本文關(guān)鍵詞：中國(guó)布魯氏菌分離株REP-PCR基因分型研究與應(yīng)用

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【摘要】：布魯氏菌病也就是布魯氏菌入侵機(jī)體而引發(fā)的傳染病,包括在人和動(dòng)物之間極易感染,不僅在中國(guó)乃至全球都流行的人畜共患病。據(jù)統(tǒng)計(jì)全國(guó)共有25個(gè)省市自治區(qū)都有布魯氏菌病的分布,從1993年到2009年,布魯氏菌病發(fā)病率上升了130倍,嚴(yán)重影響了畜牧業(yè)的發(fā)展,一個(gè)多世紀(jì)以來(lái),該病一直被列為世界性五大獸疫之一。 依據(jù)對(duì)宿主偏好性以及培養(yǎng)和生物學(xué)特性的不同,傳統(tǒng)的基因分型方法已經(jīng)將布魯氏菌分為9個(gè)種19個(gè)亞型,包括羊種1、2、3亞型,牛種1、2、3、4、5、6、7、9亞型,豬種1、2、3、4、5亞型,犬種,沙林鼠種,綿羊附睪種,田鼠型,鰭型和鯨型。 本實(shí)驗(yàn)選取了來(lái)自我國(guó)26個(gè)省市自治區(qū)具有代表性的176株布魯氏菌流行株,對(duì)菌株來(lái)源信息進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析；REP-PCR基因分型方法需要先進(jìn)行條件摸索,建立布魯氏菌的REP-PCR分型技術(shù)；將已經(jīng)建立好的基因分型方法應(yīng)用于布魯氏菌株鑒別,得出擴(kuò)增圖譜；將菌株來(lái)源分析結(jié)果結(jié)合REP-PCR基因分型結(jié)果得出我國(guó)50年代到00年代之間布魯氏菌病的疫情動(dòng)向和流行規(guī)律,為我國(guó)提出合理的防控措施提供依據(jù)。 從菌株來(lái)源分析得出我國(guó)布魯氏菌50年代流行布魯氏菌羊種3型和牛種1型,60年代流行布魯氏菌羊種2型,70年代流行布魯氏菌牛種6型,80年代流行犬種和牛種3型,90年代流行羊種1型,00年代以后流行羊種3型。 本實(shí)驗(yàn)對(duì)影響REP-PCR反應(yīng)的主要因素進(jìn)行條件摸索,即模板、酶、引物和退火溫度。模板選擇采用試劑盒提取,在純度和濃度上都能滿足擴(kuò)增的要求；rTaq酶用于REP擴(kuò)增具有優(yōu)勢(shì),后兩種酶擴(kuò)增不出全部的條帶；引物濃度選擇10μM：40℃擴(kuò)增的結(jié)果條帶是最清晰的,最終建立了布魯氏菌REP-PCR分型方法。從布魯氏菌株的聚類結(jié)果上看出牛種和羊種的親緣關(guān)系很近,部分豬種1型和豬種3型和牛種的關(guān)系很近,但羊種和牛種的關(guān)系比豬種的關(guān)系更近,更具有密切聯(lián)系。犬種和豬種、牛種的關(guān)系很近,它們之間存在著密切的關(guān)系。 羊種3型分別在50年代和00年代以后出現(xiàn)了兩次流行,50-90年代之間羊種3型感染范圍主要在西部和北部,00年代以后主要在東部、東北部和南部流行,從親緣關(guān)系上看東部的感染由北部傳播而來(lái),東北部和南部的感染由西部傳播而來(lái)；牛種1型存在兩個(gè)分支,內(nèi)蒙古、北京、天津和河南地區(qū)菌株親緣關(guān)系近,而安徽、新疆和上海地區(qū)的菌株關(guān)系近。60年代以后山西、上海、青海、吉林、河南、山東、新疆陸續(xù)出現(xiàn)羊種2型感染疫情,其傳播動(dòng)向和羊種3型一致。牛種6型主要流行于70年代,疫情主要范圍在內(nèi)蒙古、黑龍江、寧夏和西藏,黑龍江地區(qū)的菌株比其他地區(qū)的關(guān)系較遠(yuǎn)。牛種3型80年代前的菌株聚為一支,80年代后的菌株聚為另一支,而80年代前以寧夏地區(qū)為主,80年代以后以內(nèi)蒙古和新疆地區(qū)為主。犬種布魯氏菌病主要流行于我國(guó)東部沿海城市,比如上海、江蘇、廣西、山東等地。90年代以羊種1型感染為主,其分離菌株主要出現(xiàn)在80年代以后,以內(nèi)蒙古地區(qū)感染為主
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R378.5

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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本文編號(hào)：1163113