本文關(guān)鍵詞：四價(jià)腦膜炎球菌多糖疫苗中結(jié)合物多糖抗原含量雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法的建立及驗(yàn)證

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【摘要】：目的建立一種檢測(cè)A、C、W135和Y群四價(jià)腦膜炎球菌多糖疫苗中各血清群多糖蛋白結(jié)合物的雙抗體夾心定量ELISA檢測(cè)方法,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法以白喉類(lèi)毒素?zé)o毒變異體(CRM197)特異性單抗為包被抗體,HRP標(biāo)記的腦膜炎球菌A、C、W135和Y群多糖特異性單抗為捕獲抗體,建立可定量檢測(cè)腦膜炎球菌各血清群結(jié)合物多糖含量的雙抗體夾心ELISA法,確定方法的最佳線(xiàn)性范圍和檢測(cè)限,并對(duì)方法的特異性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果定量檢測(cè)A群腦膜炎球菌結(jié)合物(GAMP-CRM197)多糖抗原含量的雙抗體夾心ELISA法的線(xiàn)性范圍為3.75~120 ng/ml,檢測(cè)限為3.75 ng/ml;定量檢測(cè)C群腦膜炎球菌結(jié)合物(GCMP-CRM197)多糖抗原含量的雙抗體夾心ELISA法的線(xiàn)性范圍為1.875~30 ng/ml,檢測(cè)限為0.938 ng/ml;定量檢測(cè)W135群腦膜炎球菌結(jié)合物(GWMPCRM197)多糖抗原含量的雙抗體夾心ELISA法的線(xiàn)性范圍為7.5~240 ng/ml,檢測(cè)限為7.5 ng/ml;定量檢測(cè)Y群腦膜炎球菌結(jié)合物(GYMP-CRM197)多糖抗原含量的雙抗體夾心ELISA法的線(xiàn)性范圍為1.875~60 ng/ml,檢測(cè)限為0.938 ng/ml。A、C、W135、Y群雙抗體夾心ELISA法均能特異性地檢測(cè)相應(yīng)的結(jié)合物多糖抗原含量,而不與其他群的結(jié)合物多糖抗原發(fā)生交叉反應(yīng);A、C、W135、Y群雙抗體夾心ELISA法的回收率均在80%~120%之間,檢測(cè)相應(yīng)的結(jié)合抗原樣品時(shí),變異系數(shù)(CV)均小于15%。結(jié)論建立的雙抗體夾心ELISA法特異性較強(qiáng),準(zhǔn)確性較高,重復(fù)性良好,可用于四價(jià)腦膜炎球菌多糖疫苗中各血清群結(jié)合物多糖抗原的定量檢測(cè)。
【作者單位】： 天津科技大學(xué);天津康希諾生物技術(shù)有限公司天津市呼吸道細(xì)菌重組及結(jié)合疫苗企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：863計(jì)劃“基因重配多價(jià)輪狀病毒等新型疫苗研發(fā)技術(shù)及產(chǎn)品研發(fā)”(2012AA02A401)
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： 奈瑟腦膜炎球菌(Neisseria meningitidis,簡(jiǎn)稱(chēng)腦膜炎球菌)是化膿性腦膜炎的主要致病菌。腦膜炎球菌按莢膜多糖的抗原性和化學(xué)性質(zhì)不同可分為13個(gè)血清群,與人類(lèi)疾病密切相關(guān)的主要有A、C、W135和Y群。2歲以下兒童的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟,對(duì)大多數(shù)莢膜多糖的抗原應(yīng)答反應(yīng)較弱,僅

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 畢慧;林鈴;;腦膜炎球菌疫苗[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(預(yù)防、診斷、治療用生物制品分冊(cè));2005年06期

2 楊美峰;范泉水;戴曉暢;黃鎮(zhèn);劉紅巖;;C群腦膜炎球菌莢膜多糖結(jié)合疫苗的研制[J];中國(guó)生化藥物雜志;2006年05期

3 黃鎮(zhèn),錢(qián)雯,袁琳,施z，

本文編號(hào)：1173902