Hp感染動(dòng)物模型的建立及重組Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保護(hù)性研究
發(fā)布時(shí)間:2017-11-02 09:20
本文關(guān)鍵詞:Hp感染動(dòng)物模型的建立及重組Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保護(hù)性研究
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【摘要】:目的: 1.構(gòu)建幽門螺桿菌感染的SPF級(jí)BALB/c小鼠動(dòng)物模型,為進(jìn)一步研究幽門螺桿菌的致病機(jī)制、防治和疫苗研制提供基礎(chǔ)。 2.探討重組Bb-vacA-hpaA疫苗對(duì)感染幽門螺桿菌的SPF級(jí)BALB/c小鼠的免疫保護(hù)作用。 方法: 1.用幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504灌胃感染SPF級(jí)BALB/c小鼠,根據(jù)胃粘膜組織學(xué)檢查和快速尿素酶檢測(cè)確定感染模型的建立。 2.隨機(jī)將BALB/c小鼠分為四組:疫苗組、Bb組、PBS組和空白對(duì)照組。疫苗組用幽門螺桿菌重組Bb-vacA-hpaA疫苗灌胃免疫小鼠;Bb組用Bb菌液灌胃小鼠;PBS組用PBS液灌胃小鼠;空白對(duì)照組不作任何處理。4w后除空白組外,其他各組小鼠用幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504灌胃攻擊。 3.檢測(cè)幽門螺桿菌攻擊后各組以及空白組小鼠胃粘膜內(nèi)幽門螺桿菌感染情況、胃組織病理切片、血清中幽門螺桿菌相關(guān)抗體以及胃粘膜和腸粘液的SIgA抗體水平;攻擊前后疫苗組、Bb組和PBS組胃粘膜內(nèi)IFN-γ和IL-4含量。 4.用MTT法檢測(cè)小鼠脾細(xì)胞增殖情況,并用脾臟、胸腺指數(shù)評(píng)價(jià)幽門螺桿菌重組Bb-vacA-hpaA疫苗對(duì)SPF級(jí)BALB/c小鼠的免疫功能的增強(qiáng)作用。 結(jié)果: 1.通過(guò)胃粘膜的HE染色、鍍銀染色和幽門螺桿菌快速尿素酶試驗(yàn)結(jié)果顯示:感染組的胃組織切片HE染色可見(jiàn)胃粘膜壞死、脫落、等典型炎性病變;鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)可見(jiàn)大量的Hp定植。成功建立幽門螺桿菌感染的SPF級(jí)BALB/c鼠動(dòng)物模型。 2.免疫攻擊后各組胃組織切片結(jié)果顯示:疫苗組快速尿素酶檢測(cè)陰性的小鼠胃組織HE染色后未見(jiàn)典型炎性病變,鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)未見(jiàn)幽門螺桿菌定植;Bb組和PBS組的小鼠胃組織HE染色后可見(jiàn)胃粘膜壞死、脫落、充血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)等典型炎性病變,鍍銀染色后胃粘膜內(nèi)可見(jiàn)大量的幽門螺桿菌定植?瞻捉M小鼠胃粘膜未見(jiàn)異常。 3. ELISA法檢測(cè)攻擊后各組小鼠胃粘膜組織勻漿上清和血清中幽門螺桿菌相關(guān)抗體以及腸粘液的SIgA抗體水平顯示:疫苗組的小鼠體內(nèi)抗體水平和胃黏膜內(nèi)細(xì)胞因子含量顯著高于其他各組。 4.MTT法檢測(cè)表明重組Bb-vacA-hpaA疫苗對(duì)幽門螺桿菌抗原刺激的脾細(xì)胞增殖水平顯著高于未免疫組。 結(jié)論: 1.成功建立幽門螺桿菌感染的SPF級(jí)BALB/c小鼠動(dòng)物模型。 2.重組Bb-vacA-hpaA疫苗對(duì)幽門螺桿菌感染有一定的免疫保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】:幽門螺桿菌 動(dòng)物模型 疫苗 免疫保護(hù)性
【學(xué)位授予單位】:大理學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R378;R-332;R392
【目錄】:
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照4-5
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-9
- 前言9-13
- 第一部分 Hp感染動(dòng)物模型的建立13-23
- 引言13-14
- 材料和方法14-19
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料14
- 2. 實(shí)驗(yàn)方法14-19
- 結(jié)果19-21
- 討論21-22
- 小結(jié)22-23
- 第二部分 重組幽門螺桿菌Bb-vacA-hpaA候選疫苗的免疫保護(hù)性研究23-50
- 引言23-24
- 材料和方法24-39
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料24-27
- 2. 實(shí)驗(yàn)方法27-28
- 3 標(biāo)本檢測(cè)28-39
- 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理39
- 結(jié)果39-48
- 討論48-49
- 小結(jié)49-50
- 全文總結(jié)50-52
- 參考文獻(xiàn)52-56
- 附錄 (攻讀碩士期間發(fā)表的論文)56-57
- 文獻(xiàn)綜述57-66
- 參考文獻(xiàn)63-66
- 致謝66
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 王國(guó)富;吳利先;白麗;王晶;郭利軍;潘云華;;幽門螺桿菌融合蛋白HCTV的保護(hù)性研究[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2007年03期
2 張林,安黎云,王縛鯤,劉艷麗,王憲靈,李瑋;應(yīng)用純化抗原檢測(cè)尿液和血清抗幽門螺桿菌抗體的比較[J];實(shí)用醫(yī)技雜志;2004年13期
3 張韶斌;陳斯亮;羅莞超;高映萍;羅秋紅;;免疫印跡技術(shù)對(duì)幽門螺桿菌感染的分型診斷及其臨床意義[J];實(shí)用醫(yī)技雜志;2007年32期
,本文編號(hào):1130950
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