CRMP4慢病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)神經(jīng)元突起生長的影響
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【摘要】:目的探討CRMP4對(duì)海馬神經(jīng)元突起生長的影響。方法利用PCR技術(shù)擴(kuò)增CRMP4目的基因片段,與病毒載體連接,經(jīng)過PCR、酶切和鑒定后與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)293T細(xì)胞,制備慢病毒載體,之后感染海馬神經(jīng)元,觀察神經(jīng)元突起生長的變化,并進(jìn)行定量分析。結(jié)果擴(kuò)增出CRMP4目的基因,成功構(gòu)建CRMP4慢病毒載體,病毒滴度為1.0×107~1.0×108U/ml;對(duì)照細(xì)胞轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒后見GFP表達(dá),分布于神經(jīng)元的胞體和突起,細(xì)胞隨著發(fā)育不斷極化,分化出樹突和軸突,突起不斷延長;過表達(dá)CRMP4后,可見神經(jīng)元的突起延長,分支較對(duì)照組增多;定量結(jié)果顯示,神經(jīng)元突起總長度包括樹突和軸突均較對(duì)照組增多,分支數(shù)目亦較對(duì)照組增多,差異顯著(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了攜帶大鼠CRMP4基因的慢病毒表達(dá)載體;過表達(dá)CRMP4基因可以促進(jìn)神經(jīng)元突起的生長。
【作者單位】: 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)系;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合博士后流動(dòng)站;暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31170941) 廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(S2013010014191) 中國博士后基金(2014M562252) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金(A2014382)
【分類號(hào)】:R373
【正文快照】: 神經(jīng)元外觀上區(qū)別于其他組織細(xì)胞的一個(gè)顯著特征是具有長短不一的突起,它們借助突觸構(gòu)建出一個(gè)相互聯(lián)系又分工協(xié)作的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),完成感覺和運(yùn)動(dòng)信息的傳遞、學(xué)習(xí)和記憶、認(rèn)知和情緒等不同的功能。急性創(chuàng)傷切斷這些突起,如脊髓橫斷損傷,或者一些退行性疾病,如帕金森病黑質(zhì)神經(jīng)元
【共引文獻(xiàn)】
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1162538
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