本文關(guān)鍵詞：大鼠毛囊干細胞的鑒定及選擇其最適培養(yǎng)液的研究

  更多相關(guān)文章： 大鼠 毛囊干細胞 角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基 增殖

【摘要】：目的：對所培養(yǎng)的毛囊干細胞進行鑒定,并比較3種不同培養(yǎng)基對于大鼠毛囊干細胞增殖情況的影響。方法：取潔凈SD大鼠乳鼠觸須部組織,聯(lián)合使用顯微分離技術(shù)+中性蛋白酶Ⅱ消化+胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液消化法獲得細胞懸液,使用Ⅳ型膠原差速貼壁法篩選毛囊干細胞。通過倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)特征,吉姆薩染色、流式細胞儀CD34、β1-整合素(CD29)及CK15檢測,成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色、成脂誘導(dǎo)后油紅O檢測聯(lián)合用于鑒定所獲得細胞為具有多向分化能力的毛囊干細胞。之后取顯微分離法+二部酶消化法所得細胞懸液計數(shù)后按細胞量平均分為3組,分別使用DMEM/F12培養(yǎng)+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清、角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基以及角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清分三組進行培養(yǎng),從細胞活率、生長曲線、流式細胞儀鑒定標(biāo)記物幾個方面對三組培養(yǎng)后的干細胞進行比較,從而間接判斷三種不同培養(yǎng)基對于毛囊干細胞增殖所產(chǎn)生的影響。結(jié)果：大鼠毛囊干細胞生長狀況良好,CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表達陽性,成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色陽性、成脂誘導(dǎo)后油紅O陽性,此3組間細胞活率差異無顯著性意義(P0.05)。生長曲線顯示：生長速度角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清DMEM/F12培養(yǎng)+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基(P0.05)。DMEM/F12+10%胎牛血清組中CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表達均低于其他2組(P0.05),角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基組CD34的表達高于角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基+10%胎牛血清組(P0.05),β1-整合素(CD29)及CK15則無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論：使用上述方法培養(yǎng)的大鼠毛囊干細胞生長狀況良好,具有毛囊干細胞表面標(biāo)志物,并具有多向分化能力。角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基較DMEM/F12+10%胎牛血清能培養(yǎng)出純度更高的毛囊干細胞,且在此培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入胎牛血清,能夠促進細胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：大鼠 毛囊干細胞 角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基 增殖
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-7
• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 研究內(nèi)容與方法13-24
• 結(jié)果24-30
• 討論30-39
• 小結(jié)39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻41-45
• 綜述45-52
• 參考文獻49-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文52-53
• 導(dǎo)師評閱表53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 符剛,高強國,楊恬,余瑾,向明明;無血清K-SFM培養(yǎng)條件下大鼠毛囊Bu lge細胞生物學(xué)特性的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年15期

2 陸立;陸安偉;;干細胞治療女性壓力性尿失禁的臨床進展[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2011年02期

3 仇文穎;許增祿;徐園園;;成人毛囊干細胞分選及β-連環(huán)蛋白表達的研究[J];解剖學(xué)報;2006年02期

4 曾志勇;鮑春榮;丁芳寶;楊勝生;莊聰文;程先進;梅舉;;人食管上皮細胞原代培養(yǎng)方法的改良研究[J];臨床軍醫(yī)雜志;2009年04期

5 陳亮;丁明霞;左毅剛;;體外誘導(dǎo)豬骨髓間充質(zhì)干細胞向尿路上皮細胞分化的實驗研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2011年11期

6 陳建國;孟慶楠;趙德梅;譚謙;;胰島素樣細胞生長因子-1、堿性成纖維細胞生長因子及轉(zhuǎn)化生長因子α對人表皮干細胞增殖的影響[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2012年08期

7 林樂;李旭;楊茂偉;范廣宇;;地塞米松對骨髓間充質(zhì)干細胞Runx2表達的影響[J];山東醫(yī)藥;2009年26期

8 史明艷;林峰;楊學(xué)義;竇忠英;;不同濃度的EGF對山羊毛囊干細胞體外培養(yǎng)的影響[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報;2009年03期

9 宮曉潔;孫莉;黎靖宇;袁路;劉琦;陳維平;;昆明種小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的分離及培養(yǎng)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年08期

10 王祝遷;木拉提·熱夏提;李佳;王玉杰;;大鼠觸須毛囊干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年27期

，

本文編號：1110780