本文關(guān)鍵詞：基于納米顆粒的分子展示應(yīng)用于超靈敏檢測

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【摘要】：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)在疾病預(yù)防與診斷中具有重要作用，而基于納米顆粒的功能性分子展示技術(shù)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)提供強(qiáng)大的技術(shù)手段，能夠?qū)崿F(xiàn)對低豐度檢測指標(biāo)的檢驗(yàn)。 目的：以乙型肝炎病毒（HBV）病毒樣納米顆粒和鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒為研究對象，將檢測相關(guān)的功能性分子分別展示在這兩種納米顆粒上，構(gòu)建出可用于超靈敏檢測的功能性納米顆粒復(fù)合結(jié)構(gòu)；并將其應(yīng)用到Ⅰ型人類免疫缺陷病毒（HIV-1）的P24抗原蛋白的分子檢測，實(shí)現(xiàn)對其的高靈敏度檢測。 方法：主要采用分子生物學(xué)的手段，將能夠與抗體廣譜性結(jié)合的金黃色葡萄球菌Protein G（SPG）展示在HBV病毒樣納米顆粒上，構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復(fù)合體，并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原蛋白酶連免疫吸附分析（ELISA）檢測中，檢驗(yàn)其相對的檢測靈敏度；將生物素結(jié)合肽（BAP）展示在鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒上，并經(jīng)生物素化，構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復(fù)合體，并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原蛋白的ELISA檢測中，檢驗(yàn)其相對的檢測靈敏度。 結(jié)果：成功的構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復(fù)合體，并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原檢測中，其檢測下限能夠達(dá)到1ng/mL，較商業(yè)HIV-1P24ELISA試劑盒檢測下限10ng/mL，檢測靈敏度具有顯著提高；成功的構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復(fù)合體，并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原檢測中，其檢測下限能夠達(dá)到1ng/mL，較商業(yè)HIV-1P24ELISA試劑盒檢測下限10ng/mL，檢測靈敏度具有顯著提高。 結(jié)論：研究中成功建立了基于HBV病毒樣納米顆粒及鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒的分子展示技術(shù)平臺，并將檢測關(guān)聯(lián)性的SPG和生物素分別展示在HBV病毒樣納米顆粒及鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒上，實(shí)現(xiàn)了對HIV-1P24抗原的超靈敏檢測，較商業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化ELISA檢測靈敏度具有顯著提高。
【關(guān)鍵詞】：納米顆粒 分子展示 超靈敏檢測
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R3411
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 目錄7-9
• 1 引言9-17
• 1.1 背景介紹9-10
• 1.2 理論依據(jù)10-13
• 1.2.1 HBV 病毒樣納米顆粒10-12
• 1.2.2 鐵蛋白納米顆粒12
• 1.2.3 基于蛋白質(zhì)的納米顆粒與分子展示12-13
• 1.3 研究目的與內(nèi)容13-15
• 1.3.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示應(yīng)用于檢測的研究內(nèi)容14-15
• 1.3.2 鐵蛋白納米顆粒的分子展示應(yīng)用檢測的研究內(nèi)容15
• 1.4 預(yù)期結(jié)果與意義15-17
• 1.4.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示應(yīng)用于檢測的研究意義15-16
• 1.4.2 鐵蛋白納米顆粒的分子展示應(yīng)用檢測的研究意義16-17
• 2 基于 HBV 病毒樣納米顆粒分子展示的超靈敏檢測17-49
• 2.1 材料與方法18-35
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料18-22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法22-35
• 2.2 結(jié)果與分析35-49
• 2.2.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建35-41
• 2.2.2 HBcAg149的誘導(dǎo)表達(dá)、分離純化和 TEM 表征41-43
• 2.2.3 HBcAg149-SPG 的表達(dá)、分離純化和 TEM 表征43-46
• 2.2.4 HBcAg149-SPG 應(yīng)用于超靈敏檢測46-49
• 3 基于鐵蛋白籠型納米顆粒分子展示的超靈敏檢測49-67
• 3.1 材料與方法49-55
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料49-50
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法50-55
• 3.2 結(jié)果與分析55-67
• 3.2.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建55-60
• 3.2.2 rHF 的誘導(dǎo)表達(dá)、分離純化及 TEM 表征60-61
• 3.2.3 生物素化 rHF 的誘導(dǎo)表達(dá)、分離純化及 TEM 表征61-64
• 3.2.4 生物素化 rHF 應(yīng)用于超靈敏檢測64-67
• 4 結(jié)論67-69
• 4.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示與超靈敏檢測67-68
• 4.2 鐵蛋白籠形納米顆粒與分子展示68-69
• 參考文獻(xiàn)69-73
• 文獻(xiàn)綜述73-87
• 參考文獻(xiàn)83-87
• 致謝87-88

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張敬暢,張信芳,曹維良,張?zhí)烨?負(fù)載型鐵基復(fù)合氧化物催化苯酚羥基化的研究[J];分子催化;2003年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 邱湘寧;DNA甲基化抑制劑5-氮雜胞苷和5-氮雜-2'-脫氧胞苷對編碼和非編碼RNA表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2010年

2 劉金鳳;PML NBs新組分分子鑒定及其在DNA損傷反應(yīng)中的功能機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

3 華修德;有機(jī)磷農(nóng)藥單殘留及多殘留免疫分析方法的建立與應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭少秋;CD133陽性/陰性肺癌細(xì)胞的分選、鑒定及差異基因的篩選[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

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本文編號：1104461