模型系統(tǒng),過(guò)表達(dá)和敲除實(shí)驗(yàn)已應(yīng)用于研究肌肉miRNA的功能。在C2C12成肌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)的miR-1和miR-206可促進(jìn)細(xì)胞分化,而過(guò)表達(dá)的miR-133可促進(jìn)細(xì)胞增殖,抑制其分化。相反,抑制內(nèi)源性的miR-1/206和miR-133,可導(dǎo)致對(duì)成肌細(xì)胞增殖、分化相反的影響。miR-1和miR-133源于相同的miRNA多順?lè)醋?并一起轉(zhuǎn)錄,但miR-1和miR-133具有相反的作用。進(jìn)一步研究證明miRNA可能在細(xì)胞增殖和分化的平衡中起著重要作用,miR-1和miR-133在小鼠骨骼肌肥大模型中表達(dá)水平均下降,這種表達(dá)改變是對(duì)骨骼肌超載的適應(yīng)性反應(yīng)。miR-206是在骨骼肌組織中表達(dá)含量最多的,且是目前所知唯一一個(gè)由骨骼肌特異表達(dá)的micorRNA,miR-206對(duì)早期肌衛(wèi)星細(xì)胞的遷移也有一定的作用。由于miR-206在肌萎縮側(cè)索硬化癥中的有益作用,被稱為是骨骼肌纖維和神經(jīng)雙向信號(hào)傳導(dǎo)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者,它可通過(guò)感應(yīng)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷,促進(jìn)神經(jīng)肌肉突觸的代償性再生。最近的研究表明miR-1, miR-133和miR-206可促進(jìn)骨骼肌損傷后的修復(fù),在小鼠撕裂的脛前肌部位局部注射miR-1, miR-133和miR-206的混合物,1周后與對(duì)照組比較可在形態(tài)和功能上顯著地增強(qiáng)骨骼肌的重建,因此,局部加強(qiáng)miR-1,133和206的含量或表達(dá)在骨骼肌損傷方面可能成為一個(gè)新的治療手段。 miRs的表達(dá)往往受到另外一些調(diào)節(jié)因子的調(diào)節(jié),在骨骼肌再生過(guò)程中,miR-1, miR-133和miR-206的表達(dá)都受到成肌因子(家族中主要包括NMyoD, myogenin, MRF4和Myf5等)的調(diào)節(jié)。MyoD和一些生肌素(如SRF, Mef2)可結(jié)合miR-1-1,miR-1-2, miR-133a-1, miR-133a-2和miR-206基因的上游增強(qiáng)子,直接調(diào)節(jié)這些miRs的表達(dá)。一個(gè)包含miR-206/133b的多聚賴氨酸轉(zhuǎn)錄被鑒定是7H4,一個(gè)突觸聯(lián)系的非編碼RNA,而7H4的表達(dá)在胚胎期、出生后以及在神經(jīng)移植后的骨骼肌再生過(guò)程中都與myogenin/MyoD緊密相連。在局部注射miR-1,133和206促進(jìn)骨骼肌修復(fù)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)外部給予三種miRs又可反過(guò)來(lái)上調(diào)損傷的骨骼肌中myogenin和MyoD的表達(dá)。成肌調(diào)節(jié)因子(myogenic regulatory factors, MRFs)本身在骨骼肌再生過(guò)程中對(duì)細(xì)胞水平的調(diào)節(jié)起著非常重要的作用,成肌過(guò)程是由于MRFs的表達(dá)所激發(fā)的。最近有學(xué)者提出MRFs在成肌細(xì)胞成熟過(guò)程中起著核心的作用,諸多對(duì)于成肌細(xì)胞調(diào)節(jié)的信號(hào)通路最終都殊途同歸,都是通過(guò)MRFs或目前還未知的非MRFs來(lái)起作用的。 同時(shí)力學(xué)刺激對(duì)胚胎期和出生后的骨骼肌發(fā)育都有著不可替代的作用,在細(xì)胞水平上,力學(xué)刺激可引起成肌細(xì)胞一系列的變化,如細(xì)胞增殖、分化、代謝、修復(fù)和存活。胚胎期由于骨的生長(zhǎng)所造成的外部力學(xué)刺激引起骨骼肌的發(fā)育,出生后被動(dòng)的力學(xué)刺激可增加骨骼肌蛋白合成和肌體積從而促進(jìn)骨骼肌生長(zhǎng)。適度的力學(xué)拉伸在體外可通過(guò)調(diào)節(jié)C2C12細(xì)胞中MyoD的表達(dá)從而促進(jìn)細(xì)胞的增殖與分化。合適的力學(xué)刺激才能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng),周期性力學(xué)拉伸比靜態(tài)牽拉內(nèi)皮細(xì)胞更能促進(jìn)新生血管及其分支的形成。既往研究表明緩慢的運(yùn)動(dòng)有利于改善肌肉的質(zhì)量,而劇烈的運(yùn)動(dòng)反而抑制成肌細(xì)胞的增殖。 外部力學(xué)刺激是通過(guò)一定的信號(hào)途徑把力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)信號(hào)的,這種確切的傳導(dǎo)機(jī)制目前尚不是十分清楚。研究較多的是p38MAPK和NF-κ B信號(hào)通路。最近的研究表明力學(xué)拉伸條件下p38MAPK是通過(guò)激活NF-κB信號(hào)通路誘導(dǎo)C2C12成肌細(xì)胞分化,因此,我們把重點(diǎn)放在NF-κB通路上。NF-κB是廣泛存在于胞漿中的一種快反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子,通常以p65-p50二聚體的形式存在,與抑制物I-κB (inhibitor of NF-κB, I-κB)結(jié)合而呈非活性狀態(tài),NF-κB活化后能夠進(jìn)入核內(nèi),與DNA上的特異位點(diǎn)(κB位點(diǎn))結(jié)合,調(diào)節(jié)包括生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞素、趨化因子以及抗凋亡蛋白等在內(nèi)的基因轉(zhuǎn)錄。在約為11N/cm2的拉力強(qiáng)度下,機(jī)械拉伸小鼠橫隔膜可通過(guò)激活NF-κB通路誘導(dǎo)Ankyrin重復(fù)域2(Ankyrin repeat domain2,Ankrd2) mRNA和蛋白表達(dá)顯著增強(qiáng)。后者的表達(dá)在體外和體內(nèi)對(duì)力學(xué)刺激都是高度靈敏的,因此被稱為拉伸反應(yīng)基因,而Ankrd2的表達(dá)被證明與MyoD和Myogenin之間存在交互效應(yīng)。mdx小鼠由于體內(nèi)缺乏抗肌萎縮蛋白的表達(dá),力學(xué)拉伸容易造成mdx小鼠骨骼肌損傷,外部力學(xué)拉伸mdx小鼠腹壁肌和股二頭肌15min時(shí)即可引起NF-κB的核轉(zhuǎn)錄,30min時(shí)達(dá)到高峰。而且,NF-κB信號(hào)通路可調(diào)控心肌組織的收縮功能、生長(zhǎng)、壞死和炎癥反應(yīng),生理和病理的外部刺激大多數(shù)都是通過(guò)NF-κB信號(hào)通路對(duì)心肌細(xì)胞起作用的。 本課題首先擬利用Flexcell FX5000細(xì)胞拉力系統(tǒng),對(duì)C2C12成肌細(xì)胞進(jìn)行周期性的力學(xué)拉伸,采用基因測(cè)序、qRT-PCR、Western blot等手段探討周期性力學(xué)拉伸C2C12成肌細(xì)胞引起細(xì)胞增殖分化過(guò)程中,NF-κB信號(hào)通路與由成肌因子介導(dǎo)的miRs的表達(dá)之間的交互作用；其次,利用基因測(cè)序技術(shù),探討其他的一些新的miRs在力學(xué)拉伸促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖過(guò)程中的作用。 綜上所述,miRNA領(lǐng)域拓寬了對(duì)轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制的理解。人類蛋白編碼基因的1/3以上受到miRNAs的調(diào)控,提示在肌肉生物學(xué)許多方面,miRNA發(fā)揮著巨大的潛在功能。在許多類型的骨骼肌疾病中,miRNA表達(dá)模式顯著改變,人類骨骼肌肌肉疾病miRNAs的表達(dá)鑒別可能成為新的診斷治療靶標(biāo)。同時(shí),適當(dāng)?shù)牧W(xué)刺激對(duì)骨骼肌損傷的修復(fù)也起著重要的作用。由此我們?cè)O(shè)想,在骨骼肌損傷修復(fù)過(guò)程中改變miRs的表達(dá)并輔以適當(dāng)?shù)牧W(xué)刺激是否會(huì)有效地促進(jìn)骨骼肌損傷的修復(fù),此有待進(jìn)一步研究,其機(jī)制將為骨骼肌損傷的治療提供新的思路。 目的： 1、探討不同周期性拉伸的運(yùn)動(dòng)條件對(duì)成肌細(xì)胞增殖與分化的影響,同時(shí)利用基因測(cè)序技術(shù)探討力學(xué)拉伸影響成肌細(xì)胞增殖分化過(guò)程中miRs的表達(dá)變化。 2、分析在力學(xué)拉伸引起成肌細(xì)胞增殖分化過(guò)程中NF-κB通路和由成肌因子介導(dǎo)的miRs的表達(dá)之間的相互關(guān)系。 3、探討其他的一些新的miRs在力學(xué)拉伸促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖過(guò)程中的作用。 方法： 1、力學(xué)加載和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 根據(jù)美國(guó)Flexercell公司生產(chǎn)的細(xì)胞柔性基底加載裝置(Flexcell FX5000tension),按照不同周期性拉伸的頻率、幅度和拉伸時(shí)間對(duì)C2C12成肌細(xì)胞進(jìn)行正弦波拉伸,加載程序由FX5000計(jì)算機(jī)軟件自動(dòng)控制,使用該加載裝置可以很方便地研究成肌細(xì)胞生長(zhǎng)和應(yīng)力的關(guān)系。 2、細(xì)胞增殖的測(cè)定 利用CCK-8試劑在酶標(biāo)儀(選擇450nm波長(zhǎng))中測(cè)定各拉伸組和對(duì)照組的光吸收值(OD值),以篩選出促增殖的拉伸條件。 3、力學(xué)拉伸后成肌細(xì)胞miRs的表達(dá)變化 對(duì)照組及加載組KNA提取和microRNA基因測(cè)序(樣品分離、數(shù)據(jù)分析等均由公司完成)。 4、力學(xué)拉伸引起成肌細(xì)胞增殖與分化過(guò)程中信號(hào)途徑分析 提取對(duì)照組和加載組的RNA、總蛋白及核蛋白,采用qRT-PCR、Western blot等方法進(jìn)行分析：第一步,不添加任何阻斷試劑,分析NF-κB、MyoD、myogenin以及microRNA的基因或蛋白的表達(dá)。第二步,在NF-κB抑制劑存在的條件下,再用相同的強(qiáng)度和頻率力學(xué)拉伸成肌細(xì)胞,檢測(cè)其增殖與分化情況,并檢測(cè)MyoD、myogenin以及microRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1、力學(xué)拉伸促進(jìn)C2C12增殖過(guò)程中microRNA表達(dá)譜的變化 應(yīng)用CCK-8試劑,對(duì)0Hz(對(duì)照組)、0.125Hz、0.25Hz和0.5Hz4組所測(cè)的OD值進(jìn)行單因素方差分析,統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果提示0.125Hz組與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.05,且其平均值高于對(duì)照組,提示對(duì)細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用。其他兩組與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,且平均值低于對(duì)照組。結(jié)果表明低頻率周期性機(jī)械拉伸可促進(jìn)成肌細(xì)胞的增殖。 通過(guò)高通量測(cè)序發(fā)現(xiàn),表達(dá)有差異且p值0.05的microRNA共10個(gè)。通過(guò)qRT-PCR驗(yàn)證的有7個(gè),其中上調(diào)的是：niR-1941-3p,其中下調(diào)的是：miR-500-3p, miR-1934-5p, miR-31-3p, miR-378a-5p, miR-331-3p, miR-5097. 差異microRNA預(yù)測(cè)靶點(diǎn)的KEGG通路分析結(jié)果顯示,與骨骼肌損傷修復(fù)有關(guān)的通路有：肌萎縮側(cè)索硬化(ALS),磷脂酰肌醇信號(hào)系統(tǒng),B細(xì)胞受體信號(hào)通路,MAPK信號(hào)通路等,這其中MAPK信號(hào)通路與骨骼肌相關(guān)的研究報(bào)道較多。 以上結(jié)果表明,低頻率的周期性機(jī)械拉伸可促進(jìn)成肌細(xì)胞的增殖,而高頻率的拉伸卻不能促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖,從而篩選出促增殖的拉伸條件。通過(guò)基因測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)了一些差異表達(dá)的microRNA,這些microRNA可能通過(guò)多種機(jī)制對(duì)成肌細(xì)胞增殖進(jìn)行調(diào)節(jié),其中較重要的有MAPK信號(hào)通路。MAPK可通過(guò)磷酸化和調(diào)節(jié)一些轉(zhuǎn)錄因子和染色質(zhì)重構(gòu)蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)成肌細(xì)胞的調(diào)節(jié)。這一初步研究結(jié)果為進(jìn)一步研究外部力學(xué)拉伸和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)調(diào)節(jié)在骨骼肌損傷修復(fù)過(guò)程中的機(jī)制提供一定基礎(chǔ)。 2、成肌因子介導(dǎo)的microRNAs表達(dá)和NF-KB通路之間存在著交互關(guān)系 應(yīng)用CCK-8試劑,2.5μM BAY(NF-κB抑制劑)拉伸組、5μM BAY(NF-κB抑制劑)拉伸組分別與對(duì)照組所測(cè)的OD值進(jìn)行兩樣本的t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果提示5μM BAY拉伸組與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.001,且其OD值明顯低于對(duì)照組,提示對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用。而2.5μM BAY拉伸組與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果表明NF-κB抑制劑的濃度大于5μM時(shí)明顯抑制成肌細(xì)胞的增殖。 通過(guò)western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在內(nèi)參表達(dá)基本一致情況下,5μMBAY拉伸組的NF-κB的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.001。此實(shí)驗(yàn)說(shuō)明5μM BAY明確抑制了NF-κB通道。 同樣選取第一章中0.125Hz拉伸組和對(duì)照組相比有差異表達(dá)的7個(gè)microRNA進(jìn)行qRT-PCR實(shí)驗(yàn)。結(jié)果與第一章中的結(jié)果相反,5μM BAY拉伸組和對(duì)照組相比,7個(gè)microRNA的表達(dá)發(fā)生了變化,其中下調(diào)的是：miR-1941-3p,其中上調(diào)的是：miR-500-3p,miR-1934-5p,miR-31-3p,miR-378a-5p,miR-331-3p,miR-5097,而其中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的是miR-378a-5p,miR-331-3p,miR-5097, miR-1941-3p.同時(shí)通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),0.125Hz拉伸組和對(duì)照組相比,MyoD(肌分化因子)和Myogenin(生肌因子)的基因表達(dá)是上調(diào)的,而加入NF-κB抑制劑的5μM BAY拉伸組和對(duì)照組相比,MyoD(肌分化因子)和Myogenin(生肌因子)的基因表達(dá)是明顯下調(diào)的,這些差異表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.01。 上述結(jié)果說(shuō)明在通過(guò)力學(xué)拉伸促進(jìn)細(xì)胞增殖的過(guò)程中,抑制NF-κB通路,可以改變miRNA,MyoD和Myogenin的表達(dá),進(jìn)而影響細(xì)胞的再生和增殖,他們?nèi)咧g存在交互關(guān)系,在外部力學(xué)拉伸促進(jìn)細(xì)胞增殖方面起著重要的作用。 3、三種miRs在力學(xué)拉伸促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖過(guò)程中的作用 高通量測(cè)序相較于普通基因測(cè)序的一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)是高通量測(cè)序可發(fā)現(xiàn)一些新的miRs。我們?cè)趯?duì)對(duì)照組和拉伸組進(jìn)行高通量測(cè)序過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)了11種在兩組共同表達(dá),且表達(dá)有差異的新的miRs。分別是：mir-12, mir-14, mir-16, mir-17, mir-20, mir-36, mir-39, mir-4, mir-42, mir-44, mir-6。其中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的有3種:mir-44, mir-36, mir-20, Log2fold change分別為：-6.713,1.109,1.189。對(duì)有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的有3種miRs,即]mir-44, mir-36, mir-20,進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果與高通量測(cè)序結(jié)果一致。 進(jìn)一步對(duì)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的3種miRs進(jìn)行KEGG通路分析,包括的信號(hào)通路有：Vascular smooth muscle contraction, Atrazine degradation, Notch signaling pathway, phototransduction等。其中與骨骼肌修復(fù)有關(guān)的研究中,Notch信號(hào)通路的報(bào)道較多。 以上結(jié)果說(shuō)明其他一些新的miRs可能是通過(guò)影響多種信號(hào)通路,如Notch信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖的。 結(jié)論： 1、低頻率的周期性機(jī)械拉伸可促進(jìn)成肌細(xì)胞的增殖,而高頻率的拉伸卻不能促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖。通過(guò)基因測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)拉伸組和對(duì)照組存在microRNA表達(dá)譜的差異。 2、力學(xué)拉伸促進(jìn)細(xì)胞增殖的過(guò)程中,抑制NF-κB通路,可以改變microRNA, MyoD和Myogenin的表達(dá),進(jìn)而影響細(xì)胞的再生和增殖,他們?nèi)咧g存在交互關(guān)系。 3、通過(guò)高通量測(cè)序,在拉伸組和對(duì)照組的比較中發(fā)現(xiàn)了一些新的microRNA,它們可能通過(guò)Notch信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R337

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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本文編號(hào)：1249613