鈣離子激活鉀通道和內向整流鉀電流對人外周血內皮祖細胞分化的影響
發(fā)布時間:2017-11-19 06:21
本文關鍵詞:鈣離子激活鉀通道和內向整流鉀電流對人外周血內皮祖細胞分化的影響
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【摘要】:內皮祖細胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)能定向分化為成熟內皮細胞(Endothelial cells, ECs);在體內,,EPCs能加強血管新生作用,修復梗死的心肌區(qū)域。通過全細胞膜片鉗技術,在EPCs中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多離子通道,如鈣離子激活的鉀離子通道(KCa)、內向整流鉀電流(Kir)、容量敏感性的氯離子通道(ICl.vol)等等。本課題將探索:①在EPCs定向分化過程中哪種離子通道起到的作用最為關鍵;②該離子通道在EPCs定向分化過程中起到何種作用;③在mRNA和蛋白質水平,檢測該離子通道亞型在EPCs定向分化過程中的表達。我們用密度梯度離心法分離出正常成人外周血中的單個核細胞層,內皮祖細胞條件培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。當EPCs充分分化為成熟內皮細胞后,流式細胞檢測CD133陽性細胞的表達比例,結果顯示幾乎不表達(0.44±0.20%,N=6);而加入四乙基胺(Tetraethylammonium, TEA,阻滯鉀離子通道)后,CD133+細胞的表達比例明顯提高(25.50±7.55%,N=6)。體外血管形成實驗中,我們發(fā)現(xiàn)加入TEA后,充分分化后的EPCs成管不佳,且無細胞間的相互連接。在mRNA和蛋白質水平,我們檢測到三個鉀離子通道亞型的表達,分別是KCNN4編碼的中電導鈣離子激活的鉀電流(IKCa)、KCNNMA1編碼的大電導鈣離子激活的鉀電流(BKCa)和Kir3.4編碼的內向整流鉀電流(kir)。這些結果第一次揭示了在EPCs定向分化過程中,鉀離子通道起到至關重要的作用;且這個作用可能是促進EPCs定向分化為成熟內皮細胞;起作用的鉀離子通道亞型可能是IKCa, BKCa和Kir3.4。
【學位授予單位】:寧波大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R329.2
【共引文獻】
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本文編號:1202619
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