發(fā)布時(shí)間：2017-11-06 07:33

  本文關(guān)鍵詞：miR-106a致去卵巢小鼠認(rèn)知功能減退的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： miR-106a JAK2/STAT3信號(hào)通路 去卵巢小鼠 認(rèn)知功能減退

【摘要】：目的：絕經(jīng)后婦女認(rèn)知功能障礙是指婦女絕經(jīng)后由于長(zhǎng)期缺乏內(nèi)源性雌激素的保護(hù)，腦組織中與認(rèn)知功能密切相關(guān)的神經(jīng)元功能明顯受損從而引發(fā)的認(rèn)知功能障礙。該病繼續(xù)發(fā)展會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的阿爾茲海默�。ˋlzheimer’s disease，AD），現(xiàn)已成為當(dāng)今婦科內(nèi)分泌領(lǐng)域急需研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。microRNAs（miRNAs）是一類長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的小分子非編碼RNA，其抑制靶蛋白的合成從而參與細(xì)胞分化、生長(zhǎng)發(fā)育、增殖、死亡等一系列重要生命活動(dòng)。miRNAs在腦組織中表達(dá)豐富，且在認(rèn)知功能減退以及阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病中發(fā)揮極其重要的作用。 我們?cè)谇捌谘芯康幕A(chǔ)上，，選擇去卵巢（OVX）小鼠模擬絕經(jīng)后婦女，深入研究miRNAs在OVX小鼠認(rèn)知功能減退中的發(fā)病機(jī)制。進(jìn)一步探討miNRAs對(duì)絕經(jīng)后婦女認(rèn)知功能的影響，為絕經(jīng)后婦女認(rèn)知功能障礙的防治提供新思路。方法：選擇ICR雌性成年小鼠共90只，將其分為OVX后6周組，OVX后8周組，OVX后12周組及其年齡匹配的對(duì)照組。觀察各時(shí)間點(diǎn)小鼠去卵巢后的動(dòng)情周期，體重和子宮濕重的變化來(lái)判斷造模效果；通過(guò)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)定小鼠逃避潛伏期和平臺(tái)象限滯留時(shí)間百分比來(lái)判斷認(rèn)知功能的變化。RealtimePCR對(duì)各組小鼠海馬組織進(jìn)行miR-106a的初步驗(yàn)證；通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)miR-106a可能的候選靶基因；采用Realtime PCR和Western blot的方法檢測(cè)OVX組小鼠和對(duì)照組小鼠海馬組織中JAK2/STAT3基因及JAK2/STAT3/p-STAT3蛋白水平的表達(dá)情況；構(gòu)建miR-106a模擬物（mimics）及抑制劑（inhibitors）轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞系，進(jìn)一步驗(yàn)證miR-106a對(duì)靶基因的調(diào)控作用；通過(guò)構(gòu)建STAT33UTR熒光素酶報(bào)告載體，驗(yàn)證JAK23UTR序列中是否包含miR-106a的結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)果：OVX術(shù)后小鼠動(dòng)情周期消失，體重明顯升高（P0.01），子宮濕重顯著降低（P0.05）；Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)證實(shí)OVX后12周模型小鼠出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶功能減退，即逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)（P0.05）及滯留平臺(tái)象限時(shí)間百分比縮短（p0.01）；miR-106a在OVX后12周的模型小鼠海馬組織中表達(dá)水平明顯升高（p0.05），并且其表達(dá)水平與STAT3mRNA水平和p-STAT3蛋白水平呈負(fù)相關(guān)（p0.05）；通過(guò)體外SH-SY5Y細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)miR-106a過(guò)表達(dá)可以明顯降低STAT3/p-STAT3蛋白水平；熒光素酶報(bào)告載體實(shí)驗(yàn)證實(shí)STAT33UTR序列中包含miR-106a的兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)論：STAT3可能是miR-106a重要的功能靶點(diǎn)，miR-106a的過(guò)表達(dá)可能通過(guò)下調(diào)STAT3mRNA和p-STAT3蛋白的表達(dá)來(lái)影響JAK2/STAT3信號(hào)通路，從而參與去卵巢小鼠認(rèn)知功能減退的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張敏;吳潔;;微小RNA與認(rèn)知功能障礙[J];國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2013年03期

2 程林;向廣陽(yáng);陳德;;TGF-β1及其受體與肝癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)關(guān)系的研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2012年33期

3 韓遠(yuǎn)遠(yuǎn);劉益民;王玉;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β_1降低大鼠自發(fā)性癲癇發(fā)作并抑制膠質(zhì)細(xì)胞活化[J];中國(guó)病理生理雜志;2012年12期

4 郎彥斌;李金庫(kù);何光旭;葉偉;馬東營(yíng);李仙鋒;;富亮氨酸糖蛋白高表達(dá)對(duì)TGF-β_1及TβR-Ⅱ的影響[J];疑難病雜志;2013年08期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 黃雪琴;半胱氨酰白三烯及CvsLT_1受體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用[D];浙江大學(xué);2012年

2 王鳳章;SMADs蛋白在大鼠腦缺血再灌注后的作用及調(diào)控機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2013年

本文編號(hào)：1147932