本文關鍵詞：枳實總黃酮在IBS模型大鼠體的藥動學—藥效學研究

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【摘要】：目的： 本論文以枳實黃酮類成分作為研究藥物,采用冰醋酸灌腸刺激加慢性束縛夾尾方法建立為肝郁脾虛型腸易激綜合征(IBS)大鼠模型,初步探討枳實總黃酮對肝郁脾虛型IBS的治療作用。本論文的實驗研究主要分為三部分來闡明作用機制：(1)枳實總黃酮對肝郁脾虛型IBS大鼠的藥效學實驗研究；(2)正常和模型大鼠離體腸道菌群對枳實總黃酮的代謝研究；(3)枳實總黃酮在正常與肝郁脾虛型IBS大鼠體內的PK-PD研究。 方法： 1、肝郁脾虛型IBS大鼠模型建立及藥效指標的監(jiān)測 SD大鼠每天早上給予4%的冰醋酸灌腸刺激,連續(xù)14d,于造模第7d開始對大鼠進行束縛夾尾應激,造模持續(xù)3周時間,建立肝郁脾虛型IBS大鼠模型。藥效實驗分為4組：模型組,枳實總黃酮(ZSZHT)治療組(3g/kg),陽性藥得舒特(Dicetel)治療組(1.5mg/Kg),正常對照組。藥物治療1周,測量不同實驗階段大鼠的體重、排便數(shù)、礦場運動、內臟敏感性、糖水消耗量水平變化,還有血清一氧化氮水平和結盲腸組織中肥大細胞(MC)數(shù)目變化。 2、腸道菌群藥物代謝模型的建立 將枳實總黃酮藥液分別與新鮮配制的正常及IBS大鼠腸道菌群孵育液在37℃孵化,采用HPLC-UV測定孵化不同時間點大鼠腸道菌群液中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素的濃度。采用DAS2.1.1軟件對大鼠體外腸道菌的藥時曲線進行房室模型擬合,計算藥代動力學參數(shù),考察兩組大鼠離體腸道菌群對枳實總黃酮的代謝差異。同時使用LC-MS技術檢查枳實總黃酮腸道菌群代謝產物。 3、PK-PD結合模型的建立 建立枳實3個黃酮苷(柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷)的LC-MS/MS分析方法學,測定正常與模型大鼠給予枳實總黃酮液后的藥物代謝動力學,同時用硝酸還原酶法間接測定不同時間點血漿NO含量,以NO含量作為藥效指標。采用WinNonlin4.0.1軟件進行藥物在大鼠體內的藥動學-藥效學相關性分析。 結果： 1、造模期間,與正常對照組相比,模型組和治療組大鼠行為學及內臟敏感性有顯著差異,表現(xiàn)為體重增長緩慢,排便數(shù)顯著增加,糖水吸收量明顯減少,內臟敏感性顯著增加。給藥治療1周后,枳實總黃酮組和得舒特組大鼠行為學有明顯改善、內臟敏感性降低；枳實總黃酮能提高模型大鼠血清NO的含量,并且減少模型大鼠結盲腸組織MC的數(shù)目。 2、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷在48h內能顯著性地被IBS大鼠腸道菌群水解,同時水解為橙皮素和柚皮素；而正常大鼠腸道菌群對枳實總黃酮的水解速度緩慢,生成柚皮素和橙皮素的速度也緩慢。且枳實總黃酮經腸道菌群代謝后檢測出6個新的代謝產物。 3、枳實總黃酮在正常和模型大鼠體內藥代動力學過程存在顯著性差異,模型組中3個黃酮苷的AUC和峰濃度(Cmax)均遠低于正常對照組,消除速率(K)及血漿清除率(CLF)也均明顯高于正常對照組(P0.05)；模型組中3個黃酮苷的達峰時間(Tmax)縮短；枳實總黃酮效應和效應室藥物濃度之間符合Sigmoid-Emax藥效學模型,模型組中Emax、Ec50、Keo及S參數(shù)均發(fā)生改變,盡管與正常對照組相比沒有顯著性差異。 結論： 枳實總黃酮對肝郁脾虛型IBS大鼠模型的作用機制可能是通過升高模型大鼠血清NO的含量,減少結盲腸組織中MC數(shù)目,從而調節(jié)大鼠胃腸道運動及降低內臟敏感性；枳實總黃酮在模型大鼠體內、體外藥物代謝動力學均發(fā)生顯著性變化,可能與肝郁脾虛型IBS大鼠腸道菌群生態(tài)構造發(fā)生改變有關；藥物代謝差異促使3個黃酮苷與模型組中NO受體親合力加大,Emax增加,從而藥效增強。
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：1220807