本文關(guān)鍵詞：Tn5細胞中單鏈抗體基因抗人重組質(zhì)粒分子的表達分析

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【摘要】：目的研究Tn5細胞中單抗抗人重組質(zhì)粒(B7-2)基因的表達及其活性。方法基于具備信號肽單抗抗人B7-2構(gòu)建,構(gòu)建系統(tǒng)Bac-to-Bac并含單抗抗人B7-2桿狀重組病毒AcBacmid單抗B7-2,對Tn5細胞采用不同感染復數(shù)(MOI)實施感染,進行24、48、72h不同時點細胞蛋白活性的分泌表達,并分析人外周血中單個核細胞受Raji刺激呈增殖表達,予以單抗抑制的效果。結(jié)果應(yīng)用不同MOI對Tn5細胞感染,達72h后進行細胞收集,予以聚丙烯酰氨凝膠電泳(PAGE-SDS)分析,其MOI為1~10表達目的蛋白的量,確定最佳MOI為5;MTT法下自動酶標儀波長570nm位置吸光度,其吸光值的大小同細胞PBMC增殖可呈正相關(guān);各組吸光值顯示細胞Raji刺激外周血單個核細胞(PBMC)呈增殖表達,單抗抗人B7-2可以抑制Raji細胞刺激PBMC出現(xiàn)的增殖效應(yīng)。結(jié)論單抗B7-2抗原抗體相結(jié)合的活性,以及對PBMC產(chǎn)生的抑制效應(yīng)均存在,但未見單抗B7-2效應(yīng)明顯表達,有待進行更進一步的試驗研究。
【作者單位】： 襄陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科;
【基金】：湖北省科技計劃自然科學基金資助項目(2011CDB298)
【分類號】：R392
【正文快照】： 因為細胞Tn5是能夠使分泌性蛋白表現(xiàn)呈高水平分泌的理想型宿主,同時昆蟲細胞對該指標表達的效率也比較顯著,還能夠?qū)腋∨囵B(yǎng)甚至無血清培養(yǎng)達到快速適應(yīng),因此AcBacmid重組桿狀病毒單抗人重組質(zhì)粒(B7-2)上清液中能使Tn5細胞感染[1]。本研究基于具備信號肽單抗抗人B7-2構(gòu)建,構(gòu)

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【相似文獻】

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本文編號：1232236