本文關(guān)鍵詞：表達(dá)HBsAg基因的重組質(zhì)粒與重組腺病毒的免疫學(xué)初步研究

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【摘要】：乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)是病毒性肝炎的主要病原體之一,在我國廣泛流行,可引起急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝細(xì)胞性肝癌等�，F(xiàn)階段的藥物也只能通過減緩肝硬化進(jìn)程、降低肝癌發(fā)生率來延長患者壽命,無法徹底治愈,嚴(yán)重危害著公眾健康。因此,亟待發(fā)展一種能夠徹底治愈HBV感染的方法,而治療性疫苗是目前最具發(fā)展?jié)摿Φ闹委熓侄沃�。本研究選取重組質(zhì)粒pVR-S與重組腺病毒rAdV-S進(jìn)行免疫學(xué)初步研究,兩者均表達(dá)我國人群中廣泛分布的adr型乙肝病毒的S基因。首先,采用電擊注射與肌肉注射兩種方法給Balb/c小鼠免疫重組質(zhì)粒pVR-S, ELISA檢測HBsAb抗體水平,評價注射方法對免疫效果的影響；其次,分別間隔4周和3周免疫重組質(zhì)粒pVR-S,根據(jù)體液免疫效果了解適宜的免疫間隔；再次,分別以重組質(zhì)粒pVR-S單獨免疫或者以重組腺病毒rAdV-S單獨免疫,分析比較兩者誘導(dǎo)的免疫效果：最后,聯(lián)合免疫重組質(zhì)粒pVR-S與重組腺病毒rAdV-S,采用ELISA和ELISpot分別檢測體液免疫水平和細(xì)胞免疫水平,比較聯(lián)合免疫與單獨免疫對小鼠免疫應(yīng)答的不同影響。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),對重組質(zhì)粒pVR-S而言,電擊注射能夠誘導(dǎo)較高強度的體液免疫應(yīng)答,而單純的肌肉注射誘導(dǎo)的體液免疫水平較低,且間隔4周免疫重組質(zhì)粒pVR-S相對于間隔3周不僅能更快提升HBsAb抗體水平,還能減少所需的免疫次數(shù)。pVR-S引起體液免疫應(yīng)答的速度較慢,至少在初次免疫后的第6周才會出現(xiàn)應(yīng)答,而rAdV-S能夠在短期內(nèi)迅速誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答,在初次免疫后第2周即可產(chǎn)生HBsAb抗體,最終單獨免疫重組腺病毒rAdV-S誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平也始終高于單獨免疫重組質(zhì)粒pVR-S。聯(lián)合免疫pVR-S和rAdV-S能夠比單獨免疫pVR-S組產(chǎn)生更強的體液和細(xì)胞免疫效果,另外,僅免疫一次rAdV-S時,聯(lián)合免疫組誘導(dǎo)的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答比單獨免疫rAdV-S組強；而免疫兩次rAdV-S時,聯(lián)合免疫組誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答也比單獨免疫rAdV-S組強。綜上,間隔4周電擊注射重組質(zhì)粒pVR-S能更好地誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。無論是體液免疫還是細(xì)胞免疫,重組腺病毒rAdV-S都能誘導(dǎo)產(chǎn)生比重組質(zhì)粒pVR-S更好的免疫效果。更重要的是,聯(lián)合免疫pVR-S與rAdV-S能夠誘導(dǎo)比單獨免疫組強度更高的細(xì)胞免疫應(yīng)答,有助于提升機體的抗病毒能力。
【學(xué)位授予單位】：中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R373.21

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1 付欣,李冰;重組質(zhì)粒的快速酚篩法的改進(jìn)[J];廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2002年01期

2 徐琛蓉;章錦才;趙川江;張?zhí)N惠;;重組質(zhì)粒PcDNA3.1/sTNFRⅠ在小鼠體內(nèi)表達(dá)的初步研究[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

3 成桂明;楊慧蘭;;pGEX-4T-1/HSV2-gG重組質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年09期

4 王斌;質(zhì)粒DNA的構(gòu)型變化對轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用[J];遺傳學(xué)報;1987年01期

5 張秀華;;重組質(zhì)粒的穩(wěn)定性[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);1991年03期

6 熊占;質(zhì)粒DNA快速提取法[J];江西科學(xué);1995年04期

7 康小燕;蔣志偉;郁磊;羊揚;舒燕;姚豐華;朱國強;;重組質(zhì)粒pACYC184-hok/sok的構(gòu)建及穩(wěn)定性研究[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2011年03期

8 齊義鵬,黃永秀;昆蟲病毒重組質(zhì)粒的快速提取[J];病毒學(xué)報;1987年02期

9 李維琪,唐桂芳,趙明安,劉敏;重組質(zhì)粒分子量不均一性的電鏡觀察[J];石河子農(nóng)學(xué)院學(xué)報;1992年03期

10 鄧寧;重組質(zhì)粒DNA的提取和純化方法研究[J];黃淮學(xué)刊(自然科學(xué)版);1996年S4期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余勝兵;馮艾榮;周平;胡繼明;;一種新的毛細(xì)管電泳動態(tài)涂層介質(zhì)在質(zhì)粒DNA分離中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第十三屆有機分析與生物分析學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

2 李夢南;任大明;王磊;肖偉;鄭廣宏;;重組質(zhì)粒DNA在熱處理過程中的降解/變性規(guī)律研究[A];上海市化學(xué)化工學(xué)會2007年度學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2007年

3 李迪;谷鴻喜;張鳳民;鐘照華;程志;;pQE32-HPV18 L1重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

4 劉茂軍;張映;邵國青;聶向庭;;重組質(zhì)粒的構(gòu)建、表達(dá)及活性鑒定[A];動物生理生化學(xué)分會第八次學(xué)術(shù)會議暨全國反芻動物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

5 寧興旺;謝小兵;朱惠斌;王述湘;葛金文;;α-烯醇化酶重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其表達(dá)形式的研究[A];第一次全國中西醫(yī)結(jié)合檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2014年

6 趙燕;童富淡;;家蠶HMGA(BmHMGA)表達(dá)及功能初步研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2009年學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2009年

7 徐麗;彭景ii;;重組質(zhì)粒pCR3.1-brZPC'的表達(dá)及其抗生育作用[A];第九次全國生殖生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2003年

8 周珊;徐修禮;馬越云;劉家云;孫怡群;郝曉柯;;HBHA蛋白在結(jié)核病診斷中應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

9 章軍;秦燕;徐虹;陳天圣;樓士林;;利用穿梭表達(dá)重組質(zhì)粒在藍(lán)藻Synechococcus sp.PCC7942中表達(dá)胸腺素α_1[A];中國藻類學(xué)會第十一次學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2001年

10 高方友;楊輝;張治元;何家全;劉仕勇;邱克軍;;重組質(zhì)粒pEGFP-mD1x5的構(gòu)建及其在室管膜前下區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];貴州省醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第七屆學(xué)術(shù)交流會暨神經(jīng)外科學(xué)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文集[C];2006年

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1 記者　耿建擴 藺玉堂;“表達(dá)凝血八因子新的重組質(zhì)�！背晒ρ兄芠N];光明日報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張泉;重組質(zhì)粒DNA的規(guī)�；a(chǎn)工藝及質(zhì)量鑒定研究[D];揚州大學(xué);2006年

2 朱鴻飛;重組質(zhì)粒pcDNAKCpG生物安全性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2005年

3 崔福愛;BMP-6和VEGF表達(dá)載體的構(gòu)建及其促進(jìn)成骨作用的實驗研究[D];山東大學(xué);2010年

4 王席娟;SP-B-C/A(-18)基因多態(tài)性與高氧肺損傷易感性關(guān)系研究[D];華中科技大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 汪小五;肺炎支原體P1-C末端特異性抗原蛋白的制備及其基因分型的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉加美;組蛋白去乙�；敢种苿㏕SA調(diào)控Keap1-Nrf2信號通路的相關(guān)機制研究[D];南京大學(xué);2014年

3 王穎慧;表達(dá)HBsAg基因的重組質(zhì)粒與重組腺病毒的免疫學(xué)初步研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2014年

4 李夢南;熱處理廢棄重組質(zhì)粒DNA的有效性與安全性分析[D];同濟大學(xué);2008年

5 李茜;pcDNA3.1-preS1-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在小鼠精子內(nèi)的表達(dá)[D];青島大學(xué);2010年

6 張戰(zhàn)鋒;細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶2重組質(zhì)粒的構(gòu)建與表達(dá)[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 黃麗春;酵母代謝木糖產(chǎn)乙醇重組質(zhì)粒的構(gòu)建[D];廈門大學(xué);2009年

8 劉陽;剛地弓形蟲HSP70基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其誘導(dǎo)小鼠的細(xì)胞免疫應(yīng)答[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

9 楊媚娜;β轉(zhuǎn)化生長因子受體Ⅱ啟動子熒光素酶報告基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建[D];吉林大學(xué);2012年

10 馬大偉;pGBKT7-hSOD1cDNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建和序列分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2011年

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