HIV衣殼蛋白P24與TRIM22在HEK293T細(xì)胞中的表達(dá)及共定位
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【摘要】:目的觀察人類免疫缺陷病毒(HIV)衣殼蛋白P24與三基序蛋白22(TRIM22)在HEK293T細(xì)胞中的共定位情況。方法以慢病毒載體p LP1為模板,通過(guò)PCR法擴(kuò)增p24編碼序列,克隆至p DsRed-Monomer-N1真核表達(dá)載體。經(jīng)菌落PCR、雙酶切及DNA測(cè)序進(jìn)行鑒定。將p DsRed-Monomer-N1-p24與p EGFP-N3-TRIM22載體共同轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,用熒光顯微鏡觀察p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP的表達(dá)及共定位情況。結(jié)果經(jīng)菌落PCR、雙酶切及測(cè)序鑒定,成功構(gòu)建p DsRedMonomer-N1-p24真核表達(dá)載體。通過(guò)熒光顯微鏡檢測(cè)發(fā)現(xiàn),p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP在HEK293T細(xì)胞中存在共定位關(guān)系。結(jié)論 HIV衣殼蛋白P24與TRIM22存在共定位。
【作者單位】: 濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:山東省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2011YD18015) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2012CM009) 山東省高等學(xué)?萍加(jì)劃(J11LF89) 煙臺(tái)市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2011078)
【分類號(hào)】:R373
【正文快照】: 人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiencyvirus,HIV)是造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒。其GAG基因編碼約500個(gè)氨基酸組成的衣殼蛋白前體Pr55Gag,經(jīng)蛋白酶水解形成P24、P17等[1-2]。P24是HIV的主要核蛋白,參與形成病毒核心顆粒的外層,保護(hù)RNA不受外界核酸酶破壞[3-4]。含三基
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,本文編號(hào):1167717
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