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CRMP4慢病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)神經(jīng)元突起生長的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-09 16:00

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【摘要】:目的探討CRMP4對(duì)海馬神經(jīng)元突起生長的影響。方法利用PCR技術(shù)擴(kuò)增CRMP4目的基因片段,與病毒載體連接,經(jīng)過PCR、酶切和鑒定后與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)293T細(xì)胞,制備慢病毒載體,之后感染海馬神經(jīng)元,觀察神經(jīng)元突起生長的變化,并進(jìn)行定量分析。結(jié)果擴(kuò)增出CRMP4目的基因,成功構(gòu)建CRMP4慢病毒載體,病毒滴度為1.0×107~1.0×108U/ml;對(duì)照細(xì)胞轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒后見GFP表達(dá),分布于神經(jīng)元的胞體和突起,細(xì)胞隨著發(fā)育不斷極化,分化出樹突和軸突,突起不斷延長;過表達(dá)CRMP4后,可見神經(jīng)元的突起延長,分支較對(duì)照組增多;定量結(jié)果顯示,神經(jīng)元突起總長度包括樹突和軸突均較對(duì)照組增多,分支數(shù)目亦較對(duì)照組增多,差異顯著(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了攜帶大鼠CRMP4基因的慢病毒表達(dá)載體;過表達(dá)CRMP4基因可以促進(jìn)神經(jīng)元突起的生長。
【作者單位】: 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)系;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合博士后流動(dòng)站;暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31170941) 廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(S2013010014191) 中國博士后基金(2014M562252) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金(A2014382)
【分類號(hào)】:R373
【正文快照】: 神經(jīng)元外觀上區(qū)別于其他組織細(xì)胞的一個(gè)顯著特征是具有長短不一的突起,它們借助突觸構(gòu)建出一個(gè)相互聯(lián)系又分工協(xié)作的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),完成感覺和運(yùn)動(dòng)信息的傳遞、學(xué)習(xí)和記憶、認(rèn)知和情緒等不同的功能。急性創(chuàng)傷切斷這些突起,如脊髓橫斷損傷,或者一些退行性疾病,如帕金森病黑質(zhì)神經(jīng)元

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白元松;孫延霞;刁建東;盧振霞;;綠色熒光蛋白基因在白血病細(xì)胞K562中的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年01期

2 郭偉;李文媛;;慢病毒載體介導(dǎo)hTERT對(duì)肝細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J];長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年04期

3 周菁;徐瑜;張明慧;胡義德;;瘤內(nèi)注射慢病毒載體介導(dǎo)的Bmi1-shRNA對(duì)A549皮下移植瘤的抑制作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年20期

4 袁月;康秀峰;牟東;薛世祥;代劍華;彭貴勇;;TRADD慢病毒載體構(gòu)建及其對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年09期

5 張陽;張志堅(jiān);陳柏齡;陳東平;吳秀麗;;增強(qiáng)型綠色熒光蛋白和大鼠血管生長素-1基因共表達(dá)的重組慢病毒體外轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年18期

6 黎成金;王羊;王烈;;組織特異性CD/5-FC熱化療對(duì)裸鼠肝外組織的損傷作用[J];福州總醫(yī)院學(xué)報(bào);2010年01期

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中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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4 張陽;新型Tet-On系統(tǒng)調(diào)控慢病毒載體介導(dǎo)大鼠TH與GDNF基因腦內(nèi)移植治療大鼠帕金森病[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

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8 艾亮;RNA干擾CD133基因?qū)θ私Y(jié)腸癌干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

9 彭雍;RIP3對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖、死亡和化療敏感性的作用及其作用機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2011年

10 唐亮;TGF-β1基因轉(zhuǎn)染MSCs移植對(duì)小鼠急性心肌梗死后梗死修復(fù)的影響[D];中南大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李文媛;慢病毒載體介導(dǎo)hTERT對(duì)肝細(xì)胞生物學(xué)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 石云;TGF-β1表達(dá)載體的構(gòu)建及其在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表達(dá)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 王婧;抗口蹄疫轉(zhuǎn)基因豬成纖維細(xì)胞系的建立與鑒定[D];吉林大學(xué);2011年

4 房麗君;狂犬病病毒糖蛋白基因重組慢病毒載體的構(gòu)建及免疫試驗(yàn)[D];吉林大學(xué);2011年

5 崔勇;shRNA沉默AKT2表達(dá)對(duì)腦膠質(zhì)瘤化療藥物敏感性的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

6 蔣錦杏;可逆性永生化鼠源胰島β細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特性的研究[D];暨南大學(xué);2011年

7 賴建明;膠原—?dú)ぞ厶?膠原—納米羥基磷灰石仿生支架復(fù)合BMSCs體外構(gòu)建組織工程骨軟骨的前期實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

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【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 楊萍,殷玉芹,李振強(qiáng),宋林,劉光久;蛋白激酶C在培養(yǎng)神經(jīng)元突起生長中的作用[J];解剖學(xué)報(bào);2000年02期

2 郭國慶;張吉鳳;紀(jì)志盛;;CRMPs對(duì)神經(jīng)元突起生長的調(diào)控[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2011年06期

3 莫永炎,邵紫韞,陳瑗,周玫,張寶;星形神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)PC12神經(jīng)元突起生長發(fā)育的影響(英文)[J];中國臨床康復(fù);2004年13期

4 魯立,陸佩華,盛祖杭;蛋白質(zhì)在神經(jīng)元突起的局部合成[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年03期

5 ;[J];;年期

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本文編號(hào):1162538

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