本文關(guān)鍵詞：小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的分離與鑒定

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【摘要】：為建立一種簡單可靠的小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞(MIBECs)分離培養(yǎng)方法,用Ⅳ型膠原酶進(jìn)行門靜脈灌注,取出肝內(nèi)膽管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型膠原酶分類消化,小鼠肝內(nèi)膽管組織細(xì)小、均勻的細(xì)胞團(tuán)培養(yǎng)于含100mL/L胎牛血清(FBS)和10ng/mL表皮生長因子(EGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和胰島素轉(zhuǎn)鐵蛋白硒(ITS)的DMEM/F12培養(yǎng)基中。細(xì)胞貼壁后,利用細(xì)胞角蛋白19免疫熒光法鑒定目的細(xì)胞。在培養(yǎng)的過程中,用CCK8測(cè)定細(xì)胞的生長曲線。結(jié)果顯示,成功分離出MIBECs,細(xì)胞純度約95%。細(xì)胞培養(yǎng)3d~7d內(nèi)呈對(duì)數(shù)生長狀態(tài)。以上結(jié)果表明本分離培養(yǎng)方法是一種簡單可靠的小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞分離純化培養(yǎng)技術(shù)。
【作者單位】： 徐州醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室感染與免疫實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81171590,31302077) 家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(SKLVEB2013KFKT005) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(2014年)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞(intrahepatic bile duct epi-thelial cells,IBECs)約占肝細(xì)胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)[1]。IBECs具有復(fù)雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明,常見的肝內(nèi)膽

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 高建軍;馬利林;朱建偉;戴進(jìn);劉建明;王偉;;殼聚糖-膠原復(fù)合載體對(duì)肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞生長的影響[J];肝膽胰外科雜志;2006年03期

2 張柳平;邵根寶;潘耀謙;;成年小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的分離、鑒定及功能檢測(cè)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年09期

3 楊航;易瓊;李圓方;張小藝;王魯;;兩種不同消化法對(duì)小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)的影響[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年03期

4 李鄭紅;陸倫根;;膽管細(xì)胞免疫生物學(xué)研究進(jìn)展[J];肝臟;2014年04期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 鄧世康;袁s，

本文編號(hào)：1246690