本文關(guān)鍵詞：慢病毒載體介導(dǎo)的COX-2基因沉默在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)及對干細(xì)胞定向分化能力影響的研究

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【摘要】：[背景]：目前,COX-2基因沉默在干細(xì)胞中的研究還處在初級階段。 [目的]：構(gòu)建攜帶COX-2基因沉默的慢病毒載體,觀察其在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá),以及其定向分化潛能變化情況。 [方法]：應(yīng)用重組慢病毒技術(shù)構(gòu)建攜帶沉默COX-2基因和綠色熒光蛋白的慢病毒載體,并用其轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)第3代的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以無目的基因的慢病毒轉(zhuǎn)染入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和未做處理的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別作為陰性對照組和空白組進行對比。轉(zhuǎn)染后7天分別提取各組細(xì)胞的總RNA和蛋白檢測COX-2表達(dá)量。對COX-2基因沉默的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和正常人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo),觀察COX-2基因沉默對入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂、成骨、成軟骨能力的影響。 [結(jié)果與結(jié)論]：慢病毒轉(zhuǎn)染3d后,熒光顯微鏡下可見人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)出綠色熒光,陰性對照組轉(zhuǎn)染效率可達(dá)90%以上,實驗組轉(zhuǎn)染效率達(dá)85%以上。RT-PCR和Western blot檢測結(jié)果顯示,COX-2基因在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明顯抑制。COX-2基因轉(zhuǎn)染對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂、成骨、成軟骨能力無明顯影響。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1225265