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重復(fù)序列致agrC突變對(duì)金黃色葡萄球菌致病性的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-07 13:38

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【摘要】:目的探討金黃色葡萄球菌XQ株毒力變異的機(jī)制。方法以金黃色葡萄球菌ATCC25923為對(duì)照,采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察臨床分離的金葡菌XQ株在體外傳代后的毒力改變;通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析菌體及培養(yǎng)上清的蛋白譜變化,應(yīng)用PCR進(jìn)行金葡菌附屬調(diào)節(jié)基因agr擴(kuò)增并測(cè)序,分析菌株毒力變異的機(jī)制,并進(jìn)一步通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)XQ株agr調(diào)控的毒力因子變化情況。結(jié)果動(dòng)物毒力實(shí)驗(yàn)證實(shí)XQ株的毒力較對(duì)照菌ATCC25923強(qiáng),體外傳代培養(yǎng)后,XQ株第180代菌株(XQ180)的毒力明顯下降,SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn)毒力下降的XQ株(XQM株)培養(yǎng)上清的蛋白表達(dá)譜較XQ株有明顯改變,對(duì)金葡菌agr基因進(jìn)行測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)XQM株的agr C基因第443位有一段188 bp的序列插入,而該插入序列就是agr C基因255~442間序列,正是該188 bp重復(fù)序列導(dǎo)致Agr C蛋白的截短型突變,引起新橋株的致病性降低,qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果證實(shí)XQM株中受agr調(diào)控的毒力基因表達(dá)水平顯著下降。結(jié)論臨床分離的金葡菌XQ株毒力強(qiáng),在體外傳代中易發(fā)生毒力變異,這種變異與重復(fù)序列導(dǎo)致的agr C突變有關(guān)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部微生物學(xué)教研室 重慶市微生物工程實(shí)驗(yàn)室;第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院急救部;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31270979) 重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2012jj A10066,2011jj A10070) 教育部留學(xué)歸國(guó)人員啟動(dòng)基金(2013)~~
【分類號(hào)】:R378
【正文快照】: 大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部微生物學(xué)教研室,重慶市微生物工程實(shí)驗(yàn)室1;400037重慶,第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院急救部2)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,簡(jiǎn)稱金葡菌),是一種重要的人畜共患病原菌,可引起侵襲性化膿感染、食物中毒、心包炎等,危害人和動(dòng)物健康[1-2]。流行病學(xué)調(diào)查證實(shí),在我

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