發(fā)布時間：2017-11-04 06:06

  本文關(guān)鍵詞：蔗糖密度梯度離心法純化流感病毒工藝的優(yōu)化

  更多相關(guān)文章： 流感病毒 蔗糖密度梯度離心 純化

【摘要】：目的優(yōu)化蔗糖密度梯度離心法純化流感病毒的工藝參數(shù)。方法在不同進樣量(600、700和800 ml)時,檢測經(jīng)蔗糖密度梯度離心純化后各紫外檢測峰的糖濃度、血凝滴度及卵清蛋白含量,并對血凝滴度大于1∶480的檢測峰樣品進行蛋白質(zhì)含量和血凝素含量檢測,確定最佳收峰位置、糖度范圍及病毒濃縮液進樣量;在不同比例的30%和50%的蔗糖溶液、不同離心時間(2、3和4 h)條件下對流感病毒濃縮液進行蔗糖密度梯度離心純化,檢測純化后的病毒純化液蛋白質(zhì)、血凝素及卵清蛋白含量,計算蛋白質(zhì)含量與血凝素含量比值及血凝素回收率,確定最佳離心時間。結(jié)果確定最佳收峰位置為第三峰,糖度范圍為30%~50%之間;當病毒濃縮液進樣量為600~700 ml時,30%蔗糖溶液進液量為450~550 ml,55%蔗糖溶液進液量為400~500 ml,轉(zhuǎn)速為90 639×g離心3 h后,可獲得最佳純化效果。結(jié)論確定了蔗糖密度梯度離心法純化流感病毒的最佳工藝參數(shù),為進一步提高流感病毒的純化效果提供了參考。
【作者單位】： 長春生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【基金】：國家科技重大專項(2012ZX09201301-006) 吉林省醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項資金(YYZX201112)
【分類號】：R373.13
【正文快照】： 蔗糖密度梯度離心法能較好地去除樣品中的雜 質(zhì),回收率較高,蔗糖易溶于水,且對核酸和蛋白質(zhì)無不良影響[1],是目前流感病毒裂解疫苗、乙型腦炎疫苗[2-3]等生產(chǎn)過程中使用較廣泛的純化工藝,而目前對其工藝參數(shù)的研究報道不多。為進一步提高蔗糖密度梯度離心法純化流感病毒的效

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張文璇,石慧穎,張晉,丁志芬;應(yīng)用區(qū)帶離心法純化地鼠腎細胞乙型腦炎滅活疫苗[J];中國生物制品學(xué)雜志;2004年03期

2 王輝,李克寒,喬建英,胡文權(quán),張振萍,張宏;流行性感冒病毒滅活疫苗規(guī)�；a(chǎn)工藝的建立[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進展;2002年01期

3 石慧穎,丁志芬,趙敏,龐成華,楊抗抗,李荊;大規(guī)模區(qū)帶離心純化Vero細胞乙腦疫苗[J];中國病毒學(xué);1998年03期

4 陳萍;王紅寧;胡慧瓊;黃勇;柳萍;;應(yīng)用不連續(xù)密度梯度離心純化禽傳染性支氣管炎冠狀病毒[J];中國獸醫(yī)雜志;2007年07期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 徐守振;尹燕博;王新;;動物疫苗中常用抗原滅活劑的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年09期

2 張文璇,石慧穎,張晉,丁志芬;應(yīng)用區(qū)帶離心法純化地鼠腎細胞乙型腦炎滅活疫苗[J];中國生物制品學(xué)雜志;2004年03期

3 杜麗娟;王世光;張立;陳爾佳;楊U，

本文編號：1138135