本文關(guān)鍵詞：血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的新生小鼠心肌細(xì)胞肥大模型

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【摘要】：目的探索新生小鼠心肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法,建立血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)的小鼠心肌細(xì)胞肥大模型。方法使用0.03%的胰酶+0.04%的2型膠原酶多次消化分離心肌細(xì)胞,差時(shí)貼壁法純化心肌細(xì)胞。1μmol/L AngⅡ刺激心肌細(xì)胞肥大,α-actinin染色進(jìn)行心肌細(xì)胞純度鑒定及面積檢測(cè),實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物的表達(dá),Western blot法檢測(cè)蛋白質(zhì)磷酸化水平。結(jié)果培養(yǎng)得到的小鼠心肌細(xì)胞具有較高純度及存活力;AngⅡ刺激后心肌細(xì)胞面積增大、蛋白合成增加,ANP、BNP、β-MHC等心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物的mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組明顯升高(P0.05),而α-MHC表達(dá)則下降(P0.05);此外,AngⅡ刺激組ERK、JNK與p38的磷酸化水平較對(duì)照組明顯上調(diào)(P0.05)。結(jié)論使用改良的新生小鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)方法,成功培養(yǎng)了具有較高純度及存活力的小鼠心肌細(xì)胞,并建立了AngⅡ誘導(dǎo)的小鼠心肌細(xì)胞肥大模型。
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)科、武漢大學(xué)心血管病研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81300070;81270303;81470516) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金資助項(xiàng)目(20130141130010)
【分類(lèi)號(hào)】：R722.1;R-332
【正文快照】： 心肌肥厚是高血壓、心肌梗死、瓣膜狹窄等多種心血管疾病向心力衰竭發(fā)展的共有病理生理過(guò)程,雖然其最初為心臟負(fù)荷增加或遭受損傷時(shí)的一種代償性反應(yīng),早期能夠減輕室壁壓力并維持心排出量,然而長(zhǎng)期持續(xù)性的心肌肥厚將發(fā)展為失代償,最終導(dǎo)致心力衰竭[1]。心肌細(xì)胞肥大是心肌肥

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本文編號(hào)：1164270