本文關鍵詞：中國布魯氏菌分離株REP-PCR基因分型研究與應用

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【摘要】：布魯氏菌病也就是布魯氏菌入侵機體而引發(fā)的傳染病,包括在人和動物之間極易感染,不僅在中國乃至全球都流行的人畜共患病。據(jù)統(tǒng)計全國共有25個省市自治區(qū)都有布魯氏菌病的分布,從1993年到2009年,布魯氏菌病發(fā)病率上升了130倍,嚴重影響了畜牧業(yè)的發(fā)展,一個多世紀以來,該病一直被列為世界性五大獸疫之一。 依據(jù)對宿主偏好性以及培養(yǎng)和生物學特性的不同,傳統(tǒng)的基因分型方法已經(jīng)將布魯氏菌分為9個種19個亞型,包括羊種1、2、3亞型,牛種1、2、3、4、5、6、7、9亞型,豬種1、2、3、4、5亞型,犬種,沙林鼠種,綿羊附睪種,田鼠型,鰭型和鯨型。 本實驗選取了來自我國26個省市自治區(qū)具有代表性的176株布魯氏菌流行株,對菌株來源信息進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析；REP-PCR基因分型方法需要先進行條件摸索,建立布魯氏菌的REP-PCR分型技術；將已經(jīng)建立好的基因分型方法應用于布魯氏菌株鑒別,得出擴增圖譜；將菌株來源分析結果結合REP-PCR基因分型結果得出我國50年代到00年代之間布魯氏菌病的疫情動向和流行規(guī)律,為我國提出合理的防控措施提供依據(jù)。 從菌株來源分析得出我國布魯氏菌50年代流行布魯氏菌羊種3型和牛種1型,60年代流行布魯氏菌羊種2型,70年代流行布魯氏菌牛種6型,80年代流行犬種和牛種3型,90年代流行羊種1型,00年代以后流行羊種3型。 本實驗對影響REP-PCR反應的主要因素進行條件摸索,即模板、酶、引物和退火溫度。模板選擇采用試劑盒提取,在純度和濃度上都能滿足擴增的要求；rTaq酶用于REP擴增具有優(yōu)勢,后兩種酶擴增不出全部的條帶；引物濃度選擇10μM：40℃擴增的結果條帶是最清晰的,最終建立了布魯氏菌REP-PCR分型方法。從布魯氏菌株的聚類結果上看出牛種和羊種的親緣關系很近,部分豬種1型和豬種3型和牛種的關系很近,但羊種和牛種的關系比豬種的關系更近,更具有密切聯(lián)系。犬種和豬種、牛種的關系很近,它們之間存在著密切的關系。 羊種3型分別在50年代和00年代以后出現(xiàn)了兩次流行,50-90年代之間羊種3型感染范圍主要在西部和北部,00年代以后主要在東部、東北部和南部流行,從親緣關系上看東部的感染由北部傳播而來,東北部和南部的感染由西部傳播而來；牛種1型存在兩個分支,內(nèi)蒙古、北京、天津和河南地區(qū)菌株親緣關系近,而安徽、新疆和上海地區(qū)的菌株關系近。60年代以后山西、上海、青海、吉林、河南、山東、新疆陸續(xù)出現(xiàn)羊種2型感染疫情,其傳播動向和羊種3型一致。牛種6型主要流行于70年代,疫情主要范圍在內(nèi)蒙古、黑龍江、寧夏和西藏,黑龍江地區(qū)的菌株比其他地區(qū)的關系較遠。牛種3型80年代前的菌株聚為一支,80年代后的菌株聚為另一支,而80年代前以寧夏地區(qū)為主,80年代以后以內(nèi)蒙古和新疆地區(qū)為主。犬種布魯氏菌病主要流行于我國東部沿海城市,比如上海、江蘇、廣西、山東等地。90年代以羊種1型感染為主,其分離菌株主要出現(xiàn)在80年代以后,以內(nèi)蒙古地區(qū)感染為主
【學位授予單位】：西南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R378.5

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳從雅;布魯氏菌屬細菌分種分型簡史和研究進展(綜述)[J];地方病通報;1990年01期

2 王永成,王芝蘭;氧化代謝試驗用于布氏菌分型的實驗報告[J];中國地方病防治雜志;1991年04期

3 王曉英,黃建;細菌DNA G+Cmol%在布氏菌種鑒定中的應用[J];中國地方病防治雜志;1992年02期

4 崔慶祿,冬青,孫秀蘭;布氏菌新噬菌體的分離及應用研究[J];中國地方病防治雜志;1995年05期

5 尚德秋;布氏菌病研究進展[J];中國地方病防治雜志;2004年04期

6 高永輝,王希良;布魯氏菌的感染免疫研究進展[J];國外醫(yī)學.流行病學傳染病學分冊;2005年01期

7 崔步云,尹繼明,李蘭玉,樸冬日,趙鴻雁,尚德秋;布魯氏菌的Rep-PCR分型研究[J];疾病監(jiān)測;2005年08期

8 楊杰;趙素蓮;崔步云;姜海;趙鴻雁;樸冬日;;多位點可變數(shù)目串聯(lián)重復序列分型方法檢測布魯氏菌分型標準化操作方法的建立和應用[J];疾病監(jiān)測;2012年02期

9 何斌;朱虹;端青;;布魯菌基因分型研究進展[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;2009年03期

10 王瑞白;劉海洪;邱海燕;宋亞軍;楊瑞馥;闞飆;;我國霍亂弧菌的脂肪酸分型研究[J];中國生物工程雜志;2007年06期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 崔步云;布魯氏菌脈沖場凝膠電泳分型研究[D];山西醫(yī)科大學;2006年

2 張淼;大腸桿菌rep-PCR指紋圖譜分析在糞便污染源示蹤上的應用[D];山東大學;2010年

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本文編號：1163113