桃紅四物湯對兔自體皮片移植模型Delta-like4表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:觀察桃紅四物湯對兔自體皮片移植模型Delta-like 4表達(dá)的影響。方法:將75只新西蘭大白兔(10~12月齡)隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組,每組15只。模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組動物進(jìn)行自體皮片移植手術(shù),假手術(shù)組僅在對應(yīng)區(qū)域作切口,不進(jìn)行皮下組織分離。造模術(shù)后假手術(shù)組和模型組動物以蒸餾水灌胃,低劑量組、中劑量組和高劑量組均以制備好的桃紅四物湯湯劑灌胃(每次給藥量分別為2.5 g·kg~(-1)、5 g·kg~(-1)、10 g·kg~(-1)),每天2次。分別在藥物干預(yù)開始后2、5、8 d從每組隨機(jī)選取5只動物,心臟采血后處死,切取移植皮片吻合區(qū)皮片組織。采用酶聯(lián)免疫吸附實驗測定血清Delta-like 4蛋白含量;所取皮片組織分成2份,一份制成石蠟切片,HE染色后測定血管密度,另一份采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法測定Delta-like 4 mRNA含量。結(jié)果:1血清Delta-like 4蛋白含量。藥物干預(yù)開始后2 d,5組動物血清Delta-like 4蛋白含量比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義[(30.58±3.56)ng·m L~(-1),(32.31±2.66)ng·m L~(-1),(33.53±1.75)ng·m L~(-1),(36.00±1.49)ng·m L~(-1),(35.63±1.87)ng·m L~(-1),F=2.669,P=0.062]。藥物干預(yù)開始后5、8 d,5組動物血清Delta-like 4蛋白含量比較,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義[(30.56±1.35)ng·m L~(-1),(33.52±2.50)ng·m L~(-1),(37.96±1.83)ng·m L~(-1),(48.74±2.34)ng·m L~(-1),(49.05±2.86)ng·m L~(-1),F=46.239,P=0.000;(29.26±2.20)ng·m L~(-1),(32.98±1.43)ng·m L~(-1),(35.24±1.97)ng·m L~(-1),(38.02±1.72)ng·m L~(-1),(36.06±2.50)ng·m L~(-1),F=8.394,P=0.000];模型組分別與假手術(shù)組和低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(5 d:P=0.112,P=0.269;8 d:P=0.340,P=0.182);中、高劑量組血清Delta-like 4蛋白含量均高于模型組(5 d:P=0.000,P=0.000;8 d:P=0.020,P=0.006);中、高劑量組比較,組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.862,P=0.245)。藥物干預(yù)后5 d,中、高劑量組血清Delta-like 4蛋白含量均高于低劑量組(P=0.000,P=0.000)。藥物干預(yù)開始后8 d,中、高劑量組Delta-like4蛋白含量與低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.105,P=0.623)。2移植皮片組織中Delta-like 4 mRNA含量。藥物干預(yù)開始后2、5、8 d,5組動物移植皮片中Delta-like 4 mRNA含量比較,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(0.26±0.03,0.29±0.04,0.34±0.06,0.42±0.03,0.39±0.04,F=7.072,P=0.001;0.25±0.03,0.34±0.04,0.39±0.03,0.48±0.06,0.45±0.06,F=12.028,P=0.001;0.25±0.06,0.30±0.04,0.35±0.03,0.44±0.03,0.43±0.04,F=10.813,P=0.000);模型組分別與假手術(shù)組和低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(2 d:P=0.452,P=0.162;5 d:P=0.320,P=0.158;8 d:P=0.171,P=0.219);模型組Delta-like4 mRNA含量低于中、高劑量組(2 d:P=0.000,P=0.001;5 d:P=0.001,P=0.009;8 d:P=0.001,P=0.002);中、高劑量組比較,組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.426,P=0.330,P=0.725)。藥物干預(yù)開始后2 d,中、高劑量組與低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.111,P=0.167);藥物干預(yù)開始后5、8 d,中、高劑量組Delta-like 4 mRNA含量均高于低劑量組(5 d:P=0.024,P=0.025;8 d:P=0.013,P=0.028)。3移植皮片組織中血管密度。藥物干預(yù)開始后2、5 d,5組動物移植皮片中每個視野(×400)中血管數(shù)量比較,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義[(5.37±0.36)個,(2.55±0.41)個,(2.83±0.24)個,(3.31±0.26)個,(3.53±0.67)個,F=4.084,P=0.014;(5.62±0.56)個,(4.25±0.68)個,(4.80±0.74)個,(5.88±0.42)個,(5.92±0.48)個,F=4.600,P=0.009];模型組均低于假手術(shù)組(P=0.001,P=0.011),模型組與低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.527,P=0.268);中、高劑量組比較,組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.620,P=0.939)。藥物干預(yù)開始后2 d,中、高劑量組與模型組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.102,P=0.131);中、高劑量組與低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.297,P=0.352)。藥物干預(yù)開始后5 d,中、高劑量組高于模型組(P=0.003,P=0.003);中、高劑量組與低劑量組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.038,P=0.033)。藥物干預(yù)開始后8 d,5組動物移植皮片中每個視野中血管數(shù)量比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義[(6.18±0.33)個,(5.86±0.66)個,(6.03±0.40)個,(6.27±0.53)個,(6.27±0.59)個,F=0.334,P=0.852]。結(jié)論:桃紅四物湯能上調(diào)兔自體皮片移植模型Delta-like 4的表達(dá),促進(jìn)血管新生。但本研究未能明確桃紅四物湯的劑量及作用時間與其上調(diào)Delta-like 4表達(dá)作用的關(guān)系,需要在今后的研究中進(jìn)一步探討。
【作者單位】: 廣東省江門市新會區(qū)中醫(yī)院;湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81373658)
【分類號】:R285.5;R-332
【正文快照】: 自體皮片移植術(shù)是目前治療皮膚缺損最常用、最有效的方法,皮片移植術(shù)后皮片形成的新血管網(wǎng)的質(zhì)量決定了皮片能否存活。Notch信號通路配體Delta-like 4參與血管新生的全過程,調(diào)控血管形成[1-6]。我們前期的研究證實,桃紅四物湯能有效促進(jìn)皮片移植術(shù)后皮片的生長[7]。本研究擬通
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