本文關(guān)鍵詞：裸鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的建立

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【摘要】：研究背景及目的 結(jié)直腸癌是一種常見(jiàn)的嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的惡性腫瘤,位居男性惡性腫瘤第四位,女性惡性腫瘤第三位,每年有超過(guò)一百萬(wàn)人被新診斷為結(jié)直腸癌；近年來(lái)隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、生活方式的改變尤其是飲食結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變,結(jié)直腸癌的發(fā)病率與死亡率呈逐年上升的趨勢(shì)。結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的建立,對(duì)于探索結(jié)直腸癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移的機(jī)制,腫瘤微環(huán)境的形成與發(fā)展以及正確評(píng)估各種藥物及治療方案的療效等都具有重要意義。本研究擬建立一種穩(wěn)定的裸鼠大腸癌肝轉(zhuǎn)移模型,以期在此平臺(tái)上創(chuàng)建高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系,便于后期進(jìn)行相關(guān)分子機(jī)制及藥物療效試驗(yàn)、腫瘤微環(huán)境等方向的研究,并期待結(jié)合臨床,指導(dǎo)治療。 方法 1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：(1)主要方法：裸鼠盲腸漿膜下腫瘤細(xì)胞注射法：將CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞懸液0.05m1(1*105/只)注射入BALB/C裸鼠盲腸壁,建立裸鼠盲腸原位腫瘤。 (2)輔助方法：裸鼠皮下成瘤法：將CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞懸液0.2m1(1*106/只)注射入BALB/C裸鼠皮下,觀察腫瘤的生長(zhǎng)及比較各代腫瘤細(xì)胞的成瘤效率。 2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：(1)轉(zhuǎn)移瘤組織直接剪碎培養(yǎng)法：此方法一般用于數(shù)量較少且瘤徑相對(duì)較大之肝臟轉(zhuǎn)移瘤的原代培養(yǎng)。 (2)：鼠肝臟切取消化培養(yǎng)法：此方法適合于較彌漫性分布且瘤徑普遍較小之肝臟轉(zhuǎn)移瘤的原代培養(yǎng)。 結(jié)果 (1)成功建立CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞盲腸原位結(jié)直腸腫瘤模型； (2)成功建立CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞盲腸至肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型； (3)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第一代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M1; (4)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第二代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M2; (5)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第三代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M3。 (6)成功完成M0、M1、M2、M3四代細(xì)胞之間增殖與轉(zhuǎn)移能力的初步評(píng)價(jià)。 結(jié)論： (1)從方法學(xué)角度來(lái)說(shuō),利用裸鼠盲腸原位接種法創(chuàng)建大腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型較其他方法更客觀、更具有應(yīng)用價(jià)值； (2)肝轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞較原位腫瘤細(xì)胞更具有增值與轉(zhuǎn)移能力,本實(shí)驗(yàn)成功提煉出了高轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞系。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移 原代培養(yǎng) 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R735.34;R-332
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 插圖和附表清單9-10
• 縮略語(yǔ)表10-13
• 1 引言13-14
• 2 材料和方法14-18
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 2.2 試劑15
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法15-18
• 3 結(jié)果18-23
• 3.1 裸鼠盲腸漿膜下注射肝轉(zhuǎn)移模型的建立18
• 3.2 肝轉(zhuǎn)移灶的原代培養(yǎng)及再注射18-19
• 3.3 胞系M1、M2、M3的建立19-20
• 3.4 胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比20-21
• 3.5 劃痕遷移試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比21
• 3.6 TRANSWELL試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比21-23
• 4 討論23-26
• 5 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 綜述30-39
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 作者簡(jiǎn)歷及在校期間發(fā)表論文39

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 楊劍鋒;張森;高楓;陳利生;;結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的建立[J];結(jié)直腸肛門(mén)外科;2009年03期

2 文軍寶;聶飚;姜泊;;兩種大腸癌細(xì)胞株小鼠肝轉(zhuǎn)移模型的建立及比較[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年07期

3 黎成金;王羊;張寶明;王烈;;裸鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的建立[J];肝膽外科雜志;2008年04期

4 ;Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristics[J];世界胃腸病學(xué)雜志;1998年05期

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本文編號(hào)：1130616