本文關(guān)鍵詞：共表達丙性肝炎病毒結(jié)構(gòu)蛋白及分泌型熒光素酶Gluc的慢病毒制備與鑒定

  更多相關(guān)文章： 慢病毒 HCV 結(jié)構(gòu)蛋白 分泌型熒光素酶

【摘要】：旨在制備共表達丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)結(jié)構(gòu)蛋白及分泌型熒光素酶Gluc慢病毒VSVppHCV。通過構(gòu)建共表達HCV結(jié)構(gòu)蛋白及分泌型熒光素酶Gluc的慢病毒表達載體pCSGluc2aCE1E2,與包膜質(zhì)粒pVSVG,包裝質(zhì)粒pHR′CMVΔ8.2共轉(zhuǎn)染HEK 293T的方式獲取慢病毒,將慢病毒感染細胞后,對細胞上清中Gluc熒光素酶活性、細胞中HCV特異蛋白的表達等進行表達鑒定。結(jié)果表明:濃縮后獲得的慢病毒濃度為1×108 TU/mL,電鏡負染觀察到直徑約為100nm帶包膜的濃縮慢病毒顆粒;慢病毒VSVpp-HCV感染細胞后,細胞內(nèi)HCV特異蛋白及上清中Gluc熒光素酶的表達呈平行關(guān)系。因此通過檢測Gluc熒光素酶的表達水平可反映HCV結(jié)構(gòu)蛋白表達水平,這為建立基于慢病毒感染的帶有報告基因的HCV轉(zhuǎn)基因小鼠模型提供了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué) 微生物教研室;
【關(guān)鍵詞】： 慢病毒 HCV 結(jié)構(gòu)蛋白 分泌型熒光素酶
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81373229) 傳染病科技重大專項(2009ZX10004-705,-715)
【分類號】：R373.2
【正文快照】： 2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué),微生物教研室,呼和浩特010059)丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是威脅人類健康的重要病原體之一,可以在人體肝臟形成持續(xù)性感染,導(dǎo)致慢性肝炎、肝纖維化、肝硬化和肝癌[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計,全世界HCV感染者超過1.7億,每年全球新發(fā)感染者約為350萬人

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本文編號：1109620