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結(jié)核桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制研究

發(fā)布時間:2017-11-07 14:22

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【摘要】:目的:探討研究不同毒力的結(jié)核分枝桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制。 方法:1以結(jié)核分枝桿菌國際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株H37Rv菌株(簡稱H37Rv菌株)和卡介苗菌株(簡稱BCG菌株)分別感染小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7),在感染1、6、12及24小時后,分別采用化學(xué)比色法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS)的活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的測定。2采用免疫印跡技術(shù)檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表達(dá)。3采用RT-PCR方法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS基因的表達(dá)(mRNA水平)。 結(jié)果:1采用化學(xué)比色法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的SOD和NOS活性及MDA和NO含量的測定:BCG菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)SOD、NOS活性和NO含量逐漸升高,而MDA含量逐漸下降,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)SOD、NOS和NO含量逐漸下降,而MDA含量逐漸增加,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2采用免疫印跡技術(shù)檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表達(dá):BCG菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD表達(dá)逐漸升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD表達(dá)逐漸下降,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)?瞻讓φ战M、BCG菌株組、H37RV菌株組感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)iNOS蛋白的表達(dá)無差異,為了進(jìn)一步研究不同毒力結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞的iNOS的蛋白表達(dá)差異,我們將對iNOS基因表達(dá)分析。3采用RT-PCR方法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的iNOS和Cu/Zn-SOD基因的表達(dá)(mRNA水平):BCG菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD mRNA和iNOS mRNA水平逐漸升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD mRNA和iNOS mRNA水平逐漸下降,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:1結(jié)核分枝桿菌感染宿主巨噬細(xì)胞導(dǎo)致巨噬細(xì)胞應(yīng)激,感染巨噬細(xì)胞的應(yīng)激與菌株毒力強(qiáng)弱有關(guān)。2低毒力的結(jié)核分枝桿菌對宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激發(fā)揮誘導(dǎo)作用。3高毒力的結(jié)核分枝桿菌對宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激發(fā)揮抑制作用。
【學(xué)位授予單位】:石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378.911

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1152794

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