本文關(guān)鍵詞：基于IL-4探討針刀松解法干預KOA模型兔的力學信號傳導機制的研究

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【摘要】：研究目的 本研究通過觀察針刀松解法干預膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)模型兔髕韌帶力學變化對軟骨中IL-4表達的影響,以及對關(guān)節(jié)軟骨損傷修復的影響,力求初步探索出基于IL-4的針刀松解法干預KOA模型兔促使軟骨損傷修復的力學信號傳導機制,為針刀治療膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床應用提供依據(jù)和指導。 研究方法 40只正常新西蘭兔(6月齡,雌雄各半,體重2.25±0.1kg)隨機分成四組,分別為空白組、模型組、電針組、針刀組。采用左后肢伸直位固定制動法制備膝骨關(guān)節(jié)炎兔模型,制動6周后,取材,測髕韌帶拉伸、應力松弛和蠕變力學特性,分析兔KOA髕韌帶在針刀松解法干預前后的力學變化；用ELISA方法檢測膝關(guān)節(jié)軟骨中白介素-4的含量,分析針刀松解法改善髕韌帶力學特性后,對軟骨中IL-4含量變化的影響；對各組兔關(guān)節(jié)軟骨進行形態(tài)學觀察,分析針刀松解法改善髕韌帶力學特性后,對軟骨損傷程度的改善情況。 研究結(jié)果 1髕韌帶的松弛和蠕變實驗結(jié)果：從應力松弛率和蠕變率的分析看,四組之間應力松弛率和蠕變率有顯著性差異(P0.05),針刀松解組的應力松弛率小于模型組,有顯著性差異(P0.05),模型組的應力松弛率大于正常對照組,有顯著性差異(P0.05)；針刀松解組和空白組比較有顯著性差異(P0.05)電針組與模型組相比較,無顯著性差異(P0.05) 針刀松解組蠕變率大于模型組,兩組之間有顯著性差異(P0.05),模型組的蠕變率小于正常對照組,有顯著性差異(P0.05),針刀松解組和空白組比較有顯著性.差異(P0.05)；電針組與模型組相比較有顯著性差異(P0.05)；從結(jié)果可以看出KOA模型髕韌帶應力松弛和蠕變特性都有所變化,通過對髕韌帶2小時的蠕變和應力松弛的測試也.可以看出,針刀松解組的應力松弛和蠕變曲線處于空白組和模型組之間,但更接近于正常組的曲線,提示針刀松解法可以有效恢復其應力松弛和蠕變的粘彈性特性。在拉伸力學測試中,四組最大應力、最大位移和彈性模量都有統(tǒng)計學意義(P0.05； P0.01),而最大應變無統(tǒng)計學意義(P0.05)。兩兩比較,針刀松解組最大應力與模型組相比有顯著性差異(P0.05),與空白組之間有顯著性差異(P0.05),模型組和空白組之間有極顯著性差異(P0.01)；針刀松解組的最大位移與模型組相比有顯著性差異(P0.05),與空白組比較,有顯著性差異(P0.05),模型組和空白組之間有顯著性差異(P0.05)；針刀松解組與電針組的彈性模量與模型組相比均有極顯著性差異(P0.01),與空白組比較有顯著性差異(P0.05)模型組和空白組之間有極顯著性差異(P0.01)。從結(jié)果可以看出模型組髕韌帶的拉伸力學特性有很大的改變,而針刀松解法可以有效改善這種拉伸力學特性。 2ELISA檢測兔KOA軟骨中白介素-4水平的結(jié)果表明：模型組軟骨中IL-4的含量顯著低于正常對照組,具有極顯著性差異(P0.01)；針刀松解組軟骨中IL-4的含量高于模型組,具有顯著性差異(p0.05)；針刀松解組中IL-4的含量低于空白組,具有顯著性差異(p0.05),電針組軟骨中IL-4的含量高于模型組,有顯著性差異(p0.05)；針刀松解組中IL-4的含量高于電針組,有顯著性差異(p0.05)；從結(jié)果可以看出,針刀松解法改善韌帶力學變化后,軟骨中白介素-4含量較模型組和電針組相比逐漸升高,趨于正常組,提示白介素-4在軟骨修復中起重要作用。 3關(guān)節(jié)軟骨光鏡觀察結(jié)果：空白組兔膝關(guān)節(jié)軟骨厚度正常,軟骨表面光滑,多層次細胞排列整齊及形態(tài)均正常,基質(zhì)無退變,潮線清晰,無血管翳生成,且下骨組織無異常。模型組軟骨細胞變性、壞死,軟骨表面不光滑,僅見個別殘存軟骨細胞,細胞排列明顯不規(guī)則,層次紊亂,剝脫缺損深達潮線,軟骨細胞巢居,潮線模糊或見雙重潮線,部分軟骨有血管通過和血管翳生成。針刀松解組軟骨細胞排列整齊,潮線清晰,軟骨表層比較光滑,未見血管翳形成。電針組軟骨細胞表面較光滑,著色尚均勻,軟骨細胞排列較整齊,偶見多個軟骨細胞聚集一起,細胞核濃縮。表層細胞壞死、剝脫,無血管翳形成。對各組切片按照Mank in法進行評分,結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計分析,四組評分總體差別顯著(P0.01)。兩兩比較,針刀松解組的軟骨損傷程度優(yōu)于模型組,具有極顯著差異(P0.01),與空白組比較有差異(P0.05),與電針組相比有差異(P0.05)；電針組與空白組相比,差異顯著(P0.01),與模型組相比無顯著差異(P0.05)模型組與空白組比較有極顯著差異(P0.01)。提示針刀松解法可以改善軟骨的損傷和退變程度,但未達到正常水平 研究結(jié)論 針刀松解法通過對膝關(guān)節(jié)髕韌帶的松解粘連,有效調(diào)整了關(guān)節(jié)韌帶的生物力學特性,恢復了膝關(guān)節(jié)處的力學平衡,而外周力學平衡改善的同時對軟骨中IL-4的表達產(chǎn)生影響,同時對關(guān)節(jié)軟骨損傷起到了修復和改善的作用,因此我們認為,針刀松解法改善韌帶力學變化后,通過力學信號的轉(zhuǎn)導發(fā)揮軟骨保護治療的作用,而IL-4所介導的軟骨細胞力學信號轉(zhuǎn)導通路則是其中關(guān)鍵的一條,這可能是針刀松解法治療KOA的力學信號傳導機制之一
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R245;R-332

【參考文獻】

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本文編號：1175639