發(fā)布時(shí)間：2017-11-24 05:25

  本文關(guān)鍵詞：鈣激活氯通道ANO1在小鼠心肌細(xì)胞的表達(dá)及其功能鑒定

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【摘要】：目的:探討鈣激活氯通道蛋白anoctamin 1(ANO1)在小鼠原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞中的表達(dá)及其功能特性。方法:采用胰酶與膠原酶共同消化,聯(lián)合2次差速貼壁法獲得C57BL/6小鼠原代心肌細(xì)胞;并用免疫熒光染色法檢測α-橫紋肌肌動(dòng)蛋白,以鑒定心肌細(xì)胞純度;應(yīng)用RT-PCR檢測小鼠心肌細(xì)胞ANO1 mRNA的表達(dá);免疫印跡檢測ANO1蛋白在小鼠心肌細(xì)胞的表達(dá)情況;應(yīng)用熒光淬滅動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測ANO1鈣激活氯通道的功能特性。結(jié)果:RT-PCR結(jié)果表明原代培養(yǎng)的小鼠心肌細(xì)胞表達(dá)ANO1 mRNA。免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示原代培養(yǎng)的小鼠心肌細(xì)胞表達(dá)ANO1蛋白。熒光淬滅動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)表達(dá)于小鼠心肌細(xì)胞的ANO1具有鈣激活氯通道典型的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能特性。結(jié)論:ANO1在小鼠心肌細(xì)胞中有明確表達(dá),并具有鈣激活氯離子通道特性,提示ANO1是鈣激活氯通道的分子基礎(chǔ)。
【作者單位】： 吉林醫(yī)藥學(xué)院臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81202031) 吉林省教育廳基金資助課題(No.2013351) 2014年吉林省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃 2013年吉林省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃 吉林醫(yī)藥學(xué)院大學(xué)生科研基金資助課題(吉醫(yī)學(xué)科字[2012]第12號)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 鈣激活氯通道(calcium-activated chloride chan-nels,Ca CCs)是心肌主要的氯離子通道之一,與心肌細(xì)胞的電活動(dòng)關(guān)系密切。Ca CCs不僅參與心肌靜息電位的形成及動(dòng)作電位的復(fù)極化過程,并且在急性心肌缺血、再灌注、心力衰竭等病理狀態(tài)下,Ca CCs異常激活,形成瞬間內(nèi)向電流,產(chǎn)生異

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本文編號：1221187