體外轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞核因子4α促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的研究
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【摘要】:目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,HuMSCs)在肝細(xì)胞核因子4α(Hepatocyte nuclear factor4alpha, HNF4α)轉(zhuǎn)染后向肝細(xì)胞分化情況,為肝組織工程提供新的種子來(lái)源。 方法:從人臍帶華通膠中分離出HuMSCs,用含有堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)誘導(dǎo)9天后轉(zhuǎn)染HNF4α。通過(guò)光學(xué)顯微鏡及免疫熒光技術(shù)觀察誘導(dǎo)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;用Western-Blot檢測(cè)肝細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá);用RT-PCR法檢測(cè)肝細(xì)胞特異性基因的表達(dá);并對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清白蛋白(ALB)與尿素氮(BuN)進(jìn)行特異性檢驗(yàn),對(duì)照組只轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒PCDNA3.1。 結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在早先報(bào)道的誘導(dǎo)方案下,,可以較容易地將HuMSCs誘導(dǎo)為肝樣細(xì)胞。過(guò)表達(dá)HNF4α可以使誘導(dǎo)分化細(xì)胞肝特異性蛋白及基因的表達(dá)水平顯著升高,這可能是與肝富集因子網(wǎng)絡(luò)及Wnt/β-Catenin信號(hào)通路相關(guān)的。 結(jié)論:過(guò)表達(dá)HNF4α可以促進(jìn)HuMSCs向肝細(xì)胞分化,從而為臨床提供更好的細(xì)胞來(lái)源。
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R329
【共引文獻(xiàn)】
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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條
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本文編號(hào):1227914
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