本文關(guān)鍵詞：iRhom2及其突變基因重組慢病毒的包裝和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系的建立

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【摘要】：目的通過重組慢病毒感染,建立iRhom2及其突變基因的Vero細(xì)胞穩(wěn)定細(xì)胞表達(dá)系,用于iRhom2的功能研究。方法將iRhom2及其突變基因克隆到慢病毒載體Lenti-OE-Flag,構(gòu)建重組慢病毒載體Lenti-OEiRhom2和Lenti-OE-iRhom2mut,將重組質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染HEK-293T包裝細(xì)胞,獲得重組慢病毒。將重組病毒感染Vero細(xì)胞,利用puromycin進(jìn)行加壓篩選,獲得二者的重組表達(dá)細(xì)胞系。結(jié)果構(gòu)建了iRhom2及其突變基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,并獲得了重組逆轉(zhuǎn)錄病毒,并利用該病毒獲得了二者的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系。Western-blot實(shí)驗(yàn)證實(shí),二者能夠在Vero細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)。結(jié)論利用重組逆轉(zhuǎn)錄病毒感染,成功獲得了iRhom2及其突變系的Vero細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)株,為進(jìn)一步研究iRhom2的生物學(xué)功能及其機(jī)制奠定了良好的基礎(chǔ)。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(31030058) 國家科技支撐計(jì)劃(2011BA115B03)
【分類號】：R3416
【正文快照】： UNCV無毛突變系小鼠是軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心培育的一種自發(fā)突變動物模型[1,2],遺傳學(xué)研究表明該突變是單基因的常染色體半顯性遺傳。UNCV的純合突變外觀表現(xiàn)為無毛表型,雜合突變表現(xiàn)為稀毛表型。與常見的裸鼠不同,該動物模型的免疫系統(tǒng)基本正常。因此,在化妝品、皮膚藥

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【共引文獻(xiàn)】

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9 徐Z，

本文編號：1148584