本文關(guān)鍵詞：STR圖譜法從疫苗成品中鑒別生產(chǎn)用人源細(xì)胞株的研究

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【摘要】：目的:探討采用短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)圖譜分析法檢測(cè)人二倍體細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗成品,判定生產(chǎn)所用細(xì)胞基質(zhì)種類的可能性,為疫苗的質(zhì)量控制及監(jiān)測(cè)等環(huán)節(jié)提供參考。方法:研究用疫苗均以人二倍體細(xì)胞為生產(chǎn)基質(zhì),品種包括水痘減毒活疫苗、甲肝減毒活疫苗、麻疹風(fēng)疹聯(lián)合減毒活疫苗、甲肝滅活疫苗、狂犬滅活疫苗,分別來(lái)自11個(gè)廠家共22批。其中甲肝滅活疫苗均經(jīng)過(guò)純化,且均以甲醛為滅活劑�？袢疁缁钜呙鐏�(lái)自2個(gè)廠家,1家疫苗采用了柱層析純化工藝,2家疫苗均以β-丙內(nèi)酯為病毒滅活劑。首先提取疫苗成品中的DNA,然后采用STR圖譜分析方法對(duì)DNA進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)所獲得的指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì),判定生產(chǎn)所用細(xì)胞的正確性。結(jié)果:對(duì)減毒活疫苗進(jìn)行檢測(cè)可準(zhǔn)確地判定生產(chǎn)用細(xì)胞的種類,結(jié)果顯示8家疫苗生產(chǎn)企業(yè)中1家使用了錯(cuò)誤的細(xì)胞。在對(duì)滅活疫苗的檢測(cè)中,無(wú)柱層析純化工藝的狂犬滅活疫苗可得到良好的STR數(shù)據(jù),且比對(duì)結(jié)果正確。經(jīng)柱層析的狂犬滅活疫苗經(jīng)酚抽提法提取的DNA檢測(cè)可獲得STR信號(hào),盡管Penta E位點(diǎn)信號(hào)缺失也可判定出生產(chǎn)所用的細(xì)胞基質(zhì)種類及正確性。含有鋁佐劑的甲肝滅活疫苗檢測(cè)均未獲得STR圖譜數(shù)據(jù)。進(jìn)一步對(duì)2種病毒滅活劑進(jìn)行初步分析,結(jié)果顯示:利用β-丙內(nèi)酯進(jìn)行病毒滅活,對(duì)疫苗中STR檢測(cè)存在干擾,甲醛滅活對(duì)檢測(cè)無(wú)明顯影響。結(jié)論:利用STR圖譜分析法能夠直接從人二倍體細(xì)胞生產(chǎn)的減毒活疫苗和不含鋁佐劑的滅活疫苗中鑒別生產(chǎn)所用的細(xì)胞基質(zhì)種類,可為疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及監(jiān)測(cè)等環(huán)節(jié)提供參考。
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院生物制品檢定所細(xì)胞資源保藏研究中心衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定方法及其標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;內(nèi)蒙古包頭市腫瘤醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家863計(jì)劃-疫苗效果和質(zhì)量評(píng)價(jià)新技術(shù)研究((2012AA02A402);國(guó)家863計(jì)劃-腫瘤的細(xì)胞治療性疫苗及免疫性疾病細(xì)胞治療關(guān)鍵技術(shù)研究(2012AA020902) 國(guó)家實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源共享平臺(tái)(NSTI-CR14)
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： *國(guó)家863計(jì)劃-疫苗效果和質(zhì)量評(píng)價(jià)新技術(shù)研究((2012AA02A402);國(guó)家863計(jì)劃-腫瘤的細(xì)胞治療性疫苗及免疫性疾病細(xì)胞治療關(guān)鍵技術(shù)研究(2012AA020902);國(guó)家實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源共享平臺(tái)(NSTI-CR14)生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)是病毒性疫苗生產(chǎn)的重要起始材料,目前我國(guó)已批準(zhǔn)的病毒性疫苗生產(chǎn)所用的細(xì)

【參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊e，

本文編號(hào)：1172343