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Hp感染動物模型的建立及重組Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保護(hù)性研究

發(fā)布時間:2017-11-02 09:20

  本文關(guān)鍵詞:Hp感染動物模型的建立及重組Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保護(hù)性研究


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【摘要】:目的: 1.構(gòu)建幽門螺桿菌感染的SPF級BALB/c小鼠動物模型,為進(jìn)一步研究幽門螺桿菌的致病機制、防治和疫苗研制提供基礎(chǔ)。 2.探討重組Bb-vacA-hpaA疫苗對感染幽門螺桿菌的SPF級BALB/c小鼠的免疫保護(hù)作用。 方法: 1.用幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504灌胃感染SPF級BALB/c小鼠,根據(jù)胃粘膜組織學(xué)檢查和快速尿素酶檢測確定感染模型的建立。 2.隨機將BALB/c小鼠分為四組:疫苗組、Bb組、PBS組和空白對照組。疫苗組用幽門螺桿菌重組Bb-vacA-hpaA疫苗灌胃免疫小鼠;Bb組用Bb菌液灌胃小鼠;PBS組用PBS液灌胃小鼠;空白對照組不作任何處理。4w后除空白組外,其他各組小鼠用幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504灌胃攻擊。 3.檢測幽門螺桿菌攻擊后各組以及空白組小鼠胃粘膜內(nèi)幽門螺桿菌感染情況、胃組織病理切片、血清中幽門螺桿菌相關(guān)抗體以及胃粘膜和腸粘液的SIgA抗體水平;攻擊前后疫苗組、Bb組和PBS組胃粘膜內(nèi)IFN-γ和IL-4含量。 4.用MTT法檢測小鼠脾細(xì)胞增殖情況,并用脾臟、胸腺指數(shù)評價幽門螺桿菌重組Bb-vacA-hpaA疫苗對SPF級BALB/c小鼠的免疫功能的增強作用。 結(jié)果: 1.通過胃粘膜的HE染色、鍍銀染色和幽門螺桿菌快速尿素酶試驗結(jié)果顯示:感染組的胃組織切片HE染色可見胃粘膜壞死、脫落、等典型炎性病變;鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)可見大量的Hp定植。成功建立幽門螺桿菌感染的SPF級BALB/c鼠動物模型。 2.免疫攻擊后各組胃組織切片結(jié)果顯示:疫苗組快速尿素酶檢測陰性的小鼠胃組織HE染色后未見典型炎性病變,鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)未見幽門螺桿菌定植;Bb組和PBS組的小鼠胃組織HE染色后可見胃粘膜壞死、脫落、充血、炎細(xì)胞浸潤等典型炎性病變,鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)可見大量的幽門螺桿菌定植?瞻捉M小鼠胃粘膜未見異常。 3. ELISA法檢測攻擊后各組小鼠胃粘膜組織勻漿上清和血清中幽門螺桿菌相關(guān)抗體以及腸粘液的SIgA抗體水平顯示:疫苗組的小鼠體內(nèi)抗體水平和胃黏膜內(nèi)細(xì)胞因子含量顯著高于其他各組。 4.MTT法檢測表明重組Bb-vacA-hpaA疫苗對幽門螺桿菌抗原刺激的脾細(xì)胞增殖水平顯著高于未免疫組。 結(jié)論: 1.成功建立幽門螺桿菌感染的SPF級BALB/c小鼠動物模型。 2.重組Bb-vacA-hpaA疫苗對幽門螺桿菌感染有一定的免疫保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】:幽門螺桿菌 動物模型 疫苗 免疫保護(hù)性
【學(xué)位授予單位】:大理學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378;R-332;R392
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-5
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 前言9-13
  • 第一部分 Hp感染動物模型的建立13-23
  • 引言13-14
  • 材料和方法14-19
  • 1. 實驗材料14
  • 2. 實驗方法14-19
  • 結(jié)果19-21
  • 討論21-22
  • 小結(jié)22-23
  • 第二部分 重組幽門螺桿菌Bb-vacA-hpaA候選疫苗的免疫保護(hù)性研究23-50
  • 引言23-24
  • 材料和方法24-39
  • 1. 實驗材料24-27
  • 2. 實驗方法27-28
  • 3 標(biāo)本檢測28-39
  • 4 統(tǒng)計學(xué)處理39
  • 結(jié)果39-48
  • 討論48-49
  • 小結(jié)49-50
  • 全文總結(jié)50-52
  • 參考文獻(xiàn)52-56
  • 附錄 (攻讀碩士期間發(fā)表的論文)56-57
  • 文獻(xiàn)綜述57-66
  • 參考文獻(xiàn)63-66
  • 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王國富;吳利先;白麗;王晶;郭利軍;潘云華;;幽門螺桿菌融合蛋白HCTV的保護(hù)性研究[J];中國生物制品學(xué)雜志;2007年03期

2 張林,安黎云,王縛鯤,劉艷麗,王憲靈,李瑋;應(yīng)用純化抗原檢測尿液和血清抗幽門螺桿菌抗體的比較[J];實用醫(yī)技雜志;2004年13期

3 張韶斌;陳斯亮;羅莞超;高映萍;羅秋紅;;免疫印跡技術(shù)對幽門螺桿菌感染的分型診斷及其臨床意義[J];實用醫(yī)技雜志;2007年32期

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本文編號:1130950

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