本文關鍵詞：慢病毒介導TGF-β1基因誘導大鼠骨髓間充質干細胞成軟骨細胞分化

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【摘要】：[目的]探討慢病毒介導轉化生長因子β1(tansforming growth factor bata 1,TGF-β1)基因轉染大鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)誘導成軟骨細胞分化的作用。[方法]密度梯度離心法分離培養(yǎng)BMSCs,探索病毒感染最佳條件,取第3代細胞,分為實驗組和對照組,通過慢病毒載體將外源性TGF-β1基因轉染入細胞,觀察綠色熒光表達情況,Real-time PCR法和western blot法檢測TGF-β1基因的mRNA和蛋白表達情況,7、14 d時行Ⅱ型膠原免疫細胞化學染色、甲苯胺藍染色和Real-time PCR檢測Ⅱ型膠原及聚集蛋白聚糖的表達。[結果]TGF-β1基因轉染BMSCs后能夠穩(wěn)定表達。轉染7、14 d時,實驗組免疫細胞化學染色、甲苯胺藍染色均為陽性。轉染7、14 d時,實驗組II型膠原mRNA均顯著高于對照組(P0.01)。轉染7 d時,實驗組聚集蛋白聚糖mRNA變化不明顯,而14 d時顯著高于對照組(P0.01)。[結論]慢病毒介導的TGF-β1基因可成功轉染大鼠BMSCs,并誘導其向軟骨細胞分化。在此過程中軟骨特異性標志Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖的mRNA表達具有時間差異性。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學;浙江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81373669) 浙江省重點科技創(chuàng)新團隊計劃資助項目(編號:2011R50022-01) 浙江省重點實驗室計劃資助項目(編號:2013E10024)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 各種原因造成的關節(jié)軟骨損傷及缺損是骨科醫(yī)生面臨的一大難題。由于關節(jié)軟骨自身修復能力很差,一旦損傷,很難自行修復。而傳統(tǒng)的外科手術、軟骨移植等治療手段并不能完全恢復軟骨原有結構和功能,且軟骨移植還受到細胞來源的限制[1]。因此人們對軟骨損傷修復的研究逐漸轉向了成

【共引文獻】

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