本文關(guān)鍵詞：不同發(fā)育期鼠胚胎及多種動(dòng)物胚胎提取蛋白誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的差異化比較研究

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【摘要】：從發(fā)育生物學(xué)的角度來(lái)看,腫瘤起源于機(jī)體的正常干細(xì)胞,腫瘤是細(xì)胞異常分化現(xiàn)象,腫瘤是應(yīng)該發(fā)生凋亡而未凋亡的一群細(xì)胞。因此,從發(fā)育的角度入手可以從根本上攻克腫瘤。在胚胎發(fā)育過(guò)程中,胚胎本身能夠合成促分化因子(例如Nodal蛋白)引導(dǎo)胚胎細(xì)胞分化為正常的細(xì)胞。研究表明,這些促分化因子也能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡。 研究表明,動(dòng)物細(xì)胞中提取的一些蛋白質(zhì)能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡。其他實(shí)驗(yàn)室及本實(shí)驗(yàn)室大量研究表明,胚胎提取液對(duì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡具有普遍性。本實(shí)驗(yàn)室猜想并證明：發(fā)揮誘導(dǎo)作用的是胚胎提取液中的蛋白質(zhì)。這種胚胎粗提蛋白具有綠色、高效等優(yōu)點(diǎn),然而它也具有成分復(fù)雜、用量大等缺點(diǎn)。 本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)雞胚提取蛋白、蟾蜍胚胎提取蛋白誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡證明了：隨著胚胎發(fā)育,胚胎合成的促分化因子會(huì)逐漸降低。本實(shí)驗(yàn)用鼠胚胎提取蛋白作為誘導(dǎo)劑,進(jìn)一步探究該結(jié)論。選取發(fā)育期為5天、10天、15天、20天的鼠胚胎,4日齡鼠和成體鼠器官分別提取蛋白質(zhì)。蛋白濃度分別設(shè)置為2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL。這些蛋白質(zhì)誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡時(shí)發(fā)現(xiàn),隨著胚胎發(fā)育,胚胎提取蛋白的誘導(dǎo)效果逐漸降低。 蛋白質(zhì)的分離在整個(gè)生物學(xué)界都是一個(gè)難題。為了提高誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的效率,本實(shí)驗(yàn)篩選出較高效的胚胎提取蛋白；探究?jī)煞N胚胎提取蛋白發(fā)揮協(xié)同作用共同誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡。用蒼蠅胚胎、牛蛙胚胎、孔雀魚(yú)胚胎、蟾蜍胚胎的提取蛋白作為誘導(dǎo)劑。將蒼蠅胚胎提取蛋白濃度設(shè)置為1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL,分別進(jìn)行多次重復(fù)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。其他胚胎提取蛋白進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)。用光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等檢測(cè)手段檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)蒼蠅胚胎提取蛋白的效率最高,其他順次降低。這四種蛋白兩兩組合的混合蛋白(各1mg/mL,共2mg/mL)與四種蛋白(1mg/mL)單獨(dú)誘導(dǎo)效果相比,不具有優(yōu)勢(shì)。它們與濃度為2mg/mL的胚胎提取蛋白單獨(dú)誘導(dǎo)效果相比,差別巨大。這說(shuō)明現(xiàn)它們之間沒(méi)有協(xié)同性。
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R321

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1192172