本文關鍵詞：iRhom2及其突變基因重組慢病毒的包裝和穩(wěn)定表達細胞系的建立

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【摘要】：目的通過重組慢病毒感染,建立iRhom2及其突變基因的Vero細胞穩(wěn)定細胞表達系,用于iRhom2的功能研究。方法將iRhom2及其突變基因克隆到慢病毒載體Lenti-OE-Flag,構建重組慢病毒載體Lenti-OEiRhom2和Lenti-OE-iRhom2mut,將重組質粒瞬時轉染HEK-293T包裝細胞,獲得重組慢病毒。將重組病毒感染Vero細胞,利用puromycin進行加壓篩選,獲得二者的重組表達細胞系。結果構建了iRhom2及其突變基因的逆轉錄病毒載體,并獲得了重組逆轉錄病毒,并利用該病毒獲得了二者的穩(wěn)定表達細胞系。Western-blot實驗證實,二者能夠在Vero細胞內穩(wěn)定表達。結論利用重組逆轉錄病毒感染,成功獲得了iRhom2及其突變系的Vero細胞穩(wěn)定表達株,為進一步研究iRhom2的生物學功能及其機制奠定了良好的基礎。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心;
【基金】：國家自然科學基金重點項目(31030058) 國家科技支撐計劃(2011BA115B03)
【分類號】：R3416
【正文快照】： UNCV無毛突變系小鼠是軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心培育的一種自發(fā)突變動物模型[1,2],遺傳學研究表明該突變是單基因的常染色體半顯性遺傳。UNCV的純合突變外觀表現(xiàn)為無毛表型,雜合突變表現(xiàn)為稀毛表型。與常見的裸鼠不同,該動物模型的免疫系統(tǒng)基本正常。因此,在化妝品、皮膚藥

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本文編號：1148584