發(fā)布時間：2017-11-14 19:36

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)TGF-β1基因誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞分化

  更多相關(guān)文章： 骨髓間充質(zhì)干細胞 成軟骨分化 轉(zhuǎn)化生長因子β 慢病毒載體 大鼠

【摘要】：[目的]探討慢病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長因子β1(tansforming growth factor bata 1,TGF-β1)基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)誘導(dǎo)成軟骨細胞分化的作用。[方法]密度梯度離心法分離培養(yǎng)BMSCs,探索病毒感染最佳條件,取第3代細胞,分為實驗組和對照組,通過慢病毒載體將外源性TGF-β1基因轉(zhuǎn)染入細胞,觀察綠色熒光表達情況,Real-time PCR法和western blot法檢測TGF-β1基因的mRNA和蛋白表達情況,7、14 d時行Ⅱ型膠原免疫細胞化學(xué)染色、甲苯胺藍染色和Real-time PCR檢測Ⅱ型膠原及聚集蛋白聚糖的表達。[結(jié)果]TGF-β1基因轉(zhuǎn)染BMSCs后能夠穩(wěn)定表達。轉(zhuǎn)染7、14 d時,實驗組免疫細胞化學(xué)染色、甲苯胺藍染色均為陽性。轉(zhuǎn)染7、14 d時,實驗組II型膠原mRNA均顯著高于對照組(P0.01)。轉(zhuǎn)染7 d時,實驗組聚集蛋白聚糖mRNA變化不明顯,而14 d時顯著高于對照組(P0.01)。[結(jié)論]慢病毒介導(dǎo)的TGF-β1基因可成功轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,并誘導(dǎo)其向軟骨細胞分化。在此過程中軟骨特異性標(biāo)志Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖的mRNA表達具有時間差異性。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué);浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81373669) 浙江省重點科技創(chuàng)新團隊計劃資助項目(編號:2011R50022-01) 浙江省重點實驗室計劃資助項目(編號:2013E10024)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 各種原因造成的關(guān)節(jié)軟骨損傷及缺損是骨科醫(yī)生面臨的一大難題。由于關(guān)節(jié)軟骨自身修復(fù)能力很差,一旦損傷,很難自行修復(fù)。而傳統(tǒng)的外科手術(shù)、軟骨移植等治療手段并不能完全恢復(fù)軟骨原有結(jié)構(gòu)和功能,且軟骨移植還受到細胞來源的限制[1]。因此人們對軟骨損傷修復(fù)的研究逐漸轉(zhuǎn)向了成

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 孫瓊;焦順昌;;非小細胞肺癌疫苗治療的現(xiàn)狀[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年04期

2 郭平;王升啟;;四物湯及活性單體對血虛證小鼠骨髓細胞NF-κB和TGF-β_1基因表達的影響[J];山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2013年04期

3 潘素飛;任霞;史美燕;禹林昌;張之勇;姜國勝;;PMA誘導(dǎo)K562細胞向單核細胞分化機制探討[J];中華腫瘤防治雜志;2014年14期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉學(xué)娟;MiR-18b通過SMAD2調(diào)節(jié)TGF-β1誘導(dǎo)人毛囊間充質(zhì)干細胞分化為平滑肌細胞[D];吉林大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李軍;富血小板纖維蛋白對人牙周膜細胞體外增殖及分化的影響[D];吉林大學(xué);2013年

2 康菲;miR-145在間充質(zhì)干細胞來源軟骨細胞肥大化中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 潘素飛;Egr-1和WT1優(yōu)勢結(jié)合TGF-β1在白血病細胞分化為單核/巨噬細胞過程中的作用[D];濟南大學(xué);2014年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 顏煒群,楊同書;軟骨細胞分化調(diào)節(jié)的分子機制研究進展[J];細胞生物學(xué)雜志;1993年03期

2 張亞,王曉東,張德強,劉新暉,王科文,張錫慶;誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[J];實用全科醫(yī)學(xué);2004年02期

3 顏煒群,楊同書,候立中,鈴木不二男,加藤幸夫;伴刀豆蛋白A促進培養(yǎng)的靜止軟骨細胞分化[J];實驗生物學(xué)報;1994年04期

4 裴明,曲綿域,于長隆;亡在軟骨細胞分化調(diào)節(jié)中的作用[J];中華外科雜志;1998年11期

5 賈本讓,張欽,孫正義,吳萌;骨髓間充質(zhì)干細胞體外定向軟骨細胞分化的研究[J];實用骨科雜志;2004年05期

6 李秀森 ,郭子寬 ,劉曉丹 ,侯春梅 ,毛寧;人骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)及向軟骨細胞分化[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年12期

7 王武愉;張亞;王曉東;;誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[J];實用全科醫(yī)學(xué);2008年05期

8 謝峰;張文杰;叢笑倩;陸峻泓;曹誼林;;共培養(yǎng)誘導(dǎo)小鼠ES細胞向軟骨細胞分化的初步研究[J];組織工程與重建外科雜志;2005年03期

9 王凡,劉德鴻,李瑞祥,羊惠君,唐耘熳;轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)對骺板肥大區(qū)軟骨細胞分化作用的研究[J];中國口腔種植學(xué)雜志;1998年04期

10 呂學(xué)敏,楊慶銘,鄧廉夫;WNT家族在脊椎動物骨骼發(fā)育中的作用機制[J];遺傳;2004年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 許圣榮;趙勁民;蔣宗濱;;骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[A];第十五次長江流域麻醉學(xué)學(xué)術(shù)年會暨2010年中南六省麻醉學(xué)學(xué)術(shù)年會暨2010年湖北省麻醉學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

2 陳金武;王常勇;吳軍正;郭希民;段翠密;董靈芝;;關(guān)節(jié)腔環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[A];中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第六次會員代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2004年

3 鄭朝暉;朱平;李曉燕;尚鵬;王彥宏;樊春梅;賈俊峰;;骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及體內(nèi)外誘導(dǎo)其向軟骨細胞分化[A];第十屆全國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

4 胡煜;羅陽;曹麗華;高錦蘭;李寶坤;;GDF5基因突變影響軟骨細胞分化機制的研究[A];第八次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會議(中華醫(yī)學(xué)會2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會)論文摘要匯編[C];2009年

5 肖軍;史占軍;;RE-1元件輔助抑制因子對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞分化的調(diào)控作用[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會論文選集[C];2011年

6 毛艷;張西正;;機械拉伸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會2006年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2006年

7 田娟;呂社民;;長期低劑量T-2毒素對軟骨細胞分化關(guān)鍵基因表達的影響[A];第七屆全國醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)和第四屆全國臨床應(yīng)用生物化學(xué)與分子生物學(xué)聯(lián)合學(xué)術(shù)研討會暨醫(yī)學(xué)生化分會會員代表大會論文集[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 楊禮慶;胰島素樣生長因子-1基因轉(zhuǎn)染對兔骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

2 王萬宗;體外三維培養(yǎng)條件下轉(zhuǎn)化生長因子β1基因轉(zhuǎn)染的兔骨髓間充質(zhì)干細胞促成軟骨細胞分化的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 孫冬梅;決定骨骼發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制的研究[D];東北師范大學(xué);2009年

4 孫長英;ERα和ERβ在調(diào)控椎體生長板軟骨細胞分化和增殖中的相互作用[D];中南大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 焦強;人骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

2 毛艷;力學(xué)作用對骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化影響的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

3 林天;力學(xué)刺激對骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

4 劉艷娜;Ad-XBP1S腺病毒載體的構(gòu)建及對軟骨細胞分化的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

5 黃艷丹;HDAC抑制劑誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化及機制的研究[D];浙江大學(xué);2007年

6 李建林;瘦素對大鼠骨髓基質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化過程及IGF-1表達的影響[D];華北煤炭醫(yī)學(xué)院;2009年

7 林增平;不同力學(xué)刺激對人BMSCs向軟骨細胞分化的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

8 熊奎州;豬骨髓基質(zhì)細胞的分離培養(yǎng)及向軟骨細胞分化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

9 李祥柱;Ad-IRE1α腺病毒載體的構(gòu)建及對軟骨細胞分化與凋亡的效應(yīng)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

10 李中華;兔間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)和體外向軟骨細胞分化的實驗研究[D];山東大學(xué);2008年

，

本文編號：1186764