本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)染CX3CR1基因?qū)π∈蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞向Fractalkine趨化能力的影響

  更多相關(guān)文章： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 趨化因子Fractalkine 趨化因子受體CXCR 慢病毒載體 基因轉(zhuǎn)染 細(xì)胞遷移

【摘要】：目的:研究在Transwell共培養(yǎng)體系中,轉(zhuǎn)染CX3CR1基因?qū)π∈蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向趨化因子Fractalkine(FKN)趨化能力的影響。方法:采用差速貼壁法分離純化小鼠MSCs,體外培養(yǎng)、傳代擴(kuò)增,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原標(biāo)志和細(xì)胞周期;將攜帶有趨化因子受體CX3CR1基因及綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒(LV-CX3CR1-EGFP)及空載體病毒(LV-CON-EGFP)轉(zhuǎn)染小鼠MSCs細(xì)胞,RT-PCR法分別檢測(cè)空白對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組細(xì)胞中CX3CR1 mRNA表達(dá)情況,Western blot印記法檢測(cè)CX3CR1蛋白的表達(dá)水平,并通過(guò)Transwell共培養(yǎng)體系觀察不同轉(zhuǎn)染組細(xì)胞向趨化因子FKN的遷移情況。結(jié)果:成功獲得了細(xì)胞形態(tài)均一,生長(zhǎng)狀態(tài)良好的MSCs;細(xì)胞CD29、CD44、CD34有陽(yáng)性表達(dá);陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠MSCs不表達(dá)CX3CR1基因;構(gòu)建的慢病毒過(guò)表達(dá)載體pUbi-MSC-CX3CR1-EGFP能成功轉(zhuǎn)染至小鼠MSCs中,并使轉(zhuǎn)染后的MSCs表達(dá)CX3CR1 mRNA及蛋白。在Transwell共培養(yǎng)體系中,轉(zhuǎn)染CX3CR1基因的小鼠MSCs向趨化因子FKN趨化能力明顯強(qiáng)于各對(duì)照組(P=0.000),其中陰性對(duì)照組浸潤(rùn)至下室的細(xì)胞數(shù)為:(13.80±2.17)個(gè)每高倍鏡視野(n=5)。實(shí)驗(yàn)組浸潤(rùn)至下室的細(xì)胞數(shù)為:(35.80±3.34)個(gè)每高倍鏡視野(n=5)。FKN抗體阻斷組浸潤(rùn)至下室的細(xì)胞數(shù)為(14.80±1.92)個(gè)每高倍鏡視野(n=5)。結(jié)論:轉(zhuǎn)染CX3CR1基因能有效增加小鼠MSCs向趨化因子FKN趨化的能力。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年科;
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是心血管系統(tǒng)疾病中常見(jiàn)的疾病,也是危害人類健康的疾病,其發(fā)病機(jī)制和治療方法的研究一直是心血管疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。血管內(nèi)皮損傷及炎癥反應(yīng)是AS發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié),因此保護(hù)血管內(nèi)皮功能和抑制炎癥反應(yīng)在AS的治療中顯得尤為重要。在AS病

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李水仙,賈文祥,趙連三,唐紅,劉麗,王松;磷酸鈣法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物非貼壁細(xì)胞[J];山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年02期

2 金丹 ,裴國(guó)獻(xiàn) ,齊鳳菊 ,胡罷生 ,魏寬海 ,王珂 ,陳濱;hBMP_7基因轉(zhuǎn)染對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及膠原合成的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

3 張新華,鐘翠平;樹(shù)突狀細(xì)胞與移植免疫的研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

4 楊健,王躍祥,官孝群,馬春姑,陶賢梅,宋后燕;人纖溶酶原K5區(qū)基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建和活性鑒定[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年05期

5 趙君,劉彬,任文陟,張守峰,宇麗,李元平,喬貴林,扈榮良,殷震;體內(nèi)精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染法建立轉(zhuǎn)基因小鼠[J];實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào);2003年03期

6 劉希民,葛林阜,馬煥文;高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的4種方法轉(zhuǎn)染小鼠T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)染率比較[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年02期

7 王耿,何國(guó)祥,徐曉輝,冉擘力,景濤,陳渝;gax基因?qū)ρ芷交〖?xì)胞中p21基因表達(dá)的影響[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2005年07期

8 羅浩;江洪;蔡軍;曾彬;;綠色熒光蛋白標(biāo)記的小鼠胚胎干細(xì)胞系的建立及向心肌細(xì)胞分化[J];心臟雜志;2006年04期

9 劉殿峰;張嘉保;張守峰;姚偉;李雪;扈榮良;;蚓激酶重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及其在牛乳腺中的表達(dá)[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2006年05期

10 袁成福;楊俊霞;魏麗麗;石華;陳濟(jì);易發(fā)平;馬永平;宋方洲;;人黑色素濃集激素1型受體真核表達(dá)載體的構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞系的建立[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉顏顏;武軍駐;何春燕;李小明;;人a-保護(hù)素1在細(xì)胞氧化低密度脂蛋白中的作用[A];湖北省暨武漢市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆第十七次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

2 張夢(mèng)杰;楊云龍;祝建;陳平;李昂;賀美蘭;李風(fēng)知;;轉(zhuǎn)錄因子AP-2(α、β和γ)對(duì)Hela細(xì)胞中survivin基因表達(dá)的影響[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

3 羅嬋;陸鳳花;陳施蓓;李楠;任艷萍;李輝;劉慶友;石德順;;電轉(zhuǎn)染水牛胎兒成纖維細(xì)胞方法的建立[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

4 薛世偉;林艷麗;熊福銀;吳曉潔;周艷榮;郭虹敏;陳紅星;陳樹(shù)林;;人Nanog基因的克隆及其在CHO-K1細(xì)胞中的表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

5 李蕾;王潤(rùn)田;王兆源;楊永杰;葛錫銳;王蕙芬;;模擬mIL—18天然生成的真核表達(dá)體系的構(gòu)建3—A—W5—78—P及其生物學(xué)活性的初步研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

6 劉志坤;祝淑釵;蘇景偉;王玉祥;楊潔;李娟;沈文斌;;MDC1基因shRNA慢病毒載體構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞株的建立及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射腫瘤治療學(xué)分會(huì)六屆二次暨中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤放療專業(yè)委員會(huì)二屆二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

7 祝淑釵;劉志坤;楊潔;蘇景偉;王玉祥;沈文斌;李娟;;53BP1基因shRNA慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞株的建立及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射腫瘤治療學(xué)分會(huì)六屆二次暨中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤放療專業(yè)委員會(huì)二屆二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

8 尚德淑;陳譽(yù)華;;經(jīng)ibeB基因轉(zhuǎn)染的鼠胚胎干細(xì)胞分化的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

9 張玉成;王雅麗;杜珍武;張桂珍;;重組核心蛋白聚糖轉(zhuǎn)染對(duì)HepG2細(xì)胞周期以及P21表達(dá)的影響[A];第十二屆中國(guó)體視學(xué)與圖像分析學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 孫瑋;葛海良;王穎;張惠珍;張笑人;周光炎;;轉(zhuǎn)染MHCⅡ類反式激活蛋白調(diào)節(jié)抗腫瘤免疫應(yīng)答的研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所 勞為德;哺乳動(dòng)物的遺傳改造[N];科技日?qǐng)?bào);2001年

2 記者 李秀萍;石河子大學(xué)轉(zhuǎn)基因克隆綿羊研究取得突破[N];兵團(tuán)日?qǐng)?bào)(漢);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高宏飛;Myod1和Myog真核共表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染真皮成纖維細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

2 唐七義;犬腺病毒1型疫苗株DNA末端序列與結(jié)構(gòu)分析及其E3區(qū)缺失載體的構(gòu)建[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1996年

3 卜秀娟;蚓激酶表達(dá)產(chǎn)物活性在動(dòng)物體內(nèi)的檢測(cè)[D];吉林大學(xué);2007年

4 邱亞峰;表達(dá)MDV gB CTL表位與雞HSP108融合蛋白基因的重組CVI988病毒的構(gòu)建及免疫保護(hù)試驗(yàn)[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 黃清玲;乙型肝炎病毒全基因水平對(duì)HepG2細(xì)胞的影響及其機(jī)制的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

6 關(guān)鈞;ODC反義RNA真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及人肺鱗癌細(xì)胞惡性表型的逆轉(zhuǎn)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1995年

7 耿利英;脂質(zhì)體介導(dǎo)抑制素基因轉(zhuǎn)染對(duì)牛卵泡細(xì)胞及胚胎發(fā)育的影響及機(jī)制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 張貴星;光誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及其在鹽藻除草劑抗性轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2003年

9 張淼濤;豬瘟病毒C-株全長(zhǎng)cDNA感染性的恢復(fù)及其標(biāo)記疫苗的構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年

10 鄭喜邦;穩(wěn)定表達(dá)牛Nanog基因的成纖維細(xì)胞制作、多能性分析及轉(zhuǎn)基因克隆胚胎構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何小寧;人溶菌酶基因乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建及其在小鼠乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

2 劉萍;口蹄疫病毒3C基因的真核表達(dá)及其誘導(dǎo)宿主細(xì)胞凋亡的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

3 陳幸德;豬干擾素-γ基因的克隆及其表達(dá)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

4 侯穎;綠色熒光蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的研究[D];新疆大學(xué);2005年

5 馮穎;人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因（hTERT）構(gòu)建永生化軟骨細(xì)胞可行性的研究[D];吉林大學(xué);2007年

6 彭玉穎;大鼠膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子克隆及表達(dá)的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

7 王巧俠;丙型肝炎病毒核心蛋白對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1表達(dá)的影響[D];蘭州大學(xué);2006年

8 遇紅梅;穩(wěn)定表達(dá)BDNF星形膠質(zhì)細(xì)胞系的建立及其鑒定[D];吉林大學(xué);2005年

9 楊娜娜;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表達(dá)及維持雞胚胎干細(xì)胞未分化狀態(tài)的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 張陽(yáng);SPAP2在小鼠組織中的分布以及在Hela細(xì)胞中的表達(dá)[D];吉林大學(xué);2006年

，

本文編號(hào)：1227510