發(fā)布時(shí)間：2017-11-19 06:21

  本文關(guān)鍵詞：鈣離子激活鉀通道和內(nèi)向整流鉀電流對(duì)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞分化的影響

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【摘要】：內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endothelial progenitor cells, EPCs）能定向分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞（Endothelial cells, ECs）；在體內(nèi)，，EPCs能加強(qiáng)血管新生作用，修復(fù)梗死的心肌區(qū)域。通過(guò)全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，在EPCs中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多離子通道，如鈣離子激活的鉀離子通道（KCa）、內(nèi)向整流鉀電流（Kir）、容量敏感性的氯離子通道（ICl.vol）等等。本課題將探索：①在EPCs定向分化過(guò)程中哪種離子通道起到的作用最為關(guān)鍵；②該離子通道在EPCs定向分化過(guò)程中起到何種作用；③在mRNA和蛋白質(zhì)水平，檢測(cè)該離子通道亞型在EPCs定向分化過(guò)程中的表達(dá)。我們用密度梯度離心法分離出正常成人外周血中的單個(gè)核細(xì)胞層，內(nèi)皮祖細(xì)胞條件培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)EPCs充分分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞后，流式細(xì)胞檢測(cè)CD133陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)比例，結(jié)果顯示幾乎不表達(dá)（0.44±0.20%，N=6）；而加入四乙基胺（Tetraethylammonium, TEA,阻滯鉀離子通道）后，CD133+細(xì)胞的表達(dá)比例明顯提高（25.50±7.55%，N=6）。體外血管形成實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)加入TEA后，充分分化后的EPCs成管不佳，且無(wú)細(xì)胞間的相互連接。在mRNA和蛋白質(zhì)水平，我們檢測(cè)到三個(gè)鉀離子通道亞型的表達(dá)，分別是KCNN4編碼的中電導(dǎo)鈣離子激活的鉀電流（IKCa）、KCNNMA1編碼的大電導(dǎo)鈣離子激活的鉀電流（BKCa）和Kir3.4編碼的內(nèi)向整流鉀電流（kir）。這些結(jié)果第一次揭示了在EPCs定向分化過(guò)程中，鉀離子通道起到至關(guān)重要的作用；且這個(gè)作用可能是促進(jìn)EPCs定向分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞；起作用的鉀離子通道亞型可能是IKCa, BKCa和Kir3.4。
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 雷川云;柯亭羽;徐勉;;干細(xì)胞移植治療2型糖尿病急性心肌梗死的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥科學(xué);2013年19期

2 Xia-Shi Lv;Yong-Mei Cui;He-Yun Wang;Hai-Xia Lin;Wei-Ya Ni;Tomohiko Ohwada;Katsutoshi Ido;Kohei Sawada;;Synthesis and BK channel-opening activity of novel N-acylhydrazone derivatives from dehydroabietic acid[J];Chinese Chemical Letters;2013年11期

3 代靜瀾;潘波;古平;牟海剛;白家駟;;PAR-1激活對(duì)小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞CXCR4 mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖與遷移的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年33期

4 葉露薇;王志剛;張萍;;大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)及鑒定[J];激光雜志;2013年05期

5 秦彩艷;霍金龍;王配;王淑燕;苗永旺;潘偉榮;g喬

本文編號(hào)：1202619